李艷華，胡佳，張永峰

（1.銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院，貴州　銅仁　554300；2.松桃中坪藍(lán)菌泥鰍繁育養(yǎng)殖基地，貴州　銅仁　554199）

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大鱗副泥鰍繁殖力及人工繁殖技術(shù)

李艷華1，胡佳1，張永峰2

（1.銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院，貴州銅仁554300；2.松桃中坪藍(lán)菌泥鰍繁育養(yǎng)殖基地，貴州銅仁554199）

資助項(xiàng)目：銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院博士科研啟動(dòng)資金（tzky［2015］ZK02）

大鱗副泥鰍（Paramisgurus dabryanus）為鯉形目，鰍科，副泥鰍屬，主要分布在我國(guó)長(zhǎng)江中下游及其附屬水體中。大鱗副泥鰍是泥鰍屬中個(gè)體大、生長(zhǎng)快的品種，其肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，有相當(dāng)高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值［1］。大鱗副泥鰍的水分、灰分、脂肪、蛋白質(zhì)的含量分別為78.80%、1.13%、2.57%、17.40%，17種氨基酸總量為13.78%，其中9種必需氨基酸總量分別為6.29%，其蛋白質(zhì)含量與必需氨基酸總量比普通經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)普遍要高［2］。近年來(lái)，由于水質(zhì)污染和人為濫捕，大鱗副泥鰍天然產(chǎn)量日趨下降，國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)供不應(yīng)求，國(guó)際、國(guó)內(nèi)市場(chǎng)潛力很大。

為在貴州省乃至全國(guó)推廣大鱗副泥鰍這一優(yōu)良品種，解決養(yǎng)殖過(guò)程中存在的許多技術(shù)問(wèn)題，筆者圍繞大鱗副泥鰍進(jìn)行了系統(tǒng)的觀察、試驗(yàn)、研究，現(xiàn)將其繁殖力及人工繁殖技術(shù)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1材料魚(yú)收集與處理

試驗(yàn)用大鱗副泥鰍來(lái)自貴州省銅仁市松桃縣中坪藍(lán)菌泥鰍繁育養(yǎng)殖基地，用地籠在種鰍池?fù)迫》N鰍后，選取10～65 g各個(gè)階段體質(zhì)量雌鰍數(shù)尾至數(shù)十尾不等，置于濃度為80 mg/L的MS-222清水溶液中麻醉，然后用直尺測(cè)量全長(zhǎng)，用精度0.1 mg的電子分析天平稱(chēng)量體質(zhì)量，解剖泥鰍取走腹中所有卵粒，稱(chēng)取帶內(nèi)臟和消化道的殼重。

1.2繁殖力測(cè)定

挑取大鱗副泥鰍的卵巢約0.2～0.3 g，在電子分析天平中稱(chēng)重，在玻璃上用解剖針計(jì)數(shù)取樣卵粒數(shù)。絕對(duì)懷卵量可以通過(guò)以下公示計(jì)算：絕對(duì)懷卵量=（體質(zhì)量-帶內(nèi)臟和消化道的殼重）×取樣卵數(shù)/取樣卵重

1.3人工催產(chǎn)與繁殖

1.3.1親鰍的選擇選擇2～3齡、體表無(wú)傷的成熟大鱗副泥鰍。雌鰍要求體長(zhǎng)l5 cm以上，體質(zhì)量20 g以上，腹部膨大柔軟，有光澤，富有彈性，顏色微紅，有透明感；雄鰍要求體長(zhǎng)10 cm以上，體質(zhì)量12 g以上，胸鰭上布有追星，尾柄上方有一條肉質(zhì)突起，肉質(zhì)突起越明顯，顏色越鮮艷表明雄鰍發(fā)育越好。

1.3.2催產(chǎn)時(shí)間與批次共催產(chǎn)2批：第一批在5 月19日，催產(chǎn)20組，催產(chǎn)水溫21～24℃；第二批在5月22日，催產(chǎn)20組，水溫19～21℃。

1.3.3催產(chǎn)用具容量為1 mL的醫(yī)用注射器及4號(hào)針頭數(shù)支、催產(chǎn)劑、毛巾、鵝毛與口徑1 mm吸管數(shù)支、林格氏液2 L，人工授精的白色瓷碗2個(gè)。

1.3.4人工催產(chǎn)先按DOM 5 mg/kg+LHRH-A25 μg/kg濃度以雌魚(yú)每尾0.2 mL、雄魚(yú)每尾0.1 mL稱(chēng)量好所需的催產(chǎn)劑，按催產(chǎn)尾數(shù)的110%配好所需體積的催產(chǎn)劑溶液。催產(chǎn)劑用生理鹽水配制成注射液，注射方法為背部肌肉注射，30 g左右的雌鰍注射量為0.2 mL，20 g左右的雄鰍注射0.1 mL，其他體質(zhì)量偏差較大泥鰍根據(jù)體質(zhì)量適當(dāng)增減0.05～0.1 mL，進(jìn)針深度應(yīng)控制在0.2～0.3 cm。為控制進(jìn)針深度，可以在針頭基部套上一截細(xì)的橡皮管或者去頭塑料帽。

1.3.5授精與孵化第一批催產(chǎn)泥鰍采取自然產(chǎn)卵受精，將注射后親本按雌雄比1.5∶1配組，放入產(chǎn)卵網(wǎng)箱中，在箱內(nèi)放一個(gè)白色磁盤(pán)便于觀察自然產(chǎn)卵進(jìn)程，待所有親魚(yú)都產(chǎn)完卵后，撈走所有親鰍，收集受精卵，平鋪于經(jīng)過(guò)曝曬消毒的棕片上進(jìn)行魚(yú)巢附卵孵化。

第二批催產(chǎn)泥鰍采取人工授精，先擠精液，用吸管吸取，然后將吸管內(nèi)的精液按每尾5 mL稀釋于林格氏液中（精液保存液），連續(xù)吸取5尾雄鰍的精液。林格氏液配方為：NaCl 6.5 g/L，KCl 0.14 g/L，CaCl 0.12 g/L，NaHCO30.2 g/L，NaH2PO40.01 g/L。然后連續(xù)擠5尾雌魚(yú)的卵子于白色瓷碗內(nèi)，用吸管滴入林格氏液稀釋的精液進(jìn)行干法授精。人工授精時(shí)不斷用鵝毛輕輕攪拌，使精液與卵子充分混勻而受精。人工授精2 min后，將受精卵附在棕片上進(jìn)行孵化，在水泥池中保持微流水充氣孵化，溶氧量要求在5 mg/L以上。

1.3.6數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)處理采用EXCEL和SPSS13.0軟件，采用t檢驗(yàn)檢驗(yàn)差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　試驗(yàn)結(jié)果

2.1繁殖力研究

對(duì)46尾大鱗副泥鰍雌鰍進(jìn)行了解剖，據(jù)測(cè)定，最小成熟雌鰍的全長(zhǎng)僅14 cm，懷卵1 837粒；最大的全長(zhǎng)21.78 cm、體質(zhì)量63 g，懷卵量為22 135粒（見(jiàn)表1）。雌鰍懷卵量一般是隨著體長(zhǎng)、體質(zhì)量的增加而增多，體質(zhì)量與絕對(duì)懷卵量之間有如下關(guān)系式（見(jiàn)圖1）。

表1　大鱗副泥鰍雌鰍絕對(duì)繁殖力

圖1　雌鰍絕對(duì)懷卵量隨體質(zhì)量變化

2.2親鰍的雌雄判別

親鰍選擇如果僅按照腹部大小、顏色及生殖孔情況判斷，準(zhǔn)確率大概為70%；如果不經(jīng)麻醉，要通過(guò)胸鰭形狀判斷鰍的性別也極不方便。經(jīng)驗(yàn)表明，通過(guò)尾柄上方有無(wú)肉質(zhì)突起來(lái)判別鰍的雌雄和發(fā)育情況，準(zhǔn)確率能達(dá)100%。

2.3人工繁殖與孵化

試驗(yàn)表明：DOM 5 mg/kg+LHRH-A25 μg/kg濃度以雌魚(yú)每尾0.2 mL、雄魚(yú)每尾0.1 mL注射是適合大鱗副泥鰍的人工催產(chǎn)的。第一批和第二批催產(chǎn)率分別達(dá)95%和90%，平均受精率分別達(dá)到98%和 96%，但二者的平均孵化率差異很大，自然產(chǎn)卵受精和人工授精二者的平均孵化率分別為83%和12%，各組受精率與孵化率見(jiàn)表2。

3　小結(jié)

關(guān)于大鱗副泥鰍的繁殖力已有報(bào)道，但相近體質(zhì)量的絕對(duì)懷卵量報(bào)道相差卻極為顯著。朱盛林等［3］報(bào)道體質(zhì)量33～44 g的大鱗副泥鰍平均絕對(duì)懷卵量達(dá)2.5萬(wàn)粒，而儲(chǔ)張杰等［4］報(bào)道體質(zhì)量45.39 g的大鱗副泥鰍絕對(duì)懷卵量才15 392粒。筆者的研究與儲(chǔ)張杰相近，平均體質(zhì)量43.65 g的大鱗副泥鰍平均絕對(duì)懷卵量為14 804粒，其他體質(zhì)量段的大鱗副泥鰍的絕對(duì)懷卵量與儲(chǔ)張杰等的報(bào)道也接近。一般魚(yú)類(lèi)的懷卵量跟魚(yú)類(lèi)的品種和營(yíng)養(yǎng)密切相關(guān)［5-6］，三位研究者研究的是同一品種的泥鰍，但絕對(duì)懷卵量卻不一樣，可能跟大鱗副泥鰍所處生存環(huán)境的餌料豐歉有關(guān)，朱盛林等的大鱗副泥鰍取自安徽安慶石塘湖，那里餌料相對(duì)豐盛，泥鰍的懷卵量相對(duì)較大，而儲(chǔ)張杰等的大鱗副泥鰍取自浙江舟山一帶稻田和溝渠，餌料相對(duì)不足，所以懷卵量可能相對(duì)較小。該試驗(yàn)研究的大鱗副泥鰍是水泥池人工養(yǎng)殖的，懷卵量卻與儲(chǔ)張杰等研究的野生大鱗副泥鰍相近，可能是因?yàn)槿拥哪圉q投喂的是草魚(yú)飼料而不是專(zhuān)門(mén)的泥鰍配合飼料導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)不全面，以及投飼量不足有關(guān)。無(wú)論如何，通過(guò)研究結(jié)果結(jié)合其他學(xué)者的研究結(jié)果，生產(chǎn)應(yīng)用上，可以通過(guò)催產(chǎn)的雌鰍重量確定總的懷卵量。

表2　大鱗副泥鰍授精方式與孵化情況

已發(fā)表的文獻(xiàn)［3］認(rèn)為雌雄親鰍選擇分離應(yīng)該通過(guò)一看二摸來(lái)確定，即看腹部是否膨大而柔軟，是否有透明感，顏色是否微紅，生殖孔是否開(kāi)放；手摸腹部是否富有彈性，雄鰍胸鰭上是否布有追星，輕壓雄魚(yú)腹部能否擠出精液。但是，根據(jù)生產(chǎn)實(shí)踐，筆者認(rèn)為親鰍選擇分離最為關(guān)鍵的指標(biāo)是看尾柄上方是否有肉質(zhì)突起，有肉質(zhì)突起則為雄鰍，且突起越明顯，顏色越鮮艷，雄鰍發(fā)育越好。無(wú)論雌鰍或雄鰍在選擇中第二個(gè)指標(biāo)則是觀察是否健壯、完好無(wú)傷，雌鰍腹部膨脹是否明顯，雄鰍個(gè)子是否健壯、勻稱(chēng)；母鰍盡量選擇20 g以上個(gè)體，雄鰍盡量選擇12 g以上個(gè)體。

關(guān)于泥鰍的人工繁殖有些是利用人工催產(chǎn)自然授精［7-8］，有些則是人工催產(chǎn)人工授精［9-10］，但都取得了不錯(cuò)的受精率與孵化率。而筆者對(duì)大鱗副泥鰍的試驗(yàn)表明，自然授精組83%的孵化率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于人工授精組12%的孵化率，受精率則無(wú)明顯差別，造成這種差異的原因基本可以排除是人工授精組授精的時(shí)間把握不夠準(zhǔn)確或者是人工擠出的精液量太少，其原因有待進(jìn)一步試驗(yàn)。一般泥鰍繁殖進(jìn)行人工授精時(shí)，普遍做法是殺雄鰍取精巢剪碎研磨用林格氏液洗出精液［3］，而該試驗(yàn)的做法是直接擠精液，這一做法節(jié)省了雄性親鰍，但卻造成了大鱗副泥鰍人工授精的孵化率低下，原因如何暫時(shí)無(wú)法確定，因?yàn)橥瑯拥淖龇ㄔ谂_(tái)灣泥鰍上卻取得了成功。關(guān)于大鱗副泥鰍人工催產(chǎn)與人工授精導(dǎo)致的孵化率低下是否因?yàn)槿斯な诰苯踊蜷g接引起需要進(jìn)一步試驗(yàn)證明。

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doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.05.008

收稿日期：（2016-01-26）