景　明　郭　佳　賈延濤　張　竣　袁長春　林家猛

云南省玉溪市中醫(yī)醫(yī)院，云南　玉溪　653100

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彝藥“金基痹痛舒”合劑的抗炎鎮(zhèn)痛作用及急性毒性研究

景明郭佳賈延濤張竣袁長春林家猛

云南省玉溪市中醫(yī)醫(yī)院，云南玉溪653100

【摘要】目的：觀察彝藥“金基痹痛舒”合劑的抗炎、鎮(zhèn)痛作用及急性毒性。方法：采用大鼠足跖注射雞蛋清導(dǎo)致炎癥腫脹模型評(píng)價(jià)“金基痹痛舒”合劑的抗炎作用；采用小鼠腹腔注射冰醋酸導(dǎo)致扭體反應(yīng)方法考察“金基痹痛舒”的鎮(zhèn)痛作用；對(duì)小鼠經(jīng)口給藥的“金基痹痛舒”合劑的急性毒性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：彝藥“金基痹痛舒”合劑30g生藥/kg和10g生藥/kg組均能夠明顯抑制大鼠足趾注射10%雞蛋清導(dǎo)致的炎癥腫脹；“金基痹痛舒”合劑 75g生藥/kg和25g生藥/kg組對(duì)醋酸致小鼠扭體反應(yīng)均有明顯的緩解作用；急性毒性研究結(jié)果表明，“金基痹痛舒”合劑經(jīng)口給藥的小鼠最大給藥量為202.5g生藥/kg體重，按成人常用量計(jì)算，相當(dāng)于成人常用量的150倍。結(jié)論：彝藥“金基痹痛舒”合劑具有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用，在常規(guī)劑量下使用是安全的。

【關(guān)鍵詞】彝藥; “金基痹痛舒”合劑; 抗炎; 鎮(zhèn)痛; 急性毒性

發(fā)源于少數(shù)民族地區(qū)的民族醫(yī)藥是中國傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分，其中彝藥因其鮮明的地域性、民族傳統(tǒng)和獨(dú)特的醫(yī)藥理論更是備受矚目?！敖鸹酝词妗焙蟿楣P者根據(jù)在云南彝族聚居地區(qū)行醫(yī)多年的臨床用藥經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)歸納得到的用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腰痛等疾病取得顯著療效的彝藥方劑，本研究對(duì)該合劑的抗炎鎮(zhèn)痛作用及急性毒性進(jìn)行了考察，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)條件SD大鼠，體重180～220g，雄性(由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供，許可證：SCXK(川)2013-24，批號(hào)：0018491)；昆明種雄性小鼠，18～22g，共70只(購于北京華阜生物科技股份有限公司，合格證號(hào)為SCXK(京)2014-0004，批號(hào)為11401300027997)。所有動(dòng)物飼養(yǎng)于云南中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察室，室內(nèi)光照為自然晝夜交替，溫度為15～25℃，相對(duì)濕度為45%～65%，通風(fēng)良好，環(huán)境相對(duì)安靜。飼料為實(shí)驗(yàn)鼠配合飼料，自由攝食及飲水。

1.2藥品、試劑及儀器“金基痹痛舒”合劑，由云南省玉溪市中醫(yī)院藥劑科提供；阿司匹林腸溶片：湖南新匯制藥股份有限公司，批號(hào)：150208；冰乙酸：天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司，生產(chǎn)許可證:XK13-201-00121，批號(hào)：20121008；生理鹽水：昆明南疆制藥有限公司，批號(hào)：A150604E2；足趾容積測(cè)量?jī)x：山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站，YLS-7A,出廠編號(hào)：005090071；分析天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司，ISO9001，0.0001g。

1.3受試樣品制備“金基痹痛舒”合劑：臨床成人日劑量為每次87.6ml，一日三次，每毫升藥液相當(dāng)于生藥0.36g(按70kg/人，即1.35g/kg體重)。取4050ml藥液，濃縮至5.06g生藥/ml濃度(506.25g生藥/100ml)的濃縮液288ml，臨用前用蒸餾水稀釋至所需給藥濃度。

1.4分組及給藥劑量

1.4.1“金基痹痛舒”合劑對(duì)蛋清液致大鼠足趾腫脹[1]的影響取40只雄性SD大鼠依照隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為模型組(0.9%生理鹽水)，陽性對(duì)照組(0.2g/kg)，金基痹痛舒高劑量組(30g生藥/kg)和低劑量組(10g生藥/kg)。各組大鼠按上述分組連續(xù)灌胃給予相應(yīng)受試物10天，末次給藥1h后于大鼠右后足掌心向踝關(guān)節(jié)方向皮下注射10%鮮蛋清0.lml，在注射蛋清致炎前、注射蛋清致炎后的30min、1h、2h、3h、4h、5h分別測(cè)量足趾容積，將致炎后的足趾容積減去致炎前足趾容積即為足跖腫脹度，并計(jì)算足趾腫脹抑制率。

足趾腫脹抑制率(%)=(模型組足趾腫脹率-給藥組足趾腫脹率)/模型組足趾腫脹率×100%

1.4.2“金基痹痛舒”合劑對(duì)腹腔注射冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)[2]的影響取昆明種雄性小鼠48只，于實(shí)驗(yàn)前一天隨機(jī)分為4組，每組12只，分別為模型組(0.9%生理鹽水)、陽性對(duì)照組(阿司匹林，0.2g/kg)、“金基痹痛舒”高劑量組(75g生藥/kg，下稱“金高”)、金基痹痛舒低劑量組(25g生藥/kg下稱“金低”)，按0.2ml/10g體重連續(xù)灌胃給藥7天，末次給藥后1h，腹腔注射0.6%冰醋酸，0.1ml/10g體重，分別記錄給冰醋酸后0～5min，6～20min內(nèi)各組小鼠扭體次數(shù)，比較各給藥組與陰性對(duì)照組小鼠扭體次數(shù)的差異。1.4.3“金基痹痛舒”合劑小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性經(jīng)預(yù)試驗(yàn)，“金基痹痛舒“合劑濃縮液在最大濃度、最大灌胃體積下灌胃給予小鼠，動(dòng)物無死亡，故進(jìn)行最大給藥量的測(cè)定。取合格昆明種小鼠40只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為給藥組和陰性對(duì)照組，每組20只。試驗(yàn)前禁食不禁水12小時(shí)，給藥組灌胃給藥劑量為202.5g生藥/kg體重，給藥體積為0.4ml/10g體重，陰性對(duì)照組給予等體積的生理鹽水。給藥后連續(xù)觀察14天，每天觀察各組動(dòng)物的外觀、行為和毒性反應(yīng)，記錄動(dòng)物第1、3、5、7、9、11、13、14天的體重，結(jié)果見表3；記錄動(dòng)物第3、7、11天的進(jìn)食量，結(jié)果見表4。試驗(yàn)第14天處死、解剖小鼠，肉眼觀察其主要臟器的外觀。

2結(jié)果

2.1“金基痹痛舒”合劑對(duì)蛋清液致大鼠足趾腫脹的影響本研究結(jié)果顯示，與模型組比較，致炎后30min、1h、2h、3h、4h、5h，陽性對(duì)照藥阿司匹林后對(duì)皮下注射雞蛋清所致大鼠足趾腫脹度均有顯著的抑制作用，與模型組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；“金高”在致炎后30min、2h、4h、5h對(duì)該模型大鼠足跖腫脹度均有顯著的抑制作用，與模型組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01 或P<0.05)；“金低”在致炎后30min、1h、2h、3h、4h和3h對(duì)該模型大鼠足跖腫脹度均有顯著的抑制作用，與模型組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)，詳見表1。

表1　“金基痹痛舒”合劑對(duì)蛋清液致大鼠足趾腫脹的影響　±s，n=10)

注：給藥組與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.2“金基痹痛舒”合劑對(duì)腹腔注射冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響本研究結(jié)果顯示，“金基痹痛舒”合劑對(duì)腹腔注射0.6%冰醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)具有明顯的對(duì)抗作用，見表2。

表2“金基痹痛舒”合劑對(duì)腹腔注射冰醋酸致小鼠

扭體反應(yīng)的影響

組別劑量/g/kg扭體次數(shù)/次抑制率/%陰性對(duì)照組-50.2±8.3-陽性對(duì)照組0.224.2±12.5**51.6金高組7519.7±11.4**60.6金低組2522.5±9.2**55.0

注：與陰性對(duì)照組相比，*P<0.05,**P<0.01。

2.3“金基痹痛舒”合劑小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，給藥后4h內(nèi)各給藥組偶見動(dòng)物出現(xiàn)昏睡，易被警醒而恢復(fù)正?；顒?dòng)，但未見死亡。給藥后14日內(nèi)，動(dòng)物未見死亡，一般狀況良好，飲食、二便正常，且外觀、皮毛、行為、呼吸均正常，鼻、眼、口腔無異常分泌物，未見其它明顯異常反應(yīng)。給藥組與對(duì)照組的體重增長變化趨勢(shì)基本一致，給藥后進(jìn)食量基本穩(wěn)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后大體解剖觀察主要臟器，各組小鼠的心、肝、脾、肺、腎均無明顯異常。金基痹痛舒合劑濃縮液的最大給藥量為202.5g生藥/kg，按成人(70kg體重)臨床用量每天94.6g計(jì)算，金基痹痛舒的小鼠最大給藥量為成人臨床用量的150倍。見表3、4。

表3　“金基痹痛舒”合劑最大給藥量灌胃前、后小鼠體重變化　±s，g,n=20)

表4　“金基痹痛舒”合劑最大給藥量灌胃后

3討論

由于歷史等原因，彝族人民大多生活在高寒山區(qū)，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是彝族民間常見疾病，彝醫(yī)在與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎作斗爭(zhēng)的過程中，總結(jié)了很多行之有效的藥方。“金基痹痛舒”合劑為筆者根據(jù)在云南彝族聚居地區(qū)行醫(yī)多年的臨床用藥經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)歸納得到的彝族藥方，其在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療中具有顯著的消腫止痛作用，臨床療效確切，但其功效尚缺乏實(shí)驗(yàn)室研究數(shù)據(jù)的支撐，為了更科學(xué)、合理并安全的將“金基痹痛舒”合劑用于臨床，本實(shí)驗(yàn)對(duì)其抗炎、鎮(zhèn)痛作用及小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性情況進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，“金基痹痛舒”合劑對(duì)皮下注射雞蛋清所致大鼠足趾腫脹具有顯著的抑制作用，表明其具有較強(qiáng)的抗炎作用；由于該合劑臨床主要用于治療炎癥性疼痛，因此，本實(shí)驗(yàn)采用醋酸腹腔注射致小鼠扭體反應(yīng)的方法對(duì)其進(jìn)行了鎮(zhèn)痛作用研究，結(jié)果表明，“金基痹痛舒”合劑具有顯著減輕炎癥性疼痛作用；“金基痹痛舒”合劑小鼠經(jīng)口給藥的急性毒性研究結(jié)果顯示，“金基痹痛舒”合劑202.5g生藥/kg體重(相當(dāng)于臨床用量的150倍)時(shí)未見明顯毒性，提示，該藥在常規(guī)劑量下使用是安全的。對(duì)于“金基痹痛舒”合劑的抗炎作用機(jī)制還有待進(jìn)一步深入的研究。

參考文獻(xiàn)

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基金項(xiàng)目：云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：2013FZ094。

作者簡(jiǎn)介：景明，男，49歲，主任醫(yī)師，主要從事針灸推拿治療脊柱相關(guān)疾病臨床及研究，E-mail:j_m126@126.com

【中圖分類號(hào)】R29

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1007-8517(2016)09-0020-02

(收稿日期：2016.03.20)