許多

（山東省實(shí)驗(yàn)中學(xué)東校 250109）

抗生素殘留檢測技術(shù)的應(yīng)用

許多

（山東省實(shí)驗(yàn)中學(xué)東校 250109）

抗生素在食物中的殘留會(huì)給人體帶來不良反應(yīng)，導(dǎo)致人被動(dòng)接受，體內(nèi)積累大量抗生素，影響正常的生理機(jī)能，如果攝入量過大，甚至出現(xiàn)急性中毒。鑒于此，各個(gè)國家都越來越重視抗生素殘留的監(jiān)測，本文主要針對(duì)抗生素殘留檢測技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)行分析。

抗生素殘留檢測技術(shù)；類型；應(yīng)用

從20世紀(jì)20年代青霉素被發(fā)明以來，抗生素已經(jīng)廣泛應(yīng)用在人類與動(dòng)物疾病的治療方面，在藥物用量的增加下與違禁藥物的使用，動(dòng)物產(chǎn)品中抗生素超標(biāo)的問題普遍存在，鑒于此，各個(gè)國家都越來越重視抗生素殘留的監(jiān)測。常見的抗生素殘留檢測技術(shù)有酶聯(lián)免疫分析法、薄層色譜法、放射免疫法、高效液相色譜法、紙片法、杯碟法等等。

1 氣相色譜檢測法的應(yīng)用

氣相色譜法在抗生素殘留檢測中有著廣泛的應(yīng)用，根據(jù)狀態(tài)與檢測樣品性質(zhì)的不同，采用不同的前處理措施，氣相色譜檢測法有著幾個(gè)突出的特征：①高選擇性，該種檢測技術(shù)可以分離理化性質(zhì)相似的同類抗生素組分；②高效能，一般的毛細(xì)管柱，可以具備100萬個(gè)塔豎板；③分析速度快，只要使用幾分鐘到幾十分鐘的時(shí)間，就可以完成檢測與分析過程；④應(yīng)用范圍廣，對(duì)于一些無法使用色譜進(jìn)行測定的物質(zhì)，可以使用化學(xué)分析法進(jìn)行處理。雖然氣相色譜法有著突出的優(yōu)勢，但是也存在一些不足，該種分析方法只能夠檢測揮發(fā)性的氣態(tài)物質(zhì)，對(duì)于一些腐蝕性、沸點(diǎn)高、容易分解的物質(zhì)，不適宜應(yīng)用，因此，該種方法的應(yīng)用還存在局限性。

2 高效液相色譜法的應(yīng)用

高效液相色譜法也是目前抗生素檢測中常用的方式，該種檢測技術(shù)應(yīng)用了氣相色譜理論，在技術(shù)方面應(yīng)用高效固定相、高壓泵等，滿足了效率高、分離速度快的需求。高相液相色譜法類似于常規(guī)柱色譜法，但是該種方式的填料更為精細(xì)，靈敏度可以達(dá)到GC級(jí)別。與氣相色譜檢測法相比而言，高效液相色譜法比例與組成更加靈活，pH值可以調(diào)節(jié)，可以分離很多難以分離的待檢物質(zhì)，已經(jīng)成為現(xiàn)階段抗生素檢測的常用技術(shù)，究其根本原因，是由于該種檢測技術(shù)采用甲醇、水等水溶性溶劑即可作為流動(dòng)相，成本低廉，在檢測時(shí)，中極性雜質(zhì)可以先流出，有效加快了分析的速度。

3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的應(yīng)用

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法最早應(yīng)用于20世紀(jì)70年代，該種分析方法有效提升了檢測的靈敏度與選擇性，被廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥、生物與食品方面。在液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法應(yīng)用的初級(jí)階段，電離方式僅有FD、CI、EI等，其中，質(zhì)譜中離子化的處理是一個(gè)關(guān)鍵性問題。在接口研制上，類型是多種多樣的，如離子束界面、滲透薄膜界面、傳送帶界面等等，但是該種方式都有一些缺陷，在大氣壓電離技術(shù)開始成熟后，有效提升了分析的準(zhǔn)確性。目前，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的應(yīng)用并不廣泛，處于起步階段，但是該種分析方法更具優(yōu)勢，適宜應(yīng)用在超微量樣品的分析中，靈敏度能夠達(dá)到fmol，是近年來抗生素檢測技術(shù)的發(fā)展新趨勢。

4 酶聯(lián)免疫吸附測定法

酶聯(lián)免疫吸附測定法是一種將抗體、抗原免疫反應(yīng)與酶高效催化反應(yīng)結(jié)合起來的一種檢測技術(shù)，在酶專一催化作用下，可以令底物通過氧化、水解與還原反應(yīng)顯示出顏色，特異性理想、靈敏度高，可以進(jìn)行分樣品檢測。利用酶聯(lián)免疫吸附測定法，可以使抗體與抗原與固相載體結(jié)合，提升其免疫活性，抗體與抗原還可以與某種酶結(jié)合起來形成抗體，這不僅可以保證免疫活性，又可以最大限度的保持酶的活性。在具體的測定過程中，需要將檢測標(biāo)本與酶標(biāo)抗原根據(jù)步驟進(jìn)行，再加入一定酶反應(yīng)底物，即可完成催化反應(yīng)。

5 戴爾沃檢測法

是由荷蘭其試劑是由荷蘭DSM公司生產(chǎn)并由AOAC認(rèn)證。原理是利用微生物——嗜熱芽胞菌在64℃條件下培養(yǎng)2.5～3h后會(huì)產(chǎn)酸，酸引起指示劑BCP（溴甲酚紫）變?yōu)辄S色：若牛奶樣品中不含抗生素，培養(yǎng)后樣品呈黃色，如樣品中含有抗生素，嗜熱芽胞菌生長受到抑制而無法產(chǎn)酸，指示劑將不變色?？蓹z測到β-內(nèi)酰胺類抗生素在內(nèi)的更多抗生素，如磺胺類、四環(huán)素類等，其中對(duì)青霉素和磺胺類抗生素特別靈敏。Delvotest SP法操作方便，嚴(yán)格實(shí)用，容易判斷，結(jié)果可靠，費(fèi)用適中等優(yōu)點(diǎn)：但也易出現(xiàn)假陽性，此方法適用于農(nóng)場、企業(yè)、實(shí)驗(yàn)室及政府監(jiān)測部門。

近年來，我國抗生素檢測技術(shù)的應(yīng)用得到了迅速的發(fā)展，但是與發(fā)達(dá)國家相比，在技術(shù)水平上還存在一定的差距，抗生素檢測技術(shù)不僅要快速，也要有較高的靈敏度與較低的假陽性。針對(duì)現(xiàn)階段抗生素檢測技術(shù)的水平，需要針對(duì)大型儀器檢測點(diǎn)開發(fā)酶聯(lián)合免疫試劑盒，在提升檢測靈敏度的同時(shí)滿足多種物質(zhì)的共同檢測需求。

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