易　凱

(益陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南益陽(yáng) 413000)

·臨床研究·

4例人感染豬鏈球菌病的回顧性分析

易凱

(益陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南益陽(yáng) 413000)

摘要:目的通過(guò)對(duì)益陽(yáng)市4例人感染豬鏈球菌患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，為豬鏈球菌病的診斷和治療提供依據(jù)。方法回顧性分析該院4例人感染豬鏈球菌病患者的臨床資料，職業(yè)特征，實(shí)驗(yàn)室血液和腦脊液檢驗(yàn)結(jié)果，分離菌株的細(xì)菌培養(yǎng)鑒定。結(jié)果從4例患者血液分離培養(yǎng)出病原菌，1例患者腦脊液分離出病原菌，均經(jīng)梅里埃VITEK-2 Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)鑒定為豬鏈球菌Ⅱ型。結(jié)論微生物工作人員應(yīng)加強(qiáng)豬鏈球菌的認(rèn)知，快速而準(zhǔn)確地得出病原學(xué)結(jié)果，為臨床診斷提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞:豬鏈球菌；細(xì)菌鑒定；回顧性分析

1968年丹麥學(xué)者首次報(bào)道了3例人感染豬鏈球菌導(dǎo)致腦膜炎并發(fā)敗血癥病例[1]，隨后在全世界范圍內(nèi)均有報(bào)道。在我國(guó)，1998年江蘇省發(fā)生了人感染豬鏈球菌病疫情，發(fā)病25例，死亡14例[2]；2005年6～8月，四川省發(fā)生的人感染豬鏈球菌病疫情暴發(fā)，為國(guó)內(nèi)外迄今為止報(bào)道的最大規(guī)模人感染豬鏈球菌病疫情，發(fā)病數(shù)215例，死亡38例[3]。益陽(yáng)市于2013年7月至2014年4月共發(fā)生4例人感染豬鏈球菌病。本研究對(duì)4例患者的臨床特征，實(shí)驗(yàn)室血液、腦脊液檢驗(yàn)結(jié)果及細(xì)菌鑒定進(jìn)行回顧性分析，從而為豬鏈球菌感染的診斷、治療提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料選取益陽(yáng)市中心醫(yī)院2013年7月至2014年2月的4例人感染豬鏈球菌病患者為研究對(duì)象，其中1例患者從腦脊液和血液同時(shí)分離出豬鏈球菌Ⅱ型，其余3例僅從血培養(yǎng)分離出豬鏈球菌Ⅱ型。其患者的一般資料、職業(yè)特征及菌株來(lái)源信息見(jiàn)表1。

表1　　4例豬鏈球菌病患者一般資料、職業(yè)特征及菌株來(lái)源信息

1.2主要儀器及試劑哥倫比亞血瓊脂平板、中和抗生素成人血培養(yǎng)瓶、GP鑒定卡、GP67藥敏卡、 ALERT 3D120血培養(yǎng)儀、VITEK-2 Compact細(xì)菌鑒定系統(tǒng)均為購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。

1.3細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定藥敏血液或腦脊液標(biāo)本經(jīng)血培養(yǎng)瓶置于ALERT 3D120血培養(yǎng)儀增菌培養(yǎng)，儀器陽(yáng)性報(bào)警時(shí)，轉(zhuǎn)種血平板后置于35 ℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，同時(shí)直接涂片革蘭染色鏡檢，培養(yǎng)18～24 h，觀察菌落形態(tài)，同時(shí)進(jìn)行革蘭染色和顯微鏡形態(tài)觀察。然后用VITEK-2 Compact細(xì)菌鑒定藥敏系統(tǒng)與配套的革蘭陽(yáng)性菌GP鑒定卡和GP67藥敏卡進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏實(shí)驗(yàn)，具體操作均參考儀器和試劑盒說(shuō)明書(shū)。血清學(xué)試驗(yàn)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)鑒定分型均送湖南省疾病控制中心進(jìn)行血清分型、PCR基因鑒定。

2結(jié)果

2.1人感染豬鏈球菌病患者血液和腦脊液實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果從表2可見(jiàn)，4例患者白細(xì)胞顯著上升，中性粒細(xì)胞比例增多，降鈣素原和C反應(yīng)蛋白均顯著升高。從表3可見(jiàn)，3例抽取的腦脊液白細(xì)胞升高、蛋白升高、腦脊液氯化物下降、腦脊液葡萄糖下降、乳酸脫氫酶上升。

表2　　4例豬鏈球菌病患者常見(jiàn)血液檢測(cè)結(jié)果

表3　　3例豬鏈球菌病患者腦脊液實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果

2.2人感染豬鏈球菌體形態(tài)和特征血平板上24 h呈α溶血，灰白、半透明，光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊，凸起，小菌落，直徑0.5～1.5 mm，見(jiàn)圖1A。細(xì)菌革蘭染色為革蘭陽(yáng)性球菌，在1 000倍顯微鏡下為單個(gè)或短鏈狀排列的似“矛頭狀”球菌，與肺炎鏈球菌的鏡下形相類(lèi)似，見(jiàn)圖1B。

A：豬鏈球菌在血平板上24 h菌落形態(tài)；B豬鏈球菌鏡下形態(tài)(革蘭染色×1 000)。

圖1人感染豬鏈球菌體形態(tài)和特征

2.35株分離菌陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間、鑒定結(jié)果、鑒定時(shí)間、可能性見(jiàn)表4。從表4可看出，血培養(yǎng)瓶在血培養(yǎng)儀陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間均不到16 h。鑒定藥敏系統(tǒng)對(duì)5株細(xì)菌均正確鑒定為豬鏈球菌Ⅱ型，鑒定時(shí)間都沒(méi)超過(guò)8 h，鑒定可能性均大于95%。

表4　　5株分離菌陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間、鑒定結(jié)果、

2.4藥敏試驗(yàn)結(jié)果5株細(xì)菌對(duì)青霉素、左氧氟沙星、萬(wàn)古霉素、紅霉素、克林霉素、利奈唑胺均敏感。

2.5湖南省疾病控制中心對(duì)上送的菌株進(jìn)行血清學(xué)分型，PCR基因分型均為豬鏈球菌Ⅱ型陽(yáng)性。

3討論

人感染豬鏈球菌病是由豬鏈球菌感染人而引起的人畜共患疾病。從事生豬的養(yǎng)殖、屠宰、銷(xiāo)售及加工等人員均為高危人群，本病主要通過(guò)接觸死豬或病豬(肉)后，通過(guò)皮膚傷口而感染。臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛、食欲下降等細(xì)菌感染癥狀，重癥患者可合并中毒性休克綜合征和鏈球菌腦膜炎綜合征[4]，給相關(guān)從業(yè)人員和廣大的群眾帶來(lái)嚴(yán)重的健康威脅。在豬鏈球菌的30多種血清型中，Ⅱ型是最常引起人類(lèi)感染的類(lèi)型[5]。豬鏈球菌Ⅱ型的毒力為莢膜多糖、溶菌酶釋放蛋白、溶血素、纖連蛋白結(jié)合蛋白、谷氨酸脫氫酶、Sao蛋白、存在于89K毒力島的雙信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)、莢膜唾液酸、Cbp40、VirA、pgdA、Trag、溶血素相關(guān)基因、CiaRH、CcpA、TroA等多種毒力因子協(xié)同作用的結(jié)果[6]。自從湖南省2006年首例報(bào)道人感染豬鏈球菌病[7]以來(lái)，每年陸續(xù)有散發(fā)病例報(bào)告，為豬鏈球菌病的疫區(qū)。益陽(yáng)地區(qū)2013年7月首次發(fā)現(xiàn)人感染豬鏈球菌病，到2014年2月共發(fā)現(xiàn)4例人感染豬鏈球菌病。

從本研究4例患者的病例臨床資料分析，其中有3例患者為生豬養(yǎng)殖者，經(jīng)調(diào)查，近一星期內(nèi)，均有死豬接觸史；另外1例患者為超市肉類(lèi)銷(xiāo)售人員，4例患者發(fā)病前均存在不同程度的皮膚破損或傷口?；颊咂鸩〖?，有畏寒、高熱、頭痛等神經(jīng)功能紊亂癥狀。從表2可見(jiàn)，4例患者白細(xì)胞顯著上升，中性粒細(xì)胞增多，降鈣素原升高和C反應(yīng)蛋白升高，提示患者有敗血癥實(shí)驗(yàn)室特征。從表3可見(jiàn)，3例抽取的腦脊液白細(xì)胞升高、蛋白升高、腦脊液氯化物下降、腦脊液葡萄糖下降、乳酸脫氫酶上升，有顯著的化膿性腦脊液的實(shí)驗(yàn)室改變，與以往的文獻(xiàn)報(bào)道相似[8]。從藥敏試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看豬鏈球菌對(duì)多種鏈球菌常見(jiàn)藥物敏感。

從表4可看出，血培養(yǎng)瓶在ALERT 3D120血培養(yǎng)儀陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間均不到16 h。VITEK-2 Compact 鑒定藥敏系統(tǒng)對(duì)5株細(xì)菌均正確鑒定為豬鏈球菌Ⅱ型，鑒定時(shí)間都沒(méi)超過(guò)8 h。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，血培養(yǎng)儀的陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間及VITEK-2 Compact系統(tǒng)鑒定正確率和鑒定時(shí)間能滿(mǎn)足對(duì)于豬鏈球菌的培養(yǎng)鑒定要求。但是從抽取血液標(biāo)本到陽(yáng)性報(bào)警，轉(zhuǎn)種血平板到鑒定得出正確的病原學(xué)鑒定結(jié)果需要2 d以上的時(shí)間，不利于潛伏期短，病情兇險(xiǎn)的患者及時(shí)診療。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)及PCR基因檢測(cè)雖然具有快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，但由于各種原因，一般臨床實(shí)驗(yàn)室均未開(kāi)展。對(duì)于血清學(xué)實(shí)驗(yàn)及PCR基因檢測(cè)未開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)室，需要加強(qiáng)疫區(qū)醫(yī)院微生物檢驗(yàn)人員對(duì)豬鏈球菌革蘭染色鏡下形態(tài)和菌落形態(tài)學(xué)的認(rèn)知水平，做好三級(jí)預(yù)防，加強(qiáng)與臨床的溝通，及時(shí)獲取患者職業(yè)特征和接觸史，以便及時(shí)的提醒臨床早期正確的診斷和及時(shí)有效的治療，對(duì)于挽救患者生命，減少后遺癥的發(fā)生具有十分重要的意義。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.058

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)10-1427-03

(收稿日期：2016-01-29)