安琪

（北京韓美藥品有限公司 北京市 101312）

藥物分析中色譜聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用特點和新趨勢

安琪

（北京韓美藥品有限公司 北京市 101312）

為提升藥物治療的效果，臨床上越來越重視對于藥物原料和制劑含量的測定，尤其是對于藥物中特殊成分和有機(jī)雜志的測定，為提升藥品質(zhì)量，優(yōu)化合成方式，藥品分析技術(shù)的提升顯得尤為重要。本文研究分析整理了色譜聯(lián)用技術(shù)在藥品分析中存在的特點及未來發(fā)展方向，為藥物檢測及治療疾病提供科學(xué)依據(jù)。色譜聯(lián)用如能將每種方法融合進(jìn)行優(yōu)勢互補(bǔ)，將是未來該技術(shù)發(fā)展的新趨勢。

藥物分析；色譜聯(lián)用

色譜聯(lián)用技術(shù)屬于一種臨床新興儀器分析技術(shù)，由色譜分離裝置和各種檢測裝置連接而成。藥品在研發(fā)、生產(chǎn)及臨床應(yīng)用中均需進(jìn)行藥物分析，目的在于保證藥品質(zhì)量及用藥安全[1]。藥品分析存在于藥品質(zhì)量控制、藥物代謝、興奮劑檢測、藥物研發(fā)等多個領(lǐng)域，藥品分析技術(shù)也隨之逐漸提升。色譜聯(lián)用技術(shù)因為組分分離技術(shù)與檢測技術(shù)的區(qū)別和連接方法不同，可有不同方法，本文將對其進(jìn)行分析。

1 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）

該技術(shù)最早出現(xiàn)在70年代，普及應(yīng)用始于80年代，目前該技術(shù)已經(jīng)較為成熟，在環(huán)境保護(hù)、石油化工、生命科學(xué)和醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。該技術(shù)可一次完成樣品的分離、鑒定和定量，該技術(shù)中的毛細(xì)管檢測限已達(dá)10-9g～10-12g水平。有效促進(jìn)了藥物分析的發(fā)展。

該技術(shù)具有質(zhì)譜儀掃描快、靈敏度高、信息量大、重復(fù)性好的特點，該技術(shù)中的色譜儀為質(zhì)譜儀提供的質(zhì)譜分析已經(jīng)過色譜純化，加之質(zhì)譜儀本身的優(yōu)點，本技術(shù)可提供準(zhǔn)確的樣品結(jié)構(gòu)信息。

該方法雖然存在缺點：檢查結(jié)果易受到樣品揮發(fā)性限制或極性的影響，為保證研究結(jié)果準(zhǔn)確，常需在檢查前行衍生化處理，導(dǎo)致其使用范圍受限，但因為該方法的分辨能力及靈敏度高，故仍在臨床上具有較為廣泛的應(yīng)用[2]。

2 高效液相色譜-質(zhì)譜（HPLC_MS）

2.1 高效液相色譜-質(zhì)譜優(yōu)點

該方法是在90年代出現(xiàn)并逐漸趨于成熟的，高效液相色譜分離能力高的優(yōu)點與質(zhì)譜高結(jié)構(gòu)解析能力、高專屬性等優(yōu)點融為一體，目前在體內(nèi)藥物、降解藥物分析鑒定、藥物代謝研究等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛且有專一性。該技術(shù)與GC-MS相比，應(yīng)用范圍更廣，分析前無需進(jìn)行樣品預(yù)處理，該技術(shù)全部優(yōu)點總結(jié)如下：

（1）樣品適用范圍寬，可測定的相對分子質(zhì)量寬，且對多種結(jié)構(gòu)的化合物就檢查效果好。

（2）檢測靈敏度高，能夠定性定量分析樣品中的復(fù)雜基質(zhì)痕量組分。

（3）可提供樣品結(jié)構(gòu)信息。

（4）通過碰撞誘導(dǎo)裂解，可對樣品的化學(xué)結(jié)構(gòu)信息進(jìn)行多級質(zhì)譜分析。

2.2 高效液相色譜-質(zhì)譜缺點

（1）因為樣品離子化，難以對所有結(jié)構(gòu)的化合物進(jìn)行有效分析。

（2）限制色譜流動相對組成，難以有效使用非揮發(fā)性緩沖鹽，如必須使用時，濃度常在10mmol/L以下，檢出效果較差。

（3）分析得出的樣品結(jié)構(gòu)信息為化合物的鑒定提供的依據(jù)不足，不足以解釋化合物的基團(tuán)連接位置和立體構(gòu)型[3]。

3 電噴霧離子-質(zhì)譜技術(shù)

該技術(shù)的使用原理是首檢樣品以液體狀態(tài)進(jìn)入檢查儀器，經(jīng)離子蒸發(fā)后置直徑變小，表面離子化程度升高，電荷密度升高，進(jìn)入氣相，經(jīng)錐孔、聚焦透鏡進(jìn)入質(zhì)譜儀進(jìn)行檢驗。該技術(shù)的特點如下：

（1）同一空間內(nèi)進(jìn)行離子的聚集、活化、產(chǎn)生離子肼等過程，有效減少了傳輸過程中的損失及碎片峰的干擾。

（2）樣品經(jīng)電離噴霧離子化后，以不同形態(tài)進(jìn)入質(zhì)譜儀，導(dǎo)致質(zhì)譜圖上出現(xiàn)多電荷特征離子峰圖，突出特征峰，提升檢測質(zhì)量，擴(kuò)大檢測范圍，可有效進(jìn)行藥物篩檢、農(nóng)藥檢測等操作。

（3）靈敏度高，對于10-8M以下的物質(zhì)檢出率高，尤其可以檢測微量物質(zhì)。

（4）可同時進(jìn)行定性定量分析，對受檢樣品的分子質(zhì)量和分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行詳細(xì)的分析，尤其可用以檢查復(fù)雜混合物。該技術(shù)進(jìn)行分析時，對藥物的要求小，檢測范圍廣闊，在快速鑒定微量物質(zhì)方面前景廣闊[4]。

4 免疫親和色譜技術(shù)（LAC）

該技術(shù)的檢測原理是利用析住含偶聯(lián)抗體的固定相做親和層，對待測物抗原物質(zhì)進(jìn)行選擇性可逆吸附，從而達(dá)到分離提純復(fù)雜化合物的目的。在應(yīng)用技術(shù)進(jìn)行檢查時，具有以下特點。

（1）有較強(qiáng)的選擇性和專屬性，可以識別特定的抗原抗體復(fù)合物。

（2）具有較好的提純、富集效果，吸附作用僅產(chǎn)生在特定基團(tuán)中，操作簡單，分離度高。

（3）該技術(shù)可反復(fù)使用，因其具有較低的色譜柱毒化效果，故可反復(fù)活化使用。

5 近紅外光譜技術(shù)（NIRS）

該技術(shù)在鑒定有機(jī)物質(zhì)時，應(yīng)用廣泛，光譜檢驗的信息量高波長范圍在780～2526nm之間，光譜的具體值受到濕度、殘留溶劑、粒子大小等因素的影響，故應(yīng)用該技術(shù)進(jìn)行待測物的光譜鑒定時，不能與參比物質(zhì)直接進(jìn)行光譜比較，需將所得檢測結(jié)果進(jìn)行專項處理后方可進(jìn)行比較。該檢測技術(shù)操作簡單、分析速度快，對樣品和化學(xué)試劑的損耗小，可實現(xiàn)現(xiàn)場分析。

6 高速逆流色譜技術(shù)（HSCCC）

該技術(shù)的檢驗原理是在沒有任何固體載體的情況下，將兩相互不相溶的溶劑在聚四氟乙烯管內(nèi)進(jìn)行高速行星式運轉(zhuǎn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速高達(dá)800r/min時，兩相溶劑可在靠近公軸處相互混合，遠(yuǎn)離公軸處靜置分層，最終達(dá)到分離的目的。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，由研發(fā)出正膠軸色譜分離技術(shù)、雙向逆流色譜技術(shù)及PH-區(qū)帶精致逆流色譜技術(shù)，幾種技術(shù)因為旋轉(zhuǎn)原理、固定相和流動相的不同，具備的優(yōu)勢各有不同。分析型高速逆流光譜技術(shù)在與光譜或色譜聯(lián)用時，優(yōu)勢互補(bǔ)，對于確定樣品的分子結(jié)構(gòu)效果顯著。HSCCC因為分辨率高、重現(xiàn)性好、洗脫方式多樣，與其他分析儀器兼容性好，性能可靠，故對于天然藥物的研究效果顯著。

藥品快速檢驗是藥品檢驗中的一項新技術(shù)，其發(fā)展前景越好，對于臨床上偽劣藥品的檢出越好。通過該技術(shù)及時檢出偽劣藥品，暫控可疑藥品，有效縮短了藥品的抽檢周期，提高檢出率，節(jié)約資源，有效防止偽劣藥品的轉(zhuǎn)移和流失，打擊不法分子，為患者的安全用藥作出有效貢獻(xiàn)凈化藥品市場。

目前近紅外快速鑒別具有通用定性分析模型400多個，定量分析模型40多個，可基本完成市場中常見藥品的快速篩查。化學(xué)系統(tǒng)鑒別法根據(jù)化學(xué)藥品的種類不同分別建立了鑒別系統(tǒng)37個，可有效區(qū)分同系藥物，快速鑒別同類制劑，中成藥快速鑒別系統(tǒng)可有效鑒別的中成藥種類達(dá)182類，中藥材快速鑒別系統(tǒng)系統(tǒng)可有效鑒別的中藥材種類達(dá)230種，藥品信息查詢技術(shù)可實時查詢到藥品質(zhì)量信息數(shù)據(jù)約19萬條。

7 前景與展望

現(xiàn)代色譜聯(lián)用技術(shù)日趨智能化、自動化、微量化，多種技術(shù)聯(lián)用可完全滿足樣品檢查中的快速、在線、實時、高通量的需求，目前該疾病已從單純檢測藥物質(zhì)量發(fā)展到檢查疾病或治療疾病的領(lǐng)域中，正確利用其對復(fù)雜樣品的適宜性及相關(guān)產(chǎn)物的分析，未來該技術(shù)可在精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用中發(fā)揮更大的作用。

[1]徐 穎，李豪，修 佳，等.色譜聯(lián)用技術(shù)在藥物分析中應(yīng)用及發(fā)展[J].中國醫(yī)藥科學(xué)，2014（22）：35～37.

[2]吳路民，劉偉芬，李祿輝.現(xiàn)代色譜技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用[J].科技視界，2014（21）：300～301.

[3]肖霞，曹俊凱.色譜聯(lián)用技術(shù)在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用[J].中國中醫(yī)藥咨訊，2010（30）：237～238.

[4]楊婷婷，段續(xù)，金松子，等.液相色譜-核磁共振聯(lián)用技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2012（6）：635～641.

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1004-7344（2016）32-0318-02

2016-11-2

安 琪（1983-），女，山西晉中人，無職稱，碩士研究生，研究方向為藥物分析、藥代動力學(xué)方向。