黃亮，　吳瑕，　蔣輝英

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調(diào)查研究

腹瀉患兒腺病毒感染臨床特征及流行病學(xué)分析

黃亮，吳瑕，蔣輝英

518055 廣東 深圳，深圳市南山區(qū)西麗人民醫(yī)院兒科

【摘要】目的探討腹瀉患兒腺病毒感染的臨床特征及流行病學(xué)特點。方法收集2013年1月至2014年12月深圳市南山區(qū)5歲以下腹瀉兒童糞便標(biāo)本，采取聚合酶鏈反應(yīng)檢測腺病毒，對陽性標(biāo)本進行序列分析及基因型分型，同時分析腺病毒感染與年齡、季節(jié)等關(guān)系。結(jié)果600份標(biāo)本中共計檢出腺病毒感染20例，陽性率3.33%；腺病毒陽性標(biāo)本中，腸道腺病毒14例，全部為腸道腺病毒41型，占比70.0%；非腸道腺病毒檢出6例，占比30.0%；腸道腺病毒患兒病程為(11.24±3.53)d，明顯長于非腸道腺病毒(6.67±2.41)d，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，兩組嘔吐次數(shù)、發(fā)熱比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；腺病毒感染性腹瀉呈現(xiàn)全年發(fā)病情況，其中5月份與10月份呈現(xiàn)出兩個高峰期，5月份高峰期(4～6月份)檢出最多，占比65.0%(13/20)；腺病毒感染性腹瀉各個年齡段均有分布，其中>6～12月齡患兒最為多見，占比65.0%(13/20)。結(jié)論腸道腺病毒41型是引起深圳市南山區(qū)小兒腹瀉的重要病原，加強監(jiān)測對及時診治，改善患兒預(yù)后具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】腹瀉；腺病毒；臨床特征；流行病學(xué)

腹瀉是世界范圍內(nèi)最為常見的嬰幼兒疾病之一，也是導(dǎo)致兒童死亡的重要病因，發(fā)展中國家尤甚。據(jù)報道，全球5歲以下兒童發(fā)生腹瀉的病例數(shù)在30～50億例次左右，死亡患兒將近有2百萬[1]。在小兒急性腹瀉中，病毒是重要病因，而腺病毒則是常見病原體之一[2-4]。國外有報道顯示，有9%～11%的兒童腹瀉是因腸道腺病毒引發(fā)的，甚至造成腹瀉暴發(fā)[5]。近年來，深圳市因腸道腺病毒感染導(dǎo)致的腹瀉狀況十分普遍，但缺少對于腸道腺病毒感染的臨床特征及流行病學(xué)調(diào)查，對此，本研究選取2013年1月至2014年12月深圳市南山區(qū)5歲以下腹瀉兒童作為研究對象，對其糞便標(biāo)本進行腺病毒檢測，以探討該地區(qū)腹瀉患兒腺病毒感染的臨床特征及流行病學(xué)特點，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料2013年1月至2014年12月深圳市南山區(qū)西麗人民醫(yī)院收治5歲以下疑似診斷病毒性腹瀉患兒600例，其中男387例，女213例；年齡為出生后1 h至5歲，平均(2.83±1.03)歲。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《兒科學(xué)》中病毒性腹瀉的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。

1.3納入標(biāo)準(zhǔn)(1)發(fā)病時間>24 h；(2)年齡<5歲；(3)排便次數(shù)每日>3次，且大便性狀有明顯改變，如稀水樣、蛋花湯樣、稀糊樣；(4)便常規(guī)鏡檢白細(xì)胞計數(shù)<15個/HP，未見紅細(xì)胞腹瀉病例。

1.4排除標(biāo)準(zhǔn)(1)慢性腹瀉，病程>2個月或間歇期2～4周的復(fù)發(fā)性腹瀉；(2)大便量<3 mL；(3)膿血便；(4)就診前應(yīng)用過抗生素或抗病毒藥物。

1.5方法

1.5.1收集標(biāo)本收集患兒糞便后，立即將標(biāo)本置于-80 ℃冰箱內(nèi)保存。

1.5.2DNA提取與檢測將標(biāo)本凍融3次后渦旋，離心，取上清液200 μL，采取德國Qiagen公司DNA提取試劑盒提取腺病毒DNA，具體操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.5.3PCR腺病毒基因組擴增引物采取針對腺病毒Hexon基因的擴增引物HAdV-F/HAdVR，具體引物序列為HAdV-F:5′-TTC CCC ATG GCI CAY AAC AC-3′；HAdV-R:5′-CCT GGT AKC CRA TRT TGT A-3′，PCR產(chǎn)物長度為482 bp。PCR反應(yīng)條件：94 ℃ 3 min，94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 1 min，共進行35個循環(huán)，72 ℃延伸7 min。

1.5.4序列分析及基因型分型對所得PCR陽性擴增產(chǎn)物進行克隆，送生物技術(shù)公司測序，將所測得的序列和美國生物技術(shù)中心GenBank已知序列做BLAST對比分析，以明確病毒基因型。

2結(jié)果

2.1腺病毒檢測結(jié)果600份標(biāo)本中，共計檢出腺病毒感染20例，陽性率3.33%。腺病毒陽性標(biāo)本中，腸道腺病毒檢出14例，全部為Ad41型，占比70.00%。非腸道腺病毒檢出6例，占比30.00%，其中Ad1型2例，31型2例，Ad1與Ad5型混合感染1例，Ad3與Ad7型混合感染1例。

2.2腸道腺病毒與非腸道腺病毒患兒臨床癥狀、體征及病程比較見表1。

表1　腸道腺病毒與非腸道腺病毒患兒臨床癥狀、

注：與腸道腺病毒患兒比較，at=2.87，P<0.05。

表1結(jié)果表明，腸道腺病毒患兒病程明顯長于非腸道腺病毒患兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；兩組嘔吐次數(shù)、發(fā)熱比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.3腺病毒感染性腹瀉發(fā)病季節(jié)分布見表2。

表2　腺病毒感染性腹瀉發(fā)病季節(jié)分布(n)

表2結(jié)果表明，腺病毒感染性腹瀉呈現(xiàn)全年發(fā)病情況，其中5月份與10月份呈現(xiàn)出兩個高峰期，5月份高峰期(4～6月份)檢出率最高，占比65.0%(13/20)。

2.4腺病毒感染性腹瀉發(fā)病年齡分布見表3。

表3　腺病毒感染性腹瀉發(fā)病年齡分布(n)

表3可見，腺病毒感染性腹瀉各個年齡段均有分布，其中>6～12月齡患兒最為多見，占比65.0%(13/20)。

3討論

本研究通過對深圳市南山區(qū)2013年1月至2014年12月收集的600例5歲以下兒童糞便標(biāo)本采取腺病毒檢測發(fā)現(xiàn)陽性病例數(shù)20例，兒童腺病毒感染性腹瀉發(fā)生率為3.33%，與國內(nèi)相關(guān)研究有一定出入[7]。賈娜爾等[8]的研究中，對烏魯木齊地區(qū)腹瀉患兒進行病毒檢測發(fā)現(xiàn)，腺病毒感染性腹瀉發(fā)生率為2.3%。兒童腺病毒感染性腹瀉以腸道腺病毒感染最為多見，本研究中，腸道腺病毒感染率為70.0%，且均為Ad41型，與國內(nèi)外大多數(shù)研究一致[9]。有文獻解釋，之所以Ad41成為流行菌株，可能揭示了Ad41出現(xiàn)抗原漂移，而抗原性變化可能使得Ad41成功逃脫獲得性免疫，最終使得個體對Ad41易感性增加。兒童腺病毒感染性腹瀉臨床主要表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、發(fā)熱等，本研究中腸道腺病毒患兒病程明顯長于非腸道腺病毒。

兒童腺病毒感染性腹瀉全年均可發(fā)病，其中以春夏、秋冬交替時節(jié)多見，其中5月份與10月份呈現(xiàn)出兩個高峰期，又以5月份高峰期最為多見，4～6月份發(fā)病人數(shù)占到總陽性病例數(shù)的65.0%。與高文娟等[10]研究基本一致。但也有不少研究顯示，兒童腺病毒感染性腹瀉并無季節(jié)流行性，故關(guān)于腺病毒感染性腹瀉是否存在明顯季節(jié)流行性仍有待大樣本研究，以為臨床防治提供依據(jù)[11-12]。通過觀察腺病毒感染性腹瀉患兒的發(fā)病年齡分布情況可見，本病的主要發(fā)病人群集中在>6～12月齡，占到總陽性病例數(shù)的65.0%。該結(jié)果與胡婷婷等[4]研究有出入，與朱銘[13]研究有相似之處，其研究中腸道腺病毒感染多見于7～12月齡兒童。

兒童腺病毒感染性腹瀉如不及時給予治療可導(dǎo)致嚴(yán)重后果，故一旦發(fā)現(xiàn)患兒有腹瀉、嘔吐、發(fā)熱等癥狀，需引起重視，并及時給予明確診斷及有效治療。當(dāng)診出是腺病毒感染性腹瀉后，臨床常先給予抗病毒治療，再口服思密達藥物，飲食方面注意低乳糖飲食原則，通常在治療5～7 d即可顯著好轉(zhuǎn)或痊愈。

綜上所述，深圳市南山區(qū)近年來腹瀉患兒腺病毒感染以Ad41型流行為主，5月份與10月份可能是高峰期，>6～12月齡為高發(fā)年齡段，故應(yīng)加強對該年齡段患兒的監(jiān)護工作，以降低腺病毒感染性腹瀉的發(fā)生率。

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(本文編輯：劉穎)

Clinical features and epidemiological analysis of adenovirus infection in children with diarrhea

HUANGLiang，WUXia，JIANGHuiying.

DepartmentofPediatrics，XiliPeople′sHospitalofNanshanDistrict,Shenzhen518055，China.

【Abstract】ObjectiveTo probe into the clinical features and epidemiological characteristics of adenovirus infection in children with diarrhea.MethodsThe stool samples of children under 5 years of age from January 2013 to December 2014 in Nanshan District,Shenzhen，were collected,and the positive specimen were sequentially analyzed and genotype was typed through the detection of adenovirus by polymerase chain reaction,and at the same time,the relationship between adenovirus infection and age,season and so on were analyzed.ResultsTotally 600 specimens were detected in 20 cases of adenovirus infection,the positive rate being 3.33%.In the adenovirus positive samples,there were 14 cases of intestinal adenovirus,and all were Ad41 type,accounting for 70%.Non-intestinal adenovirus was detected in 6 cases,accounting for 30%.The course of disease of enteric adenovirus was (11.24±3.53)d,which was significantly longer than that of non-enteric adenovirus[(6.67±2.41)d],and the difference was statistically significant(P<0.05).In addition,there was no significant difference between the two groups concerning frequency of vomiting and fever(P>0.05).The adenovirus infectious diarrhea in the whole year,which peaked in October and May,and the peak in May(April to June) was the most,accounting for 65%(13/20).The adenovirus infectious diarrhea could occur in all ages,with >6～12 years of age being the most common,accounting for 65%(13/20).ConclusionIntestinal adenovirus type 41 is an important pathogen causing diarrhea in children in Nanshan District of Shenzhen,and to strengthen the monitoring is of great significance to the timely diagnosis and treatment,which improves the prognosis of children.

【Keywords】Diarrhea;Adenovirus;Clinical features;Epidemiology

基金項目：2015年深圳市南山區(qū)衛(wèi)生科技計劃項目(醫(yī)療衛(wèi)生類)資助(2015059)

作者簡介：黃亮(1973-)，男，主治醫(yī)師。研究方向：小兒呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)疾病的診治 通訊作者：黃亮，E-mail：hbs8888888@126.com

doi：10.3969/j.issn.1674-3865.2016.03.035

【中圖分類號】R725.7

【文獻標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-3865(2016)03-0348-03

(收稿日期：2015-10-15)