陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院(咸陽 712000)　吳宏培　魯　鳴　李俊?！⒕昴荨垺〖选⊥踅∩?/p>

?

FOXQ1在胃癌組織中的表達及意義*

陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院(咸陽 712000)吳宏培魯鳴李俊海劉娟妮張佳△王健生△▲

摘要目的：探討FOXQ1在胃癌中的表達及與胃癌患者臨床病理資料的相關(guān)性。方法：采用免疫組化方法檢測60例胃癌組織和癌旁組織中FOXQ1的表達情況，并分析其表達情況與臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果：FOXQ1在胃癌中主要表達在細胞漿,在60例胃癌組織中,37例表達陽性,陽性率61.7%,明顯高于癌旁組織(23.9%)。FOXQ1的表達強度與胃癌的臨床分期、病理分級及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況有相關(guān)性(P<0.05),與其他臨床病理特征無明顯相關(guān)性(P>0.05)。經(jīng)Kaplan-Meier法生存比較，F(xiàn)OXQ1的陽性表達者比陰性表達者生存期短(P<0.05)。結(jié)論：FOXQ1在胃癌組織中表達較高,在癌旁組織表達較低,FOXQ1表達量的高低與胃癌臨床分期、病理分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有較好的相關(guān)性。

主題詞胃腫瘤免疫組織化學(xué)基因表達調(diào)控,腫瘤@叉頭框蛋白Q1

胃癌是全世界范圍內(nèi)常見惡性腫瘤之一,尤其在東亞,其發(fā)病率及死亡率均較高[1-2]。盡管近年來對于胃癌的化療及手術(shù)等治療的手段越來越多,進展期胃癌的預(yù)后仍然較差,尋找胃癌新的標志物來預(yù)測胃癌早期轉(zhuǎn)移及預(yù)后顯得極為重要[3]。叉頭框蛋白Q1(Foxkhead box 1, FOXQ1),也叫HFH1,為FOX基因家族成員,是一種核轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,主要功能是可以穩(wěn)定結(jié)合靶基因啟動子區(qū)域的C盒等核心元件,控制基因轉(zhuǎn)錄活性而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)[4]。已有研究表明FOXQ1與毛囊形態(tài)發(fā)生和胃上皮分化有關(guān)[5]。在胃中其參與胃酸分泌和粘蛋白基因表達[6]。近來在結(jié)腸癌、肺癌和乳腺癌的研究發(fā)現(xiàn)FOXQ1表達與腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后明顯相關(guān)[7-10]。本研究對胃癌中FOXQ1的表達進行免疫組化研究,并進一步探討FOXQ1基因表達與胃癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。

材料與方法

1材料選擇兩院2009年1月至2010年2月臨床病理資料完整的患者60例,術(shù)前均未行放化療,且經(jīng)病理證實為胃腺癌。隨訪時間截止于2015年1月。男38例,女22例,年齡45～68歲。I～II期29例,III～IV期31例,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移32例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例。取同一標本距腫瘤組織5 cm以上的正常胃組織作為對照組。組織學(xué)分級及腫瘤分期參照2010年國際抗癌聯(lián)盟/美國癌癥聯(lián)合委員會分期標準(UICC/AJCC)。所有病例均經(jīng)兩位病理醫(yī)生復(fù)診確認。

2方法胃癌標本經(jīng)10 %福爾馬林固定,石蠟包埋后連續(xù)切片,厚度為4 μm。免疫組化SP二步法檢測。兔抗人FOXQ1抗體購于Abcam公司,稀釋比例為1∶200,實驗步驟嚴格按照各試劑說明書進行,實驗用已知陽性片作陽性對照,采用PBS代替一抗做為陰性對照。

3結(jié)果判定陽性細胞為細胞質(zhì)淡黃色、棕黃色和棕褐色。根據(jù)染色細胞百分率和染色程度進行評定和分析。①按細胞陽性著色強度評分：陰性評0分,淡黃色評1分,棕黃色評2分,棕褐色評3分。②按陽性細胞所占的細胞百分比評分：陰性評0分，陽性細胞數(shù)<25% 評1分，陽性細胞數(shù)25%～49% 評2分，陽性細胞數(shù)50%～74% 評3分，陽性細胞數(shù)為>74% 評4分。把兩項得分的乘積≤3為陰性,>3為陽性。

4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)分析；使用X2檢驗和Fisher’s精確檢驗；組間比較采用Log-rank檢驗,生存分析采用Kaplan-Meier法。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

1FOXQ1在胃癌中的表達見圖1。在胃癌組織中FOXQ1的表達主要在細胞漿,在60例胃癌組織中,有37例表達陽性,陽性率為61.7%(37/60),23例表達陰性(38.3%)。癌旁組織中共有14例表達陽性,陽性率為23.9%(14/60),46例表達陰性(76.1)。在胃癌組織中的表達高于癌旁組織(P<0.05)。

2FOXQ1表達與臨床病理指標的關(guān)系見附表。FOXQ1在胃癌中的表達與胃癌病理分級、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性(P<0.05)。

3FOXQ1表達與預(yù)后的關(guān)系見圖2。Kaplan-Meier分析表明，胃癌患者中FOXQ1的表達水平與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.05)。FOXQ1表達陰性者中位生存期43.9個月,陽性者中位生存期32.5個月,陰性者比陽性者延長11.4個月,提示胃癌患者中FOXQ1陽性表達者預(yù)后較差。

A　腫瘤組織,B 癌旁組織

圖2　FOXQ1表達與胃癌患者預(yù)后Kaplan-Meier生存曲線

臨床病理特征n低表達高表達P值年齡0.794 <60351421 ≥6025916性別0.787 男371522 女23815吸煙1.000 有461828 無1459飲酒0.544 有451629 無1578腫瘤分化程度0.000 高1073 中371621 低13013TNM分期0.014 I～II241410 III～IV36927淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0.001 無23158 有37829

討論

FOXQ1為FOX轉(zhuǎn)錄因子家族成員，在發(fā)育、代謝、腫瘤及老化中起重要作用[9-10]。作為第一個被研究的FOX基因,在A10細胞中研究發(fā)現(xiàn)了FOXQ1抑制平滑肌特異的基因,如Sm22α和telokin。在胚胎干細胞中,研究發(fā)現(xiàn)FOXQ1為Hoxalde 下游。人FOXQ1位于染色體6p23-25，其在人類腫瘤的病因中起重要作用[10]。新近研究發(fā)現(xiàn)FOXQ1zai結(jié)腸癌和乳腺癌中高表達，且與患者臨床預(yù)后相關(guān)[9-10]。

本研究應(yīng)用免疫組化二步法技術(shù)，檢測胃癌中FOXQ1蛋白的表達情況及其與臨床病理指標以及預(yù)后的關(guān)系，研究結(jié)果表明，在60例胃癌組織中，F(xiàn)OXQ1主要定位于細胞漿，在癌組織中的表達明顯高于癌旁正常組織，說明FOXQ1在胃癌中可能具有癌基因功能且與胃癌的發(fā)生相關(guān)。FOXQ1的表達與腫瘤分級、分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)，表明FOXQ1高表達可能與胃癌進展相關(guān)。Kaplan-Meier分析發(fā)現(xiàn),胃癌患者中FOXQ1的表達水平與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.05)。FOXQ1表達陰性者中位生存期43.9個月，陽性者中位生存期32.5個月,陰性者比陽性者延長11.4個月,提示胃癌患者中FOXQ1陽性表達者預(yù)后較差。

綜上所述,FOXQ1的高表達在胃上皮細胞惡性轉(zhuǎn)化中起重要作用,與胃癌的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移及不良預(yù)后明顯相關(guān)。對其在胃癌中的具體調(diào)控機制的探討,有望為胃癌的診斷和治療提供新的途徑。

參考文獻

[1] Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics[J].CA-A Cancer Journal for Clinicians,2013,63(1):11-30.

[2] Ferlay J,Shin HR,Bray F,etal.Estimates of worldwide burden of cancer in 2008: GLOBOCAN 2008[J].International Journal of Cancer,2010,127(12):2893-2917.

[3] 魏疆,祿邵英.胃癌患者中ZEB1蛋白的檢測及其表達意義[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2015,44(1)：104-106.

[4]胡丹,姜 政,FOXQ1與消化道腫瘤相關(guān)性的研究進展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2015,21(15):2732-2735.

[5]Feuerborn A, Srivastava PK, Kuffer S,etal. The Forkhead factor FoxQ1 influences epithelial differentiation[J]. Journal of Cellular Physiology,2011,226(3)：710-719.

[6]Verzi MP, Khan AH, Ito S,etal. Transcription factor foxq1 controls mucin gene expression and granule content in mouse stomach surface mucous cells[J]. Gastroenterology,2008,135(2)：591-600.

[7]Kaneda H, Arao T, Tanaka K,etal. FOXQ1 is overexpressed in colorectal cancer and enhances tumorigenicity and tumor growth[J]. Cancer Research,2010,70(5):2053-2063.

[8]Qiao Y, Jiang X, Lee ST,etal. FOXQ1 regulates epithelial-mesenchymal transition in human cancers[J]. Cancer Research,2011,71(8):3076-3086.

[9]Zhang H, Meng F, Liu G,etal. Forkhead transcription factor foxq1 promotes epithelial-mesenchymal transition and breast cancer metastasis[J]. Cancer Research,2011,71(4):1292-1301.

[10]Liu CY,Gao HJ, Mu ZM,etal. Progress in functions and molecular mechanisms of the transcriptionfactor Fox[J]. Acta Entomologica Sinica,2013, 56(3) : 312-322.

(收稿：2015-12-25)

【中圖分類號】R735.2

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.06.041

*陜西省科技攻關(guān)項目(2009K01-85)

△西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院

▲通訊作者