王 倩，占松鶴，李少炎，何長生，周迎春，王 軍，陳 曦（.安徽省動物疫病預防與控制中心，安徽合肥 30065；.望江縣動物疫病預防與控制中心，安徽望江4600）

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安徽省2015年規(guī)模豬場高致病性藍耳病定點監(jiān)測與分析

王 倩1，占松鶴1，李少炎1，何長生2，周迎春2，王 軍2，陳 曦2
（1.安徽省動物疫病預防與控制中心，安徽合肥 230065；
2.望江縣動物疫病預防與控制中心，安徽望江246200）

摘 要：[目的]掌握安徽省規(guī)模豬場高致病性藍耳病的感染狀況和免疫抗體水平。[方法]采用抗體阻斷ELISA、熒光RT-PCR方法檢測了24個豬場的588份血清樣本和28個場點的790份組織樣品。[結(jié)果]高致病性藍耳病個體抗體免疫合格率為78.1%，群體免疫合格率為75.0%；中型豬場的平均免疫抗體合格率為87.1%、小型豬場為63.9%。高致病性藍耳病病毒核酸個體陽性率為28.7%，群體陽性率為75.0%；中型豬場、小型豬場和生豬屠宰場的高致病性藍耳病病毒核酸個體陽性率分別為41.7%、19.5%和6%。[結(jié)論]2015年安徽省規(guī)模豬場的高致病性藍耳病抗體免疫合格率較高，但存在帶毒現(xiàn)象，建議加強疫病的免疫和綜合防控。

關鍵詞：高致病性藍耳?。欢c監(jiān)測；免疫抗體水平；病毒核酸

高致病性藍耳?。℉P-PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異毒株（HP-PRRSV）引起的一種急性、高死亡率傳染病，是我國一類動物傳染病[1]。按照《2015年國家動物疫病定點監(jiān)測工作實施方案》要求，調(diào)查組分別在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、屠宰環(huán)節(jié)設立定點監(jiān)測點，開展HP-PRRSV感染狀況和免疫抗體水平監(jiān)測，探索建立完善的動物疫病監(jiān)測預警體系和動物疫病定點監(jiān)測機制。

1　材料與方法

1.1監(jiān)測點設置

選定安徽省全椒縣、望江縣和霍邱縣的6個中型生豬養(yǎng)殖場（存欄100～1 000頭）和6個小型生豬養(yǎng)殖場（存欄30～100頭）、金安區(qū)和臨泉縣各2個生豬屠宰場、28個固定監(jiān)測點，于2015年上半年和下半年各開展一次HP-PRRS定點監(jiān)測和流行病學調(diào)查工作。

1.2采樣種類和采樣數(shù)量

選取的豬場均為在采樣前一個月左右接受過HP-PRRS疫苗免疫的健康豬群。在規(guī)模豬場采集血清和對應扁桃體樣品，在屠宰場采集淋巴結(jié)樣品。在28個固定監(jiān)測點現(xiàn)場采集血清和扁桃體樣品各588份、淋巴結(jié)202份。

1.3儀器和試劑

HP-PRRS熒光RT-PCR檢測試劑盒（批號：20150415）購自哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司；PRRS抗體檢測ELISA試劑盒（批號：99-40959 E681）購自美國愛德士公司；其他儀器：磁珠純化儀（KingFisher Flex）、熒光定量PCR儀（ABI StepOne Plus）、酶標儀（TECAN SUNRISE REMOTE）、96通道全自動洗板機（ELX405R）等。

1.4檢測方法

采用PRRS間接ELISA實驗方法（GB/T 18090-2008）和PRRS RTPCR實驗方法，均按照試劑盒說明書進行操作。

1.5判定標準

抗體阻斷ELISA：S/P≥0.4抗體陽性即判定為免疫合格。熒光RT-PCR：Ct值≤30并出現(xiàn)特定的擴增曲線即判定為HP-PRRS病原學陽性。

2　結(jié)果

2.1血清學監(jiān)測

2015年共檢測24個豬場的588份血清。檢測合格459份，個體免疫合格率為78.1%；18個場免疫合格，群體免疫合格率為75.0%。其中，2015年上半年和下半年的平均免疫抗體合格率分別為86.7%和69.4%；免疫抗體合格率達到70%的場點數(shù)分別為10個和8個；群免疫合格率分別為83.3%和66.7%（表1）。12個中型豬場和12個小型豬場的HP-PRRS免疫抗體平均合格率分別為87.1%和63.9%（表2）。

表1　2015年HP-PRRS定點監(jiān)測免疫抗體檢測結(jié)果

表2　2015年不同規(guī)模豬場HP-PRRS免疫抗體合格率

2.2病原學檢測

2015年共監(jiān)測28個場點的790份病原學樣品。在19個豬場和2個屠宰場的227份樣品中檢出HP-PRRSV核酸，個體陽性率為28.7%，群陽性率為75.0%。其中，2015年上半年和下半年HPPRRSV核酸群陽性率分別為86%、64.3%，個體陽性率分別為34.8%、23.9%（表3）。

表3　2015年HP-PRRSV核酸檢測結(jié)果

12個中型豬場、12個小型豬場和4個生豬屠宰場樣本HP-PRRSV核酸陽性率分別為41.7%、19.5%和6%。其中上半年檢測發(fā)現(xiàn)陽性屠宰場1個、陽性中型養(yǎng)豬場5個、陽性小型養(yǎng)豬場6個，個體陽性率分別為12.7%、45.9%和17.3%；下半年檢測發(fā)現(xiàn)陽性屠宰場1個、陽性中型養(yǎng)豬場5個、陽性小型養(yǎng)豬場3個，個體陽性率分別為6%、36.2%和21.2%（表4）。

表4　不同類型監(jiān)測點HP-PRRS病毒核酸檢測結(jié)果

3　討論與分析

從免疫抗體檢測情況看，被檢測的豬場總體上基本達到了農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%的群體合格率標準。但從監(jiān)測時間上看，上半年和下半年的抗體水平不一致。究其原因，可能是上半年生豬補欄集中，免疫也較為集中，下半年由于生豬接近出欄，免疫抗體有所降低。另外，中型規(guī)模豬場由于其飼養(yǎng)環(huán)境、管理均好于小規(guī)模豬場，免疫措施相對到位，所以免疫抗體也相應較高。

從HP-PRRSV核酸檢測情況看，豬場的HPPRRS帶毒現(xiàn)象較為普遍。洪偉彬[2]等對廣東省HP-PRRS的流行病學調(diào)查顯示，廣東省10個地市的樣品總陽性率為28.9%；黃長春[3]對福建省泉州市2010—2012年HP-PRRS的病原學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)的豬場病原陽性率為31.94%。本次定點檢測發(fā)現(xiàn)，HP-PRRSV的核酸陽性率平均為28.7%，說明HP-PRRSV在安徽省普遍存在，且有流行的趨勢。HP-PRRS相對于普通PRRS而言，可感染不同年齡的豬，引起的發(fā)病率和病死率均較高[4]。免疫不確實或外部條件發(fā)生改變引起的應激反應，極易誘發(fā)該病的發(fā)生，在臨床上應引起高度重視。

從不同類型的采樣點與病毒陽性率的關系來看，養(yǎng)殖場的HP-PRRSV核酸檢出率高于屠宰場，中型豬場高于小型豬場。許平[5]對江蘇省響水縣HP-PRRS的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，規(guī)模豬場的陽性率為68.89%、屠宰場為58.82%。分析其中原因：大中型養(yǎng)殖場的養(yǎng)豬密度比小型養(yǎng)豬場大、養(yǎng)殖數(shù)量較多，不同圈舍的豬在調(diào)運、轉(zhuǎn)圈等過程中增加了直接接觸或間接接觸的機會，從而增大了接觸傳染的機會。而送到屠宰場的一般為成年豬，并且已通過有關檢疫部門的初步檢測，所以病毒核酸檢出陽性率較低。

4　結(jié)論

2015年安徽省定點監(jiān)測點的HP-PRRS抗體免疫合格率較高，但小型養(yǎng)殖場抗體合格率偏低，是該病發(fā)生的高風險豬群；豬場存在HP-PRRSV帶毒現(xiàn)象，應加強免疫和防控。

參考文獻：

[1] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部. 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第1125號[EB/OL].（2008-12-23）[2016-02-26]. http：//www.moa. gov.cn/zwllm/tzgg/gg/200812/t20081223_1194404.htm.

[2] 洪偉彬，李永福，葉毅飛，等.廣東省高致病性豬藍耳病流行病學調(diào)查[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014（1）：69-70.

[3] 黃長春. 泉州市2010-2012年豬繁殖與呼吸綜合征的病原學調(diào)查[J]. 福建畜牧獸醫(yī)，2015，37（6）：8-11.

[4] 吾際舟. 高致病性藍耳病的研究進展[J]. 中國豬業(yè)，2007 （8）：4-6.

[5] 許平. 江蘇省響水縣高致病性豬藍耳病流行病學調(diào)查及防控措施探討[J].中獸醫(yī)學雜志，2015（10）：19-20.

（責任編輯：朱迪國）

Analysis on Sentinel Surveillance of High Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome in Scale Pig Farms of Anhui Province in 2015

Wang Qian1，Zhan Songhe1，Li Shaoyan1，He Changsheng2，Zhou Yingchun2，Wang Jun2， Chen Xi2
（1. Anhui Animal Disease Prevention and Control Center，Hefei，Anhui 230032；
2. Wangjiang Animal Disease Prevention and Control Center，Wangjiang，Anhui 246200）

Abstract：[Objective] In order to understand the HP-PRRSV infection and immune antibody level in scale pig farms of Anhui province. [Methods] 588 samples of serum from 24 pig farms and 790 samples of tissues from 28 sites were tested by blocking ELISA and RT-PCR. [Results] The qualifi ed rate of HP-PRRS individual immunity was 78.1% and the qualifi ed rate of the group immunity was 75.0%.The average qualifi ed rate of the medium-sized pig farms was 87.1% and that of the small pig farms was 63.9%. The positive rate of HP-PRRSV nucleic acid was 28.7% and the positive rate of the group was 75.0%. The positive rate of the medium-sized pig farms，small pig farms and abattoirs were 41.7%，19.5% and 6% respectively. [Conclusion]The results indicated that the qualifi ed rate of HP-PRRS in scale pig farms of Anhui Province in 2015 was relatively high，but HP-PRRSV still existed in Anhui province. It was recommended to strengthen immunization，prevention and control of HP-PRRS.

Key words：high pathogenicity porcine reproductive and respiratory syndrome；sentinel surveillance；immune antibody level；viral nucleic acid

中圖分類號：S851.3

文獻標識碼：B

文章編號：1005-944X（2016）05-0005-03

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.05.002