齊　博　武書(shū)庚　王　晶　齊廣海　張海軍*閻桂玲　王　旭　董　延

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，生物飼料開(kāi)發(fā)國(guó)家工程研究中心，北京100081；2.贏創(chuàng)德固賽(中國(guó))投資有限公司，北京100026)

枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)和菌群數(shù)量的影響

齊博1武書(shū)庚1王晶1齊廣海1張海軍1*閻桂玲2王旭2董延2

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，生物飼料開(kāi)發(fā)國(guó)家工程研究中心，北京100081；2.贏創(chuàng)德固賽(中國(guó))投資有限公司，北京100026)

摘要：本試驗(yàn)旨在研究枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、屠宰性能、腸道形態(tài)和菌群數(shù)量的影響。試驗(yàn)選取健康、體重相近的1日齡愛(ài)拔益加(AA)肉仔雞公雛320只，隨機(jī)分為4個(gè)組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加500 mg/kg枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis,BS組)、20 mg/kg硫酸黏桿菌素(colistin sulfate，CS組)和500 mg/kg枯草芽孢桿菌+10 mg/kg硫酸黏桿菌素(BS+CS組)。試驗(yàn)期6周。結(jié)果表明：1)與對(duì)照組相比，BS組、CS組能顯著提高42日齡肉仔雞體重(P<0.05)，提高后期(22～42日齡)平均日增重，顯著降低后期和全期(1～42日齡)料重比(P<0.05)；BS+CS組未對(duì)各試驗(yàn)階段肉仔雞的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。2)各試驗(yàn)組肉仔雞的屠宰性能未見(jiàn)顯著變化(P>0.05)。3)與對(duì)照組相比，BS組可顯著提高肉仔雞十二指腸絨毛高度和十二指腸絨毛高度/隱窩深度(P<0.05)。4)與對(duì)照組相比，BS組、CS組、BS+CS組均能顯著提高肉仔雞42日齡時(shí)盲腸乳酸桿菌數(shù)量(P<0.05)，BS組和BS+CS組可顯著提高42日齡時(shí)盲腸中乳酸菌/大腸桿菌(P<0.05)?？梢?jiàn)，枯草芽孢桿菌可改善肉仔雞腸道形態(tài)，增加腸道中乳酸桿菌數(shù)量，促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)。綜合考慮以上因素，枯草芽孢桿菌效果優(yōu)于硫酸黏桿菌素，但聯(lián)合使用效果不佳。

關(guān)鍵詞：枯草芽孢桿菌；硫酸黏桿菌素；生長(zhǎng)性能；腸道形態(tài)；微生物區(qū)系

抗生素在現(xiàn)代畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展中扮演了極其重要的角色，為畜禽生長(zhǎng)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)效益，同時(shí)也具有較大的風(fēng)險(xiǎn)。隨著抗生素的長(zhǎng)期使用，菌株的耐藥性也隨之增強(qiáng)，對(duì)畜禽健康和生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的影響[1]。目前，許多國(guó)家已經(jīng)規(guī)定在動(dòng)物飼糧中禁止抗生素促生長(zhǎng)劑的使用。因此，尋找抗生素替代物對(duì)維持畜禽健康生長(zhǎng)和生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定具有重要的意義。

枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)是一種綠色、無(wú)污染的好氧性益生菌，具有耐壓、抗酸堿等性能，通過(guò)胃酸后進(jìn)入腸道，在腸道內(nèi)能夠以孢子形式迅速萌芽繁殖，能消耗掉腸道內(nèi)大量的氧，抑制腸道有害菌并促進(jìn)有益菌的增殖，改善飼料效率和腸道黏膜結(jié)構(gòu)，對(duì)防治疾病產(chǎn)生、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)具有積極作用。已有研究表明，肉仔雞飼糧中添加芽孢桿菌替代抗生素使用，可以達(dá)到促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，提高飼料效率的效果[2]。

新型飼料添加劑的研制是近年來(lái)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究的熱點(diǎn)之一。已有研究表明，肉仔雞飼糧中添加0.1%枯草芽孢桿菌能提高肉仔雞平均日增重(ADG)，降低料重比(F/G)，促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)發(fā)育[3]；0.3%枯草芽孢桿菌能減少肉雞腸道內(nèi)大腸桿菌的數(shù)量，提高雙歧桿菌的數(shù)量，保持腸道微生物區(qū)系平衡，維持機(jī)體健康[4]；500 mg/kg的枯草芽孢桿菌能提高黃羽肉雞十二指腸和空腸絨毛高度，降低隱窩深度，促進(jìn)小腸消化吸收功能[5]。由于飼料中抗生素的限用和禁用是我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展的大趨勢(shì)，而芽孢桿菌作為益生菌的獨(dú)特功效已被廣泛關(guān)注，但目前有關(guān)芽孢桿菌替代抗生素及聯(lián)合使用的研究還不充分。因此，本試驗(yàn)旨在研究枯草芽孢桿菌替代抗生素以及聯(lián)合使用對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、腸道形態(tài)、菌群數(shù)量的影響，為后期芽孢桿菌在肉仔雞中的研究和應(yīng)用提供理論依據(jù)和參考。

1材料和方法

1.1試驗(yàn)材料

枯草芽孢桿菌制劑：枯草芽孢桿菌(DSM 17299)活菌數(shù)為1.6×109CFU/g，微生物飼料添加劑，由贏創(chuàng)德固賽(中國(guó))投資有限公司提供。

硫酸黏桿菌素預(yù)混劑：有效成分含量10%，購(gòu)自江西天佳動(dòng)物藥業(yè)有限公司。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取健康、體重相近的1日齡愛(ài)拔益加(AA)肉仔雞公雛320只，隨機(jī)分為4個(gè)組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加500 mg/kg枯草芽孢桿菌(BS組)、20 mg/kg硫酸黏桿菌素(CS組)和500 mg/kg枯草，芽孢桿菌+10 mg/kg硫酸黏桿菌素(BS+CS組)。采用4層立體網(wǎng)上養(yǎng)殖，試驗(yàn)期6周。

1.3試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)設(shè)計(jì)，基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1994)和《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)，結(jié)合《AA肉仔雞飼養(yǎng)手冊(cè)》配制?；A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items含量Content1～21日齡1to21daysofage22～42日齡22to42daysofage賴氨酸Lys1.10(1.14)1.00(1.06)蛋氨酸Met0.49(0.51)0.39(0.43)蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys0.81(0.85)0.70(0.76)

1)維生素預(yù)混料為每千克飼糧提供Vitamin premix provided the following per kg of diets：VA 12 500 IU，VD32 500 IU，VK32.65 mg，VB12 mg，VB26 mg，VB120.025 mg，VE 30 IU。

2)礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼糧提供Mineral premix provided the following per kg of diets：Cu 8 mg，Zn 75 mg，F(xiàn)e 80 mg，Mn 100 mg，Se 0.15 mg，I 0.35 mg，生物素 biotin 0.032 5 mg，葉酸 folic acid 1.25 mg，泛酸 pantothenic acid 12 mg，煙酸 nicotinic acid 50 mg。

3)營(yíng)養(yǎng)水平括號(hào)內(nèi)為實(shí)測(cè)值，其余為計(jì)算值。Nutrition levels in the parentheses were measured values, while the others were calculated values.

1.4飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)過(guò)程中，嚴(yán)格按照飼養(yǎng)管理規(guī)程操作，常規(guī)操作程序免疫接種，保持試驗(yàn)場(chǎng)地和雞舍清潔衛(wèi)生，正常消毒；試驗(yàn)雞舍通風(fēng)良好，飼料不受潮、不結(jié)塊、無(wú)霉變，不添加任何其他的抗生素和促生長(zhǎng)劑；飲水水質(zhì)良好、無(wú)污染；試驗(yàn)用雛雞健壯。自由采食、飲水。每天08:30、14:30分別記錄雞舍溫度和濕度，定時(shí)清掃衛(wèi)生。

1.5測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1生長(zhǎng)性能

分別于21和42日齡，以重復(fù)為單位，空腹稱重雞只，計(jì)算平均體重、平均日增重；試驗(yàn)期間以重復(fù)為單位，記錄耗料量，計(jì)算試驗(yàn)前期、后期、全期的平均日采食量(ADFI)、料重比；每天記錄死亡雞只數(shù)，計(jì)算死亡率。

1.5.2屠宰性能

于42日齡，每重復(fù)隨機(jī)選取1只體重接近該重復(fù)平均值的肉仔雞，頸靜脈放血屠宰，分離得胸肌、腿肌和腹脂并稱重，按照全國(guó)家禽育種委員會(huì)的“家禽生長(zhǎng)性能計(jì)算方法”計(jì)算屠宰率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.5.3腸道形態(tài)

于42日齡，每重復(fù)隨機(jī)選取1只體重接近該重復(fù)平均值的肉仔雞，進(jìn)行屠宰，剝離出十二指腸和空腸，各自截取中段約3 cm的腸道組織，用冰冷的生理鹽水緩緩沖洗干凈，浸入pH為7.4的福爾馬林溶液，4 ℃冰箱保存，以備制作石蠟切片。將保存的腸道樣本制作成石蠟切片，具體操作參照李慧[6]的方法，采用甲苯胺藍(lán)法染色。在光學(xué)顯微鏡下觀察，每個(gè)切片隨機(jī)抽取5個(gè)非連續(xù)性視野，每個(gè)視野統(tǒng)計(jì)3組數(shù)據(jù)，絨毛長(zhǎng)度是指絨毛頂端到絨毛基部的長(zhǎng)度，隱窩深度是指腸腺底部到兩絨毛之間基部開(kāi)口處的距離。

1.5.4菌群數(shù)量

1.5.4.1腸道內(nèi)容物的采集和稀釋

21和42日齡時(shí)，分別從每個(gè)試驗(yàn)組中隨機(jī)選取8只雞，肌肉注射戊巴比妥酸鈉麻醉后迅速解剖，截取盲腸末端2 cm腸段，液氮保存。將樣品從液氮中取出，在無(wú)菌操作室內(nèi)用稀釋液進(jìn)行10-4～10-6倍稀釋，小型振蕩器充分混勻。

1.5.4.2滴種

用微型移液槍用微型移液器吸取10 mL經(jīng)稀釋后的樣品，滴入培養(yǎng)基(大腸桿菌：伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基；乳酸桿菌：乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基)的相應(yīng)梯度，每個(gè)樣品3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)選擇3個(gè)稀釋度(大腸桿菌選10-3、10-4、10-5；乳酸桿菌選10-4、10-5、10-6)。滴種后的平皿用滅菌曲玻棒小心推勻。

1.5.4.3培養(yǎng)

大腸桿菌在37 ℃人工氣候箱中有氧培養(yǎng)24 h；乳酸桿菌在37 ℃人工氣候箱中厭氧培養(yǎng)48 h。

1.5.4.4菌落計(jì)數(shù)

將培養(yǎng)后的平皿選擇合適的濃度梯度(以長(zhǎng)10～20個(gè)菌落為宜)，根據(jù)菌落可數(shù)性原則，即1個(gè)細(xì)菌產(chǎn)生1個(gè)菌落，對(duì)2種微生物進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)。

1.6試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 16.0軟件的單因素方差分析(one-way ANOVA)先進(jìn)行方差分析，再進(jìn)行F檢驗(yàn)和Duncan氏多重比較，P<0.05為差異顯著。

2結(jié)果

2.1枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

表2所示為枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響。由表2可知，與對(duì)照組相比，BS組、CS組、BS+CS組均未對(duì)前期(1～21日齡)肉仔雞的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)；與對(duì)照組相比，BS組、CS組、BS+CS組提高了肉仔雞42日齡時(shí)的體重，其中BS組、CS組與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)，分別提高了3.55%、4.30%；BS組、CS組、BS+CS組提高了后期(22～42日齡)肉仔雞的平均日增重，其中CS組與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)，提高了7.25%；BS組、CS組顯著降低了后期和全期(1～42日齡)肉仔雞的料重比(P<0.05)，但BS+CS組對(duì)后期和全期肉仔雞的料重比無(wú)顯著影響(P>0.05)；BS組降低了前期、后期和全期肉仔雞的平均日采食量，但差異不顯著(P>0.05)。

表2　枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫(xiě)字母者表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，BS組、CS組能顯著提高42日齡肉仔雞體重(P<0.05)，提高后期肉仔雞平均日增重，顯著降低后期和全期肉仔雞料重比(P<0.05)；BS+CS組對(duì)各試驗(yàn)階段肉仔雞的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響(P>0.05)；BS組、CS組、BS+CS組對(duì)各試驗(yàn)階段肉仔雞的死亡率未見(jiàn)顯著影響(P>0.05)。

研究提示，枯草芽孢桿菌或硫酸黏桿菌素能促進(jìn)肉仔雞后期生長(zhǎng)發(fā)育，但兩者之間沒(méi)有協(xié)同作用。

2.2枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

表3所示為枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響。由表3可知，與對(duì)照組相比，BS組、CS組、BS+CS組均未對(duì)肉仔雞的屠宰率、胸肌率、腿肌率、腹脂率產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。

表3　枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

2.3枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞腸道形態(tài)的影響

表4所示為枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞腸道形態(tài)的影響，圖1為十二指腸切片圖譜。由表4可知，十二指腸形態(tài)方面，與對(duì)照組相比，BS組肉仔雞十二指腸絨毛高度提高了40.98%(P<0.05)；BS+CS組十二指腸隱窩深度有增加的趨勢(shì)(P=0.094)，BS組和CS組對(duì)十二指腸隱窩深度未見(jiàn)顯著影響(P>0.05)；BS組十二指腸絨毛高度/隱窩深度提高了36.97%(P<0.05)。空腸形態(tài)方面，與對(duì)照組相比，BS組有提高空腸絨毛高度的趨勢(shì)(P=0.051)，CS組和BS+CS組未見(jiàn)對(duì)空腸隱窩深度、絨毛高度、絨毛高度/隱窩深度產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。

研究提示，枯草芽孢桿菌可提高42日齡肉仔雞十二指腸和空腸絨毛高度，能改善腸道形態(tài)，增強(qiáng)腸道的消化吸收功能，與硫酸黏桿菌素聯(lián)合使用時(shí)沒(méi)有協(xié)同作用。

表4　枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞腸道形態(tài)的影響

圖1　十二指腸切片圖譜

2.4枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞盲腸菌群數(shù)量的影響

表5所示為枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞盲腸菌群數(shù)量的影響。由表5可知，21日齡時(shí)，與對(duì)照組相比，CS組肉仔雞盲腸中乳酸桿菌數(shù)量提高了5.76%(P=0.085)，BS組盲腸中乳酸桿菌/大腸桿菌提高了10.58%(P=0.091)；42日齡時(shí)，與對(duì)照組相比，BS組、CS組、BS+CS組均能顯著提高肉仔雞盲腸中乳酸桿菌的數(shù)量(P<0.05)，未見(jiàn)大腸桿菌數(shù)量有顯著變化(P>0.05)；BS組、BS+CS組可顯著提高盲腸中乳酸桿菌/大腸桿菌(P<0.05)，分別提高了9.45%和8.66%。

結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌可提高肉仔雞42日齡時(shí)盲腸中乳酸桿菌數(shù)量和乳酸桿菌/大腸桿菌(P<0.05)，硫酸黏桿菌素、枯草芽孢桿菌與硫酸黏桿菌素聯(lián)合使用均可提高肉仔雞42日齡時(shí)盲腸乳酸桿菌數(shù)量(P<0.05)，而枯草芽孢桿菌與硫酸黏桿菌素聯(lián)合使用尚可提高乳酸菌/大腸桿菌(P<0.05)。

研究提示，枯草芽孢桿菌或硫酸黏桿菌素都可提高腸道中乳酸桿菌數(shù)，促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)。

表5　枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞盲腸菌群數(shù)量的影響

3討論

3.1枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

國(guó)內(nèi)外許多報(bào)道表明，枯草芽孢桿菌能提高肉仔雞的體增重和飼料轉(zhuǎn)化率，提高生長(zhǎng)性能。有研究發(fā)現(xiàn)，0.1%枯草芽孢桿菌可提高肉仔雞1～6周齡平均日增重，降低料重比[3]。肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌，能提高1～3周齡平均日增重，降低料重比[7]。本試驗(yàn)研究表明，肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌能提高肉仔雞42日齡體重，降低后期和全期料重比，這與Molnár等[8]研究結(jié)果相似。這可能與消化道、腸道發(fā)育成熟需要一定的時(shí)間有關(guān)?？莶菅挎邨U菌能促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)發(fā)育，改善飼料效率，可能是因?yàn)榭莶菅挎邨U菌進(jìn)入消化道后能產(chǎn)生多種消化酶，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收[9]。

3.2枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞屠宰性能的研究較少。屠宰性能是反應(yīng)肉仔雞胴體品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。研究表明，飼糧中添加500 mg/kg的枯草芽孢桿菌能顯著提高肉仔雞35日齡的屠宰率，對(duì)屠宰性能其他指標(biāo)沒(méi)有顯著影響[10]；1%的枯草芽孢桿菌能提高絲羽烏骨雞的胸肌質(zhì)量[11]；但本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌未對(duì)肉仔雞屠宰性能產(chǎn)生影響，這與Molnár等[8]研究結(jié)果相一致。可見(jiàn)，關(guān)于枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響尚無(wú)定論，有待進(jìn)一步研究。

3.3枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞腸道形態(tài)的影響

絨毛高度和隱窩深度分別是反映小腸消化吸收功能和細(xì)胞發(fā)育成熟率的主要指標(biāo)，當(dāng)絨毛高度增加時(shí)，與腸道中食糜的接觸面積也會(huì)相應(yīng)的增加，則會(huì)增強(qiáng)小腸的消化吸收功能；機(jī)體消化道發(fā)育成熟時(shí)，隱窩上皮細(xì)胞作用就會(huì)減弱，隱窩深度變淺[12-13]；絨毛高度與隱窩深度比值升高，表明小腸消化吸收功能增強(qiáng)，腸黏膜結(jié)構(gòu)改善。有研究表明，500 mg/kg枯草芽孢桿菌能顯著提高42日齡肉仔雞十二指腸絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度，降低隱窩深度[14]；枯草芽孢桿菌與寡糖和酶制劑合用可提高黃羽肉雞十二指腸和空腸絨毛高度，提高了絨毛高度/隱窩深度[5]；本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌能提高肉仔雞十二指腸絨毛高度/隱窩深度，提高十二指腸絨毛高度，這與仵天培等[5]研究結(jié)果相一致。本試驗(yàn)表明，枯草芽孢桿菌可增強(qiáng)小腸的消化吸收功能，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。

3.4枯草芽孢桿菌對(duì)肉仔雞盲腸菌群數(shù)量的影響

動(dòng)物腸道內(nèi)主要依靠有益菌(乳酸桿菌、雙歧桿菌等)維持微生物區(qū)系平衡，在飼養(yǎng)管理中不可避免的會(huì)引起腸道中有害菌群(大腸桿菌、沙門(mén)桿菌等)的繁殖，有害菌繁殖過(guò)度，則會(huì)破壞微生物區(qū)系平衡，給機(jī)體帶來(lái)腸道疾病，嚴(yán)重時(shí)可致死亡?？莶菅挎邨U菌是需氧型細(xì)菌，進(jìn)入消化道后能迅速消耗氧氣，促進(jìn)乳酸桿菌等厭氧性有益菌的繁殖，抑制大腸桿菌等需氧性有害菌的增殖[15]。此外，枯草芽孢桿菌能產(chǎn)生具有生物活性的抗菌物質(zhì)(脂肽類、肽類等)，對(duì)病原菌具有抑制作用[16]。研究表明，枯草芽孢桿菌能顯著降低肉仔雞腸道中大腸桿菌數(shù)，提高乳酸的含量；0.1%的枯草芽孢桿菌能顯著提高1～6周齡肉仔雞腸道乳酸菌含量，降低大腸桿菌含量[3]；本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，枯草芽孢桿菌能提高肉仔雞42日齡時(shí)盲腸乳酸桿菌數(shù)量和乳酸桿菌/大腸桿菌，這與孫瑞鋒等[17]研究結(jié)果相似，可能與枯草芽孢桿菌在腸道內(nèi)發(fā)揮作用具有時(shí)間效應(yīng)有關(guān)。

3.5枯草芽孢桿菌與硫酸黏桿菌素聯(lián)合使用效果

在養(yǎng)殖業(yè)中，益生菌與抗生素的配伍兼容性一直是人們關(guān)注的話題。本試驗(yàn)表明，枯草芽孢桿菌和硫酸黏桿菌素之間對(duì)于肉仔雞的促生長(zhǎng)方面無(wú)協(xié)同作用。原因可能有：1)硫酸黏桿菌素與枯草芽孢桿菌相互影響；硫酸黏桿菌素可能降低枯草芽孢桿菌在腸道的存活率，此外枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的多種代謝產(chǎn)物可能會(huì)對(duì)硫酸黏桿菌素的抑菌譜、抑菌強(qiáng)度、抑菌作用時(shí)間產(chǎn)生影響；2)枯草芽孢桿菌和硫酸黏桿菌素聯(lián)合使用可能會(huì)對(duì)某些腸道菌產(chǎn)生影響；硫酸黏桿菌素是由多個(gè)氨基酸連接而成的黏桿菌素，能夠與病原菌細(xì)胞游離的磷酸結(jié)合，增大細(xì)胞膜的通透性，從而具有殺菌作用，促進(jìn)生長(zhǎng)[18]，枯草芽孢桿菌在腸道中能產(chǎn)生磷脂類和氨基酸類[15]，當(dāng)兩者聯(lián)合使用時(shí)，可能會(huì)對(duì)腸道內(nèi)有益菌產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。由于兩者合用會(huì)導(dǎo)致各自代謝的變化和腸道菌群的差異，從而對(duì)生長(zhǎng)性能造成影響。

4結(jié)論

① 枯草芽孢桿菌和硫酸黏桿菌素均能促進(jìn)肉仔雞后期生長(zhǎng)發(fā)育，改善飼料效率，綜合考慮對(duì)腸道形態(tài)和盲腸菌群的影響，枯草芽孢桿菌效果優(yōu)于硫酸黏桿菌素，但聯(lián)合使用效果不佳。

② 枯草芽孢桿菌能提高肉仔雞十二指腸和空腸絨毛高度，提高小腸消化吸收能力。

③ 枯草芽孢桿菌可增加肉仔雞盲腸中乳酸桿菌數(shù)量，維持微生物區(qū)系平衡，促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)。

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(責(zé)任編輯李慧英)

Effects ofBacillussubtilison Growth Performance, Intestinal Morphology and Bacterial Enumeration of Broilers

QI Bo1WU Shugeng1WANG Jing1QI Guanghai1ZHANG Haijun1*YAN Guiling2WANG Xu2DONG Yan2

(1. Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Laboratory of Feed Biotechnology of Ministry of Agriculture, National Engineering Research Center of Biological Feed, Beijing 100081,China; 2. Evonik Degussa (China) Co., Ltd., Beijing 100026, China)

Abstract:This study was conducted to investigate the effects of Bacillus subtilis on growth performance, slaughter performance, intestinal morphology and bacterial enumeration of broilers. A total of 320 one-day-old healthy male Arbor Acres broilers with similar weight were randomly allotted into 4 groups with 8 replicates per group and 10 broilers per replicate. Chickens in control group were fed a basal diet, and those in experimental groups were fed basal diets supplemented with 500 mg/kg Bacillus subtilis (BS group), 20 mg/kg colistin sulfate (CS group), and 500 mg/kg Bacillus subtilis +10 mg/kg colistin sulfate (BS+CS group), respectively. The test lasted for 6 weeks. The results showed as follows: 1) compared with control group, average body weight of broilers in BS and CS groups was significantly increased at 42 days of age (P<0.05), average daily gain of broilers in BS and CS groups was increased during 22 to 42 days of age, and the ratio of feed to gain of broilers in BS and CS groups was significantly decreased during 22 to 42 days of age and 1 to 42 days of age (P<0.05). The growth performance of broilers in BS+CS group had no significantly changes during every experimental period (P>0.05). 2) There was no significant difference in slaughter performance of broilers among all groups (P>0.05). 3) Compared with control group, the villus height and the ratio of villus height to crypt depth in duodenum of broilers in BS group were significantly increased (P<0.05). 4) Compared with control group, Lactobacillus enumeration in cecum of broilers in BS, CS and BS+CS groups was significantly increased at 42 days of age (P<0.05).The ratio of Lactobacillus to Escherichia coli in cecum of broilers in BS and BS+CS groups was significantly increased at 42 days of age (P<0.05). Therefore, Bacillus subtilis can improve the intestinal morphology, increase Lactobacillus enumeration in cecum and promote the growth performance of broilers. In conclusion, the effect of Bacillus subtilis is better than that of colistin sulfate, but the effect of combination of Bacillus subtilis and colistin sulfate is not good.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(6)：1748-1756]

Key words:Bacillus subtilis; colistin sulfate; growth performance; intestinal morphology; bacterial communities

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.06.016

收稿日期：2015-12-17

基金項(xiàng)目：家禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系北京市創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(CARS-PSTP)

作者簡(jiǎn)介：齊博(1991—)，男，陜西西安人，碩士研究生，從事單胃動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究。E-mail: qibohuhu@163.com *通信作者：張海軍，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: fowlfeed@163.com

中圖分類號(hào)：S831；S816.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)06-1748-09

*Corresponding author, associate professor, E-mail: fowlfeed@163.com