韓　莎，胡　煒，李成林，趙　斌，嚴(yán)　芳

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薄荷醇對仿刺參幼參的麻醉效果

韓莎，胡煒，李成林，趙斌，嚴(yán)芳

（山東省海洋生物研究院，山東 青島 266104）

摘要：為確立一種準(zhǔn)確測量仿刺參體長的方法，選用薄荷醇（menthol）為麻醉劑，在不同麻醉濃度條件下，觀察了對仿刺參（Apostichopus japonicus）幼參的麻醉反應(yīng)，同時比較了在不同水溫（11、13、15、17、19、21℃）環(huán)境條件下對不同規(guī)格（（L）42.37 g±1.99 g、（M）22.91 g±1.03 g、（S）12.09 g±1.51g）幼參的麻醉效果。結(jié)果顯示： 當(dāng)薄荷醇濃度在4%以內(nèi)時對仿刺參具有良好的麻醉效果，麻醉起效迅速，復(fù)蘇率為100%； 在麻醉體積分?jǐn)?shù)為0.25%、0.5%、1%時，對大規(guī)格幼參麻醉時間及復(fù)蘇時間影響顯著，而對中小規(guī)格影響不顯著； 水溫11～19℃時，隨著溫度的升高，仿刺參幼參的麻醉時間從15.62 min±1.31 min縮短到12.17 min±0.21 min，但復(fù)蘇時間從13.61 min±4.85 min顯著增加到28.10 min±7.35 min，不同水溫下薄荷醇對仿刺參幼參的麻醉效果差異顯著（P<0.05），當(dāng)水溫超過 21℃時幼參麻醉狀態(tài)出現(xiàn)異常，不適宜進(jìn)行麻醉。研究表明： 薄荷醇是一種對仿刺參安全有效的麻醉劑，在水溫11～21℃進(jìn)行測量體長的實驗中，對體質(zhì)量20 g以上的幼參適宜的麻醉體積分?jǐn)?shù)為0.5%～1%，對體質(zhì)量20 g以下的幼參適宜的麻醉體積分?jǐn)?shù)為0.25%～0.5%。

關(guān)鍵詞：仿刺參（Apostichopus japonicus）； 薄荷醇； 麻醉； 溫度

［Foundation： Agriculture Seed Project of Shandong Province，No.2014-2016； Science and Technology Development Project of Shandong Province，No.2014GNC111022； Oceanic Research Special Funds for Public Welfare Projects of State Oceanic Administration，No.201305001-4；Sea cucumber Innovation Team of Shandong Agriculture Research System，No.SDAIT- 08-011-01； AgriculturalScience and Technology Achievement Transformation Project of Shandong Province］

仿刺參（Apostichopus japonicus）養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)已成為繼海帶、對蝦、扇貝及海水魚類養(yǎng)殖之后的第五次海水養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)浪潮［1］，近年來隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)展，系統(tǒng)開展仿刺參遺傳育種研究已成為當(dāng)前人們的關(guān)注熱點以及產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重點。在仿刺參選育以及實際生產(chǎn)中，體長與體質(zhì)量的準(zhǔn)確定量是進(jìn)行育種與生產(chǎn)的關(guān)鍵指標(biāo)參數(shù)，但因仿刺參具有獨特的生理生態(tài)學(xué)特性，其體長與體質(zhì)量易受環(huán)境因素的影響，且變化較大，為其體長的準(zhǔn)確測量帶來很大困難，至今尚未形成有關(guān)仿刺參體長測量的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。麻醉可以使仿刺參短暫的保持靜止，達(dá)到減小誤差、準(zhǔn)確測量體長的目的。因此，有學(xué)者開始嘗試運用麻醉的方法進(jìn)行仿刺參體長的準(zhǔn)確測量。目前，相關(guān)麻醉方法的研究主要集中在魚蝦貝等水產(chǎn)生物［2-6］，麻醉劑多選用MS-222、丁香酚、2-苯氧乙醇、苯佐卡因和乙二醇苯醚等，而有關(guān)海參麻醉方法的研究較少，僅有以硫酸鎂［7-8］、丁香酚［8］、乙二醇苯醚［8］和薄荷醇［9］進(jìn)行仿刺參體長測量的相關(guān)實驗研究。同時，麻醉劑的麻醉效果受多種因素的影響，其中，種類、體重和溫度是影響麻醉效果的重要因素，目前對仿刺參麻醉效果的影響因素的相關(guān)研究仍鮮有報道。

薄荷醇（menthol），又名薄荷腦，化學(xué)名： 5-甲基-2-異丙基-環(huán)己醇，有抑制中樞系統(tǒng)、止痛鎮(zhèn)靜等作用［10］， 被美國 FDA視為安全無副作用的麻醉藥物，具有悠久的藥用歷史［11］，廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥（局部麻醉劑、鎮(zhèn)痛膏）、食品等行業(yè)。作為水產(chǎn)麻醉劑已應(yīng)用在多毛類［12］、雙殼類［13］及腔腸類［14］，在海參類如仿刺參A.japonicus成參［9］和糙海參H.scabra幼參［15］也有應(yīng)用研究，但尚未見有關(guān)仿刺參幼參麻醉效果的研究報道。本研究使用薄荷醇對不同規(guī)格的仿刺參幼參進(jìn)行了麻醉試驗，比較分析了不同濃度的薄荷醇以及不同水溫條件對仿刺參幼參的麻醉效果，旨在為薄荷醇應(yīng)用于仿刺參的麻醉和體長的準(zhǔn)確測量提供可靠的技術(shù)方法和基礎(chǔ)理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實驗材料

選取本實驗室培育的表觀正常、肉刺堅挺、健康活力強(qiáng)的仿刺參，按平均體質(zhì)量分為大規(guī)格（L）42.37 g±1.99 g、中規(guī)格（M）22.91 g±1.03 g、小規(guī)格（S）12.09 g±1.51 g共3種規(guī)格，分別暫養(yǎng)于有效水體0.2 m3的玻璃鋼槽中，每個玻璃鋼槽中放置 20～ 40頭，24 h連續(xù)微量充氣，每天15： 00定時按體質(zhì)量5%～8%投喂配合飼料，投飼后停止充氣1 h。日換水2/3，3 d全量換水一次，并清理殘餌和糞便。實驗海水為經(jīng)過沙濾的自然海水，鹽度33，pH8.2，DO>6 mg/L。

1.2實驗方法

1.2.1麻醉劑的配制

將薄荷醇晶體0.56 g溶解于100 mL無水乙醇中配制成母液，然后按實驗設(shè)計加入過濾海水配制成不同體積濃度的薄荷醇海水溶液作為麻醉液。

1.2.2仿刺參安全有效麻醉體積分?jǐn)?shù)的篩選

設(shè)置0.1%、0.25%、0.5%、1%、2%、4%、6%、8%、10%共9個薄荷醇體積分?jǐn)?shù)梯度，每個梯度組選用10頭中規(guī)格仿刺參進(jìn)行試驗，在實驗前24 h停止喂食，麻醉前20 min將其撈出放入解剖盤中瀝水20 min，使其自然排出體腔內(nèi)的水分，然后放入20 L的塑料整理箱中進(jìn)行麻醉，薄荷醇麻醉液體積為10 L。當(dāng)仿刺參身體不再伸縮，保持靜止，口周圍觸手完全舒展，刺激時身體和口周圍觸手均無伸縮反應(yīng)時即達(dá)到麻醉狀態(tài)。仿刺參達(dá)到麻醉狀態(tài)后即可對其進(jìn)行體長的測量，之后將體表沖洗干凈并放入潔凈的海水中進(jìn)行復(fù)蘇，當(dāng)仿刺參口周圍觸手收縮至自然狀態(tài)，開始正?；顒优佬袝r即達(dá)到復(fù)蘇狀態(tài)［8］。觀察仿刺參在麻醉及復(fù)蘇過程中的行為特征以及體表的變化，并記錄達(dá)到麻醉和復(fù)蘇的時間，確定薄荷醇對仿刺參安全有效的麻醉體積分?jǐn)?shù)范圍。

1.2.3濃度梯度的設(shè)置

根據(jù)篩選的安全有效的麻醉濃度，隨機(jī)選取 3種規(guī)格仿刺參各6頭，在15℃±0.2℃水溫下，分別放入體積分?jǐn)?shù)為 0.25%、0.5%、1%的薄荷醇海水溶液中進(jìn)行麻醉，并設(shè)3個平行組，記錄麻醉和復(fù)蘇時間。

1.2.4溫度梯度的設(shè)置

根據(jù)不同濃度薄荷醇對仿刺參的麻醉效果，選取體積分?jǐn)?shù)為0.5%的薄荷醇海水溶液。隨機(jī)選取中規(guī)格仿刺參各 6頭，分別在 11、13、15、17、19、21℃的6個水溫梯度下進(jìn)行麻醉實驗，設(shè)3個平行組，記錄麻醉和復(fù)蘇的時間。

1.2.5仿刺參體長的測量

實驗前隨機(jī)選取仿刺參10頭，對選取的仿刺參進(jìn)行體長的測量，重復(fù)測量 5次并記錄測量數(shù)據(jù)作為對照組，然后將仿刺參放入體積分?jǐn)?shù)為 0.5%的薄荷醇中進(jìn)行麻醉，達(dá)到麻醉狀態(tài)時取出進(jìn)行體長的測量，重復(fù)測量5次并記錄測量數(shù)據(jù)作為麻醉組，每次測量前重新將仿刺參放入麻醉液中浸浴 5 min后再進(jìn)行測量。最后統(tǒng)計體長的變異系數(shù)CV，CV計算公式如下：

式中，SD為標(biāo)準(zhǔn)偏差，Mean為平均值。

1.2.6數(shù)據(jù)分析

實驗數(shù)據(jù)采用 spss軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，統(tǒng)計值均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示（Mean±SD），以P<0.05表示差異顯著。

2　結(jié)果

2.1不同體積分?jǐn)?shù)薄荷醇對仿刺參幼參的麻醉反應(yīng)及效果篩選

不同體積分?jǐn)?shù)的薄荷醇對仿刺參的麻醉反應(yīng)見表1。通過各體積分?jǐn)?shù)組對仿刺參幼參的麻醉反應(yīng)觀察發(fā)現(xiàn)，薄荷醇的麻醉效果與體積分?jǐn)?shù)成正相關(guān)。在薄荷醇體積分?jǐn)?shù)為0.1%時，仿刺參麻醉1h仍達(dá)不到麻醉效果； 當(dāng)體積分?jǐn)?shù)為0.25%～5%時，對仿刺參麻醉效果較好，表現(xiàn)在 40 min內(nèi)可達(dá)到麻醉狀態(tài)，在麻醉過程中仿刺參棘堅挺，身體受刺激不斷伸縮舒展，口周圍觸手完全舒展，而且經(jīng)復(fù)蘇1 h之內(nèi)幼參可進(jìn)行正常的活動，活力較好，無異常現(xiàn)象。當(dāng)體積分?jǐn)?shù)低于4%時，復(fù)蘇率為100%； 當(dāng)體積分?jǐn)?shù)為5%時，復(fù)蘇率降到 90%； 當(dāng)體積分?jǐn)?shù)為 6%～10%時，麻醉效果較差，在麻醉和復(fù)蘇過程中仿刺參出現(xiàn)不同程度的異?，F(xiàn)象，具體表現(xiàn)在麻醉過程中身體蜷縮，棘有不同程度的收縮，口周圍觸手不完全舒展，并伴隨麻醉濃度的增大，棘逐漸由鈍圓變得平滑，口周圍觸手呈現(xiàn)完全不舒展緊閉的狀態(tài)，而且出現(xiàn)該現(xiàn)象的個體逐漸增多，在復(fù)蘇過程中仿刺參活力較差，個別個體棘逐漸出現(xiàn)化皮的現(xiàn)象； 當(dāng)體積分?jǐn)?shù)達(dá)到 10%時，除上述現(xiàn)象外，體表還出現(xiàn)大面積的褪色，而復(fù)蘇后仿刺參活動遲緩，棘柔軟不堅挺，棘及體表出現(xiàn)不同程度的化皮現(xiàn)象，部分幼參身體僵硬，形態(tài)固定，隨著復(fù)蘇時間的延長也難以恢復(fù)到正常狀態(tài)。結(jié)果顯示，在 0.25%～4%的體積分?jǐn)?shù)時，仿刺參幼參能夠較快地達(dá)到麻醉狀態(tài)，且在短時間內(nèi)復(fù)蘇達(dá)到良好的自然狀況，能夠正常攝食并保持較好的活力，是安全有效的麻醉體積分?jǐn)?shù)。

表1　不同體積分?jǐn)?shù)薄荷醇對仿刺參的麻醉反應(yīng)Tab.1　Characteristic anesthetic behaviors of menthol in different concentrations for Apostichopus japonicus

2.2不同體積分?jǐn)?shù)薄荷醇對仿刺參幼參的麻醉效果

不同規(guī)格仿刺參麻醉和復(fù)蘇所需的時間如圖1和圖2所示。當(dāng)薄荷醇體積分?jǐn)?shù)為0.25%時，小規(guī)格仿刺參麻醉時間為 13.34 min±3.02 min，復(fù)蘇時間為 9.18 min± 1.77 min； 中規(guī)格仿刺參麻醉時間為 24.83 min± 5.96min，復(fù)蘇時間為6.76 min±4.84min； 大規(guī)格仿刺參麻醉時間為26.90 min±5.09 min，復(fù)蘇時間為

圖1　不同體積分?jǐn)?shù)的薄荷醇對仿刺參麻醉時間的影響Fig.1　The effect of menthol in different concentrations on duration of anesthesia for Apostichopus japonicus

圖中不同字母表示麻醉時間存在顯著差異

Different letters indicate significant differences in the duration of anesthesia

圖2　不同體積分?jǐn)?shù)的薄荷醇對仿刺參復(fù)蘇時間的影響Fig.2　The effect of menthol in different concentrations on recovery time for Apostichopus japonicus

圖中不同字母表示復(fù)蘇時間存在顯著差異

Different letters indicate that there is a significant difference in recovery time

8.23 min±4.04 min。當(dāng)薄荷醇體積分?jǐn)?shù)為0.5%時，小規(guī)格仿刺參麻醉時間為10.74 min±3.02 min，復(fù)蘇時間為13.78 min±3.41 min； 中規(guī)格仿刺參麻醉時間為19.06 min±4.85 min，復(fù)蘇時間為6.24 min±3.65 min；大規(guī)格仿刺參麻醉時間為18.67 min±2.61 min，復(fù)蘇時間為21.41 min±5.09 min。當(dāng)薄荷醇體積分?jǐn)?shù)為1%時，小規(guī)格仿刺參麻醉時間為 7.58 min±4.32 min，復(fù)蘇時間為15.81 min±4.24 min； 中規(guī)格仿刺參麻醉時間為12.84 min±6.26 min，復(fù)蘇時間為9.67 min±6.98 min；大規(guī)格仿刺參麻醉時間為13.34 min±2.61 min，復(fù)蘇時間為28.17 min±4.9 min。

結(jié)果顯示，在相同水溫條件下，隨薄荷醇體積分?jǐn)?shù)的升高，3種規(guī)格的仿刺參麻醉所需時間表現(xiàn)出縮短的趨勢，而復(fù)蘇所需時間表現(xiàn)出增加的趨勢。但不同規(guī)格的變化幅度不同，規(guī)格越大的仿刺參，受麻醉濃度的影響越大，變化幅度亦越大。在相同麻醉體積分?jǐn)?shù)條件下，規(guī)格越大的仿刺參麻醉所需時間越長，復(fù)蘇所需時間也相應(yīng)的延長，不同體積分?jǐn)?shù)組對大規(guī)格幼參麻醉及復(fù)蘇時間影響顯著（P<0.05），而對中小規(guī)格不顯著。薄荷醇體積分?jǐn)?shù)及仿刺參規(guī)格對麻醉及復(fù)蘇所需時間均有顯著影響。

2.3不同水溫下薄荷醇對仿刺參幼參的麻醉效果

不同水溫下薄荷醇對仿刺參麻醉和復(fù)蘇的效果?如圖3所示。在水溫11℃時，麻醉時間為15.62 min± 1.31 min，復(fù)蘇時間為 13.61 min±4.85 min； 在水溫13℃時，麻醉時間為13.84 min±0.87 min，復(fù)蘇時間為13.07 min±6.26 min； 在水溫15℃時，麻醉時間為14.74 min±1.02 min，復(fù)蘇時間為8.48 min±?3.54 min；在水溫17℃時，麻醉時間14.11 min±0.65 min，復(fù)蘇時間為 12.13 min±8.39 min； 在水溫 19℃時，麻醉時間12.17 min±0.21 min，復(fù)蘇時間為28.10 min±?7.35 min。實驗中觀察發(fā)現(xiàn)，在 19℃水溫組中有極個別仿刺參幼參出現(xiàn)棘收縮的現(xiàn)象，在水溫 21℃時，仿刺參麻醉或者復(fù)蘇的實驗狀態(tài)均有別于其他水溫段，身體蜷縮不舒展，棘也收縮，口周圍觸手完全不伸展，身體min±9.44 min。從圖3可以看出，水溫為11～19℃時，隨著溫度的升高，仿刺參麻醉所需時間從 15.62?min±1.31 min縮短到12.17min±0.21 min，差異不顯著（P>0.05），但復(fù)蘇時間明顯增加，從13.61min±4.85 min增加到28.10min± 7.35 min，差異顯著（P<0.05）。其中，15?℃溫度組的復(fù)蘇時間最短，為8.48±3.54 min。不同水溫下相同體積分?jǐn)?shù)的薄荷醇對仿刺參麻醉效果有顯著差異（P<0.05）。

圖3　不同溫度下薄荷醇對仿刺參的麻醉效果Fig.3　The anesthetic effect of menthol on Apostichopus japonicus at different temperatures

水溫21℃下無麻醉時間

Water temperature 21℃ without anesthesia time

2.4麻醉對仿刺參體長的影響

仿刺參的體長在麻醉前后重復(fù)測量 5次的結(jié)果如表2所示。對照組體長測量值較為分散，測量差值（最大值與最小值之差）為 9～29 mm（18.9 mm±9.5 mm，n=10），cv為5.2%～18.9%； 麻醉組測量值趨于相對集中穩(wěn)定的趨勢，測量差值為4～8 mm（6.3 mm±2.9 mm，n=10），cv降低到1.6%～3.1%。統(tǒng)計結(jié)果顯示，麻醉前后cv從10.9%下降到2.4%，體長的平均值從73.5 mm± 15.3 mm增加到80.8 mm±12.9 mm，麻醉前后仿刺參體長的測量結(jié)果有顯著性差異（P<0.05）。

表2　仿刺參麻醉前后體長的變化Tab.2　The measurement of Apostichopus japonicus body length before and after anesthetization

3　討論

3.1不同體積分?jǐn)?shù)薄荷醇對仿刺參的麻醉效果在水產(chǎn)養(yǎng)殖實際生產(chǎn)和科學(xué)研究中，尤其是在進(jìn)行運輸、采卵、授精、標(biāo)志及稱量等操作過程時，為降低對水產(chǎn)動物的應(yīng)激反應(yīng)，避免對水產(chǎn)動物造成傷害，麻醉劑的使用越來越廣泛，不同物種所適用的麻醉劑有所不同，尤其是仿刺參在不良環(huán)境下或者受到在較大刺激時極易發(fā)生排臟或化皮等應(yīng)激反應(yīng)，因此對麻醉藥物的選擇有所局限。魚蝦類常用的麻醉劑如丁香酚、乙二醇苯醚等對仿刺參傷害較大，易出現(xiàn)吐腸、化皮及褪色等現(xiàn)象，麻醉效果不理想，不適宜作為仿刺參麻醉劑，而硫酸鎂麻醉效果較好，但適宜麻醉的體積分?jǐn)?shù)范圍較窄，為0.3～0.4 mol/L，且復(fù)蘇到正常狀態(tài)所需時間相對較長。有研究表明，薄荷醇作為一種麻醉劑，通過抑制仿刺參肌肉組織中神經(jīng)肽的功能而影響肌肉的緊張或放松，但這種抑制是可逆的［15］。當(dāng)薄荷醇作用于動物皮膚和表面黏膜時，在體積分?jǐn)?shù)4%以下時表現(xiàn)出清涼及刺激和局麻的作用，當(dāng)體積分?jǐn)?shù)高于6%時，會有灼燒感［16］，這與本實驗研究的仿刺參麻醉作用效果是基本一致的。通過對仿刺參表觀麻醉行為特征的觀察可以得出，薄荷醇體積分?jǐn)?shù)安全有效濃度范圍寬泛，在體積分?jǐn)?shù) 0.25%～4%時仿刺參幼參都能夠較快地達(dá)到麻醉狀態(tài)，且在短時間內(nèi)復(fù)蘇達(dá)到良好的自然狀況，正常攝食并保持較好的活力。

3.2體質(zhì)量、溫度對薄荷醇麻醉效果的影響

麻醉劑的麻醉效果與麻醉生物的種類、生理狀態(tài)、體質(zhì)量和水溫、溶氧等環(huán)境條件等因素密切相關(guān)，其中體質(zhì)量和水溫是影響麻醉效果的關(guān)鍵因素。

在魚類研究中，一般來說，體質(zhì)量對麻醉劑的安全濃度和有效濃度起著重要的作用，體質(zhì)量越大，所需的麻醉劑濃度越高［17］。本實驗發(fā)現(xiàn)在相同水溫條件下，經(jīng)相同時間進(jìn)入麻醉狀態(tài)的大規(guī)格幼參所需麻醉劑濃度要高于小規(guī)格幼參，與魚類研究結(jié)果類似。其原因可能是通常情況下同一種水產(chǎn)生物的體質(zhì)量越大，耗氧率越低［18］。因此，在相同條件下，幼參體質(zhì)量越大，呼吸代謝強(qiáng)度越低，單位時間內(nèi)攝入的麻醉液量少，達(dá)到麻醉和復(fù)蘇狀態(tài)所需的時間會相

應(yīng)的更長。水溫是影響麻醉劑麻醉效果的重要環(huán)境因素之一［19］，在麻醉濃度相同時，隨著水溫的升高，麻醉效果逐漸增強(qiáng)，麻醉所需時間逐漸縮短。有研究表明，在一定的水溫范圍內(nèi)，水溫越高，薄荷醇的麻醉效果越好［15］。本實驗水溫11～19呼吸頻率越快，單位時間內(nèi)攝入或排出體內(nèi)的麻醉藥液量越多，因此麻醉和復(fù)蘇時間均相應(yīng)縮短。當(dāng)水溫超過 19℃時個別幼參出現(xiàn)棘收縮的現(xiàn)象，尤其在水溫21℃時麻醉的仿刺參出現(xiàn)身體蜷縮、棘收縮、口周圍觸手完全不伸展、平均復(fù)蘇時間明顯延長等現(xiàn)象，用?低濃度薄荷醇麻醉幼參時麻醉狀態(tài)基本相同，這與魚類在高水溫下進(jìn)入麻醉狀態(tài)所需的麻醉濃度較低不同［3］。分析認(rèn)為，這可能與仿刺參自身的生理特性有關(guān)，因仿刺參具有體表、呼吸樹雙重呼吸特性［20］，溫度直接影響到呼吸代謝的強(qiáng)度，溫度越高影響較大。但當(dāng)水溫在 21℃以上時，麻醉時幼參的呼吸代謝可

能受到較強(qiáng)抑制，因此，在麻醉過程中表現(xiàn)出的狀態(tài)與其他溫度段有較大差異，麻醉效果不甚理想，不適宜對仿刺參進(jìn)行麻醉。

3.3麻醉對仿刺參體長的影響

在進(jìn)行仿刺參體長測量時，體長的變異系數(shù)反映出測量值的離散程度，變異系數(shù)越大，說明測量結(jié)果越分散，越不穩(wěn)定。本實驗研究可以看出，對照組體長變異系數(shù)較大，而麻醉組變異系數(shù)明顯減小，兩者差異顯著（P<0.05），說明薄荷醇的麻醉抑制了仿刺參身體的收縮和舒展，不僅使體長多次測量值趨于穩(wěn)定，而且也更能準(zhǔn)確地反映仿刺參的真實體長。仿刺參體長測量操作需時短，基于麻醉時間以及麻醉后復(fù)蘇時間過長或過短均不利于盡快完成相關(guān)操作的要求，故要選擇適宜的麻醉濃度完成測量操作，這對在短時間內(nèi)復(fù)蘇并恢復(fù)到正常狀態(tài)，確保對仿刺參不產(chǎn)生過度的應(yīng)激或造成傷害，顯得非常重要。針對本實驗中仿刺參的麻醉程度、麻醉時間和復(fù)蘇時間來綜合分析，可以看出，在薄荷醇體積分?jǐn)?shù)為0.25%時，大中規(guī)格的仿刺參麻醉時間較長而復(fù)蘇較快，未能達(dá)到有效的麻醉程度，會導(dǎo)致體長測量結(jié)果有誤差。由此可以得出，在進(jìn)行麻醉測量體長時，對體質(zhì)量20 g以上的幼參適宜的麻醉的體積分?jǐn)?shù)為0.5%～1%，對體質(zhì)量 20 g以下的幼參適宜的麻醉的體積分?jǐn)?shù)為 0.25%～0.5%，這樣可以顯著提高測量體長的準(zhǔn)確性，而20 g以下的糙海參適宜的薄荷醇體積分?jǐn)?shù)為2%［15］，這可能與海參種類及生活環(huán)境習(xí)性有關(guān)。當(dāng)然，仿刺參在麻醉和復(fù)蘇的過程中存在較大的個體差異，同時水溫、鹽度、溶氧等環(huán)境因素也有交互性影響，因此在進(jìn)行科學(xué)實驗及實際生產(chǎn)中，應(yīng)視實際情況對麻醉劑量進(jìn)行靈活調(diào)整。

綜上所述，說明薄荷醇對仿刺參幼參具有較好的麻醉效果，且無毒副作用，價格低廉，安全可靠。因此，薄荷醇可以作為仿刺參很好的麻醉劑應(yīng)用于科學(xué)實驗和實際生產(chǎn)中，尤其是應(yīng)用于對其體長的準(zhǔn)確測量方面。另外，根據(jù)麻醉用途的不同，今后有待于深入探討以薄荷醇作為麻醉劑在生產(chǎn)中其他方面的應(yīng)用研究開發(fā)，如通過對稚幼參麻醉剝離進(jìn)行高效分苗或清除敵害生物等。

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.These results suggest that，within the temperature range from 11℃

to 21℃，the effective anesthetic concentration of menthol is approximately 0.5% to 1% for individuals with body weight greater than 20 g and approximately 0.25% to 0.5% for individuals less than 20 g in body weight.

（本文編輯： 梁德海）

Anesthetic effect of menthol on juvenile sea cucumber Apostichopus japonicus

HAN Sha，HU Wei，LI Cheng-lin，ZHAO Bin，YAN Fang
（Marine Biology Institute of Shandong Province，Qingdao 266104，China）

Received: Aug.2，2015

Key words:Apostichopus japonicus； menthol； anesthetization； water temperature

Abstract:The aim of this study was to establish an anesthetic method for accurate body length measurement.We investigated the anesthetic effect of menthol on different-sized（large，42.37 g±1.99 g； medium，22.91 g±1.03 g；small，12.09 g±1.51 g）Apostichopus japonicus juvenile sea cucumbers in different concentrations and at different water temperatures（11，13，15，17，19，21℃）.The results showed that the anesthetic effect of menthol took effect quickly and the recovery rate reached 100% at concentrations less than 4%.The anesthetic time and recovery time were significantly different for large individuals at concentrations of 0.25%，0.5%，and 1%，but they were not significantly different for medium-sized and small ones.Within the temperature range from 11℃ to 19℃，the anesthetic time for sea cucumbers was shortened from 15.62 min±1.31 min to 12.17 min±0.21 min，while the recovery time increased from 13.61 min±4.85 min to 28.10 min±7.35 min.The anesthetic effect was significantly different at different temperatures（P<0.05）.It was unfit for anesthetization because the status of the sea cucumber was abnormal when the temperature was higher than 21℃

中圖分類號：S917.4

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1000-3096（2016）03-0010-07

doi：10.11759/hykx20150826001

收稿日期：2015-08-02； 修回日期： 2015-10-17

基金項目：山東省農(nóng)業(yè)良種工程項目（2014-2016）； 山東省科技發(fā)展計劃項目（2014GNC111022）； 國家海洋局海洋公益性行業(yè)科研專項經(jīng)費項目（201305001-4）； 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系刺參產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊建設(shè)項目（SDAIT-08-011-01）； 山東省農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目

作者簡介：韓莎（1985-），女，山東青島人，助理研究員，主要從事海洋生物生理生態(tài)學(xué)研究，E-mail： shahan_2012@163.com； 李成林，通信作者，研究員，電話： 0532-82657692，E-mail： lcl_xh@hotmail.com