張雪晴，張琴，程園園，莢榮

安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，安徽 合肥 230601

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銅礦重金屬污染對(duì)土壤微生物群落多樣性和酶活力的影響

張雪晴，張琴，程園園*，莢榮*

安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，安徽 合肥 230601

摘要：重金屬污染導(dǎo)致土壤環(huán)境質(zhì)量的惡化，而土壤微生物的群落多樣性和土壤酶活力是評(píng)估污染程度的重要指標(biāo)。該研究選擇了安徽銅陵銅礦附近受重金屬?gòu)?fù)合污染的4個(gè)土壤樣本，評(píng)估和比較了樣本中5種重金屬（砷、鎘、鋅、鉛和銅）的污染程度；研究和分析了土壤細(xì)菌和真菌群落的多樣性以及土壤酶活力。結(jié)果表明，（1）從樣本S1到S4，綜合污染指數(shù)分別為0.71、3.85、4.37和8.47；S1樣本尚未受到重金屬污染，而S2、S3和S4樣本受到不同程度重金屬砷、鎘、鋅和銅的污染；以鎘污染為主，不存在鉛污染。（2）從樣本S1到S4，隨著綜合污染程度的增加，土壤中脲酶、磷酸酶和脫氫酶的酶活力均呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)，且磷酸酶和脫氫酶的酶活力與鎘、鋅和鉛的濃度呈顯著負(fù)相關(guān)，而脲酶酶活力與重金屬濃度沒(méi)有明顯的相關(guān)性。（3）隨著綜合污染指數(shù)的上升，細(xì)菌和真菌群落的多樣性均下降，且真菌群落物種豐富度的變化明顯于細(xì)菌。該研究對(duì)礦區(qū)土壤重金屬生物治理及環(huán)境修復(fù)具有重要意義。

關(guān)鍵詞：銅礦；土壤；重金屬；微生物群落多樣性；土壤酶活力

引用格式：張雪晴， 張琴， 程園園， 莢榮. 銅礦重金屬污染對(duì)土壤微生物群落多樣性和酶活力的影響［J］. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)， 2016，25（3）: 517-522.

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隨著工業(yè)的發(fā)展，某些地區(qū)土壤中重金屬含量上升，致使土壤生態(tài)環(huán)境惡化，對(duì)土壤生物的多樣性產(chǎn)生重大的影響（Khan et al.，2008；Pan et al.，2011；Gilbert et al.，2012）。礦山的開(kāi)采可導(dǎo)致土壤被重金屬污染，直接或間接影響人體的健康。已有報(bào)道表明，采礦區(qū)或其附近土壤受到金屬砷（As）、鎘（Cd）、鋅（Zn）、鉛（Pb）和銅（Cu）等不同程度的污染（Jung，2008；胡淼等，2014），因此，研究礦區(qū)土壤中重金屬污染狀況對(duì)保護(hù)生態(tài)環(huán)境和人類(lèi)健康具有顯著意義。

相對(duì)于植物，土壤微生物對(duì)土壤環(huán)境變化的響應(yīng)更為靈敏，并且在維護(hù)生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性方面發(fā)揮著重要作用。此外，通過(guò)與植物的相互作用，微生物還會(huì)影響重金屬離子的遷移（Belimov et al.，2009）。由于土壤中微生物種類(lèi)多樣，數(shù)量龐大，以及代謝活動(dòng)旺盛，土壤中微生物被認(rèn)為是衡量土壤質(zhì)量的靈敏的、重要的指標(biāo)（Khan et al.，2010；Zhang et al.，2015）。

土壤中的酶主要來(lái)自土壤微生物，土壤微生物的活性直接影響土壤的酶活力（Burns et al.，2013）。土壤中的酶在生物地球化學(xué)循環(huán)、土壤的結(jié)構(gòu)維持和污染物解毒的代謝和反應(yīng)過(guò)程中起著重要的催化作用，并為微生物和植物的生長(zhǎng)提供某些化合物（Zhang et al.，2015）。因此，土壤酶活力常被用作評(píng)估土壤質(zhì)量的指標(biāo)，同時(shí)也可以反映土壤中的微生物群落狀態(tài)（Chung et al.，2015）。在眾多和重金屬污染相關(guān)的土壤酶中，脲酶、磷酸酶和脫氫酶最具代表性（Jyot et al.，2015；Tejada et al.，2008）。

實(shí)驗(yàn)室條件下分析短期重金屬污染對(duì)微生物多樣性和土壤酶活力的影響已有較多研究，但長(zhǎng)期暴露于重金屬的土壤污染相關(guān)研究較少。銅陵是我國(guó)有名的銅礦基地，礦產(chǎn)資源豐富，但在礦產(chǎn)資源大量開(kāi)發(fā)的同時(shí)，也給當(dāng)?shù)丨h(huán)境帶來(lái)了影響，尤其是重金屬污染已成為破壞農(nóng)田土壤環(huán)境的重要因素（樊霆等，2013）。因此，本研究選擇了安徽銅陵銅礦的土壤樣本，通過(guò)土壤微生物的群落多樣性以及土壤酶活力的分析，反映其重金屬污染程度，為土壤污染的質(zhì)量評(píng)價(jià)、生物治理及環(huán)境修復(fù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 采樣與分析

銅陵市位于安徽省中部，礦產(chǎn)資源豐富。獅子山是銅陵最具代表性的銅金多金屬礦山，也是銅陵最大的礦床，位于銅陵市東邊。該礦山從1958年開(kāi)始基建，到2002年開(kāi)采完畢（胡新付等，2011）。因?yàn)榈V山的開(kāi)采，該地區(qū)土壤環(huán)境受到了很大影響，重金屬污染程度不盡相同，其中鎘的污染較為嚴(yán)重（楊西飛，2007）。

采用GPS定位，在獅子山附近較大的耕地進(jìn)行采樣，每隔1 km設(shè)置1個(gè)采樣點(diǎn)，利用內(nèi)徑5 cm 的PVC管，采用5點(diǎn)混合法采集表層土壤（0～20 cm）樣本，每個(gè)樣本分成2份，分裝于封口袋中，一份放入冰盒作為新鮮樣，另一份作為風(fēng)干樣。新鮮樣品用于微生物的測(cè)量，風(fēng)干樣品用于重金屬和理化性質(zhì)的測(cè)量（國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局，2005）。

1.2 重金屬和pH的測(cè)定

風(fēng)干的樣品用HNO3和H2O2消解后，用原子吸收分光光度法測(cè)定As、Cu、Zn、Pb和Cd的含量。稱(chēng)取20 g土壤，加入50 mL去離子水，振蕩搖勻，靜置2～3 h，用pH計(jì)測(cè)上清液pH。

1.3 土壤重金屬污染評(píng)價(jià)方法

土壤重金屬污染評(píng)價(jià)方法用單因子指數(shù)法（Pi）和尼梅羅綜合污染指數(shù)法（Pc）（Brady et al.，2014；Islam et al.，2015）。

1.3.1 單因子指數(shù)法

單因子指數(shù)計(jì)算公式為：

式中，Pi是土壤中金屬i的環(huán)境質(zhì)量指數(shù)；Ci是金屬i的實(shí)際測(cè)量值（mg·kg-1）；Si是土壤中金屬i的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)值（mg·kg-1）（GB 15618─1995）。

1.3.2 尼梅羅綜合污染指數(shù)法

尼梅羅綜合污染指數(shù)計(jì)算公式為：

式中，（Ci/Si）max是土壤污染指數(shù)的最大值；（Ci/Si）ave是土壤污染指數(shù)的平均值。

1.4 酶活力測(cè)定

根據(jù)已報(bào)道的方法測(cè)定脲酶、磷酸酶和脫氫酶的活力（Jyot et al.，2015）。脲酶、磷酸酶和脫氫酶的活力分別用1 kg土壤在1 h內(nèi)生成的NH3-N的質(zhì)量、1 kg土壤在1 h內(nèi)生成的p-硝基苯酚（p-NP）的質(zhì)量、1 kg土壤在1 d內(nèi)生成的三苯基四氮唑氯化物（TPF）的質(zhì)量表示。

1.5 DNA提取和PCR

取0.2 g凍干的土樣，用土壤DNA提取試劑盒（上海生工）抽提土壤樣品的DNA。引物GC-Fung （5'-GC-clamp-CATTCCCCGTTACCCGTTG-3'）和NS1（5'-GTAGTCATATGCTTGTCTC-3'）擴(kuò)增真菌18S rDNA，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為550 bp（May et al.，2001）。引物357F-GC（5'-GC-clamp-CCTACGGGAGGCAGCAG-3'）和518R（5'-ATTACCGCGGCTGCTGG-3'）擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA 的V3可變區(qū)，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為250 bp（Yu et al.，2004）。用凝膠電泳檢驗(yàn)PCR產(chǎn)物后用于DGGE分析。

1.6 DGGE分析

取10 μL 18S rDNA PCR的產(chǎn)物進(jìn)行DGGE分析。采用變性梯度為20%～40%、濃度為6%的聚丙烯酰胺凝膠，在1×TAE緩沖液中150 V和60 ℃條件下電泳8 h。取10 μL 16S rDNA PCR的產(chǎn)物進(jìn)行DGGE分析。采用變性梯度為35%～55%、濃度為8%的聚丙烯酰胺凝膠（化學(xué)變性劑為100%尿素7 mol·L-1和40%（V/V）的丙烯酰胺），在1×TAE緩沖液中150 V和60 ℃條件下電泳5 h。電泳完畢后，采用銀染法染色，并且利用Bio-Rad公司的Gel-Doc2000凝膠成像系統(tǒng)拍照。

根據(jù)電泳條帶的豐度和密度計(jì)算戴斯系數(shù)，得到相似矩陣，并構(gòu)建聚類(lèi)圖，分析樣品間微生物種群的相似性（Nicol et al.，2003）。根據(jù)電泳圖譜中樣品條帶數(shù)目及每個(gè)條帶的強(qiáng)度（灰度），對(duì)各樣品中微生物多樣性指數(shù)（H′）、均勻度（E）和豐富度（S）等指標(biāo)進(jìn)行分析（秦燕燕等，2009）。具體算法如下：

其中，pi為樣品中單一條帶的強(qiáng)度在該樣品所有條帶總強(qiáng)度中所占的比率，N為DGGE圖譜單一泳道上所有條帶的豐度，Ni為第i條帶的豐度；S是某樣品中所有條帶數(shù)目總和。

1.7 平板計(jì)數(shù)法

用平板計(jì)數(shù)法對(duì)土壤中異養(yǎng)細(xì)菌、放線菌、絲狀真菌和酵母的活細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)。分別配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、高氏一號(hào)培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基和麥芽汁培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌、放線菌、霉菌和酵母菌（姚萬(wàn)春等，2011；鄧曉，2012）?？膳囵B(yǎng)的細(xì)胞數(shù)用菌落形成單位（CFU）表示。

1.8 數(shù)據(jù)分析

用Origin 8.0計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，用t-檢驗(yàn)比較平均值，顯著水平為P<0.05。用SPSS作皮爾森相關(guān)性分析。DGGE圖譜采用Quantity one軟件對(duì)每個(gè)樣品的電泳條帶數(shù)目、條帶密度進(jìn)行數(shù)字化分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 土壤性質(zhì)

4個(gè)土壤樣品中As、Cd、Zn、Pb和Cu的含量如表1所示。4個(gè)土壤樣品中各金屬的單因素指數(shù)和綜合污染指數(shù)的計(jì)算結(jié)果如表2所示。單因素指數(shù)法的土壤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)如下：Pi≤1表示清潔；Pi>1表示污染。Pi值越大，表示污染越嚴(yán)重。土樣1（S1）中5種金屬的Pi值都小于1，說(shuō)明S1中5種金屬的含量均在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，未受污染。其它3個(gè)樣品中，Pb的單因子指數(shù)均在正常范圍內(nèi)，說(shuō)明不存在Pb污染。土樣2（S2）中As、Cd和Cu含量超標(biāo)，土樣3（S3）和土樣4（S4）中As、Cd、Zn和Cu都超標(biāo)。綜合污染指數(shù)法的土壤分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)如下：0.73表示嚴(yán)重污染（HJ/T 167 ─2004）。土樣1的綜合污染指數(shù)是4個(gè)土壤樣品中最小的，為0.71。從2個(gè)指數(shù)結(jié)果來(lái)看，后續(xù)分析將土壤樣品1作為無(wú)污染的對(duì)照。S2、S3和S4的綜合污染指數(shù)均在3以上，說(shuō)明土壤被嚴(yán)重污染。

表1 4個(gè)土壤樣品的理化性質(zhì)和金屬含量Table 1 Physicochemical properties and heavy metal content of four soil samples

表2 4個(gè)土壤樣品的環(huán)境質(zhì)量指數(shù)Table 2 Environmental quality index of heavy metals in 4 soil samples

2.2 土壤酶活力

土壤酶活力反應(yīng)了微生物和植物對(duì)環(huán)境的響應(yīng)，土壤中化肥、金屬離子和化學(xué)污染物均會(huì)影響土壤中酶的活力。同時(shí)，土壤中的酶對(duì)土壤生態(tài)環(huán)境、物理化學(xué)性質(zhì)、土壤肥力和健康也有一定的影響。本研究分析了土壤中脫氫酶、磷酸酶和脲酶的活力，這三者是常用的衡量土壤健康的指標(biāo)（Jyot et al.，2015）。脲酶水解尿素，會(huì)導(dǎo)致土壤中的N流失（Upadhyay，2012）。磷酸酶在磷酸鹽循環(huán)中有重要作用，它調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和植物生長(zhǎng)（Nannipieri et al.，2011）。因此，脲酶和磷酸酶主要影響土壤的肥力。脫氫酶主要存在于細(xì)胞，氧化土壤有機(jī)質(zhì)。因?yàn)槊摎涿竻⑴c呼吸作用，所以它的活力是土壤微生物活性和土壤健康的重要指標(biāo)。

3種酶的活力測(cè)定結(jié)果如表3所示。S4的3種酶的活力均最低，而且S4的綜合污染指數(shù)也最高。用皮爾森相關(guān)系數(shù)進(jìn)一步分析重金屬濃度和酶活力間的相互關(guān)系，結(jié)果如表4所示，磷酸酶和脫氫酶的活力與Cd、Zn和Pb的濃度呈極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，與Cu的濃度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。由此表明，脫氫酶和磷酸酶可以作為土壤Cd、Zn和Pb污染指示劑。脲酶活力僅僅與As濃度表現(xiàn)出較弱的負(fù)相關(guān)關(guān)系，與其它金屬濃度沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的相關(guān)性。

表3 土壤樣品中的酶活力Table 3 Enzyme activities of soil samples

表4 土壤酶活力和重金屬濃度的皮爾森相關(guān)性分析Table 4 Pearson correlation coefficient of enzyme activity and heavy metal concentrations

2.3 微生物多樣性

DGGE可以快速地對(duì)多個(gè)樣本的微生物群落多樣性進(jìn)行分析。圖1a是4個(gè)土樣細(xì)菌16S rDNA的V3可變區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物的DGGE電泳圖，圖1b是量化的電泳圖，圖1c是聚類(lèi)分析后得到的系統(tǒng)樹(shù)圖。圖1c顯示了4個(gè)土壤樣本中細(xì)菌群落的相似性，可見(jiàn)S1的細(xì)菌群落與其它3個(gè)樣本差異最大，S2 和S3的細(xì)菌群落相似度最高，該結(jié)果與用綜合污染指數(shù)的評(píng)估結(jié)果相一致。S1的Pc值最小，S4的Pc值最大。這一結(jié)果表明，重金屬的綜合污染程度對(duì)細(xì)菌群落多樣性產(chǎn)生明顯影響。

表5顯示了各樣本中細(xì)菌的群落多樣性。S1的豐富度為25，香農(nóng)指數(shù)（Shannon-Wiener）為3.2086。S4的香農(nóng)指數(shù)、豐富度（Richness）和均勻度（Evenness）都是最低的，尤其是豐富度，僅為21，說(shuō)明重金屬污染程度的加大，引起細(xì)菌物種數(shù)量的下降，導(dǎo)致細(xì)菌群落多樣性降低。

圖1 細(xì)菌16s rDNA的PCR產(chǎn)物DGGE電泳圖（a）和量化圖（b）；樣品間細(xì)菌的聚類(lèi)圖（c）Fig. 1 DGGE profiles of bacterial 16S rDNA （a） and quantitative figure（b）； clustering figure of bacteria in samples （c）

表5 各樣本的細(xì)菌多樣性分析Table 5 Bacterial diversity analysis of samples

4個(gè)土壤樣本中真菌18S rDNA擴(kuò)增產(chǎn)物的DGGE電泳圖見(jiàn)圖2a，圖2b為量化的電泳圖，圖2c為聚類(lèi)分析后得到的系統(tǒng)樹(shù)圖。從系統(tǒng)樹(shù)圖2c可看出，S2和S3中的真菌群落相似度最高，為69%，S1中真菌群落與其他3個(gè)樣本的真菌群落差異較大。這一結(jié)果表明，真菌群落受到了重金屬的明顯影響。

圖2 真菌18s rDNA的PCR產(chǎn)物DGGE電泳圖（a）和量化圖（b）；樣品間真菌的聚類(lèi)圖（c）Fig. 2 DGGE profiles of fungal 18S rDNA （a） and quantitative figure（b）；clustering figure of fungal in samples （c）

表6 各樣品的真菌多樣性分析Table 6 Fungal diversity analysis of samples

表6顯示了各樣本中真菌的群落多樣性。數(shù)據(jù)顯示，從S1到S4，隨著土壤重金屬的綜合污染指數(shù)逐漸增大，香農(nóng)指數(shù)和豐富度均逐漸下降，表明真菌群落的多樣性下降。與細(xì)菌相比，從S1到S4，均勻度有些改變，可能是隨著土壤重金屬的綜合污染指數(shù)增大，造成某些真菌種類(lèi)的失去而另外一些耐受重金屬的真菌種類(lèi)富集，4個(gè)樣本物種個(gè)體數(shù)目分配的均勻程度發(fā)生了變化。數(shù)據(jù)顯示，從S1到S4，真菌群落的物種豐富度分別為30、28、25 和24，而細(xì)菌群落的物種豐富度分別為25、25、25和21。說(shuō)明真菌群落的多樣性指數(shù)減小主要是由于其物種豐富度的變化而引起的，且真菌群落物種豐富度的變化明顯于細(xì)菌。施曉東等（2003）綜述了重金屬污染土壤的微生物響應(yīng)，表明低濃度的重金屬有促進(jìn)微生物數(shù)量的作用，高濃度則有抑制作用；微生物對(duì)高濃度重金屬的敏感性，通常是放線菌>細(xì)菌>真菌。張曉宇等（2010）研究了重金屬Cd污染對(duì)旱田土壤微生物群落的影響，結(jié)果顯示，微生物對(duì)Cd的敏感程度為細(xì)菌>放線菌>真菌。謝學(xué)輝等（2012）以德興銅礦尾礦重金屬污染土壤為研究對(duì)象，表明不同重金屬濃度對(duì)微生物多樣性的影響不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系；重金屬污染可能改變?cè)形⑸锶郝鋬?nèi)種群間的關(guān)系，新的耐受菌種產(chǎn)生，而原優(yōu)勢(shì)種群失去優(yōu)勢(shì)作用。

表7 土壤樣品中原核和真核微生物的數(shù)量Table 7 Numbers of prokaryotic and eukaryotic microorganisms in soil samples. Values are mean of three replicates ± SD 108cfu·g-1

微生物主要分為細(xì)菌、放線菌、霉菌和酵母菌四大類(lèi)。用平板培養(yǎng)法對(duì)土壤中四大類(lèi)可培養(yǎng)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，進(jìn)一步分析土壤中微生物的豐富度。表7顯示，土壤中的細(xì)菌、放線菌、霉菌和酵母菌的數(shù)量都達(dá)到了1×107～1×108CFU·g-1。其中，細(xì)菌數(shù)量最大，真菌數(shù)量略少于細(xì)菌。S4樣本的可培養(yǎng)微生物總數(shù)最小，這與用綜合污染指數(shù)法評(píng)估土壤污染程度的結(jié)果相符合。從S1到S4，可培養(yǎng)細(xì)菌的數(shù)量隨土壤重金屬污染程度的增加逐漸下降，而可培養(yǎng)的放線菌、霉菌和酵母菌的數(shù)量變化沒(méi)有規(guī)律性。另外，這3類(lèi)微生物數(shù)量在樣本之間的變化，也并未與其多樣性指數(shù)的結(jié)果一致。分析其原因，一方面，微生物的分離培養(yǎng)方法有技術(shù)上的局限性，且土壤中存在多數(shù)不可培養(yǎng)微生物，因此，這種傳統(tǒng)的方法不能準(zhǔn)確反映微生物多樣性的實(shí)際存在狀態(tài)；另一方面，礦區(qū)土壤是一個(gè)復(fù)雜的環(huán)境，含有復(fù)合重金屬，且包含多種結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，如腐殖酸、腐殖酸樣物、酚類(lèi)化合物等（Fortin et al.，2004），土壤微生物在受重金屬影響的同時(shí)，也受其它因素的影響。正如謝學(xué)輝等（2012）的研究結(jié)果，對(duì)于長(zhǎng)期重金屬污染的野外實(shí)地樣品，不同重金屬濃度影響微生物多樣性可能不是實(shí)驗(yàn)室研究的簡(jiǎn)單線性關(guān)系。但是，土壤微生物群落多樣性能夠表征土壤生態(tài)系統(tǒng)群落結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性，是最有潛力的敏感性生物指標(biāo)之一（孫波等，1997）。

3 結(jié)論

本文分析了銅陵銅礦土壤樣本中的微生物群落多樣性和土壤酶活力。結(jié)果顯示，從樣本S1到S4，土壤重金屬綜合污染程度加大，細(xì)菌和真菌群落的多樣性均下降，且真菌豐富度的變化明顯于細(xì)菌，土壤酶活力也隨之減低。磷酸酶和脫氫酶的活力隨著Cd、Zn和Pb濃度的升高而明顯下降，因此，磷酸酶和脫氫酶可以作為預(yù)測(cè)土壤重金屬Cd、Zn 和Pb污染的有效指標(biāo)之一。由此可見(jiàn)，利用微生物群落多樣性表征礦區(qū)重金屬污染土壤的環(huán)境質(zhì)量具有一定的可行性，但仍有待進(jìn)一步深入研究。

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The Impact of Heavy Metal Contamination on Soil Microbial Diversity and Enzyme Activities in A Copper Mine

ZHANG Xueqing， ZHANG Qin， CHENG Yuanyuan*， JIA Rong*
School of Life Sciences， Anhui University， Hefei 230601， China

Abstract:Contamination of heavy metals results in deterioration of soil health， which can be assessed by the diversity of microbial community and the activity of soil enzymes. In this study， four soil samples were collected from a copper mine in Tongling City of China， and were further analyzed for evaluating the contamination of five metals （arsenic， cadmium， zinc， lead and copper）， the diversity of bacteria and fungi as well as the activity of soil enzymes. Our results indicated that: （1） the comprehensive pollution index was 0.71， 3.85， 4.37 and 8.47 for sample 1 to 4 （S1～S4）， respectively， indicating that S1 was uncontaminated while S2， S3 and S4 were contaminated to different extent； cadmium was the main metal while no lead was detected in four samples； （2） the activity of urease， phosphatase and dehydrogenase decreased with the increase of the comprehensive pollution index of four samples； the activity of phosphatase and dehydrogenase was negatively correlated to the concentration of cadmium， zinc and lead， while the urease activity showed no significant correlation with these metals； （3） the diversity of bacteria and fungi decreased with the increase of the comprehensive pollution index， and the change of fungi abundance was more obvious than that of bacteria. This study will contribute to the bioremediation of heavy metal contamination in mining areas.

Key words:copper mine； soil； heavy metals； microbial diversity； soil enzymes activity

DOI:10.16258/j.cnki.1674-5906.2016.03.022

中圖分類(lèi)號(hào)：X172

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1674-5906（2016）03-0517-06

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31571286）；國(guó)家環(huán)保公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)項(xiàng)目（201009041）；安徽省高等學(xué)校自然科學(xué)研究項(xiàng)目（KJ2015A010）

作者簡(jiǎn)介：張雪晴（1990年生），女，碩士研究生，研究方向?yàn)閼?yīng)用與環(huán)境微生物學(xué)。E-mail: ahuzxq@yeah.net

*通信作者：莢榮，女，教授，研究方向?yàn)閼?yīng)用與環(huán)境微生物學(xué)。E-mail: ahujiarong@163.com。程園園，女，副教授，研究方向?yàn)閼?yīng)用與環(huán)境微生物學(xué)。E-mail: chengyy@ahu.edu.cn

收稿日期：2016-01-06