徐璐茜,明建華,張易祥,葉金云
(水生動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室,浙江省水生生物資源養(yǎng)護(hù)與開發(fā)技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院水生動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖州師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,浙江湖州313000)
?;撬釋?duì)草魚幼魚生長(zhǎng)、非特異性免疫與抗氧化能力以及消化酶活性的影響
徐璐茜,明建華,張易祥,葉金云
(水生動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室,浙江省水生生物資源養(yǎng)護(hù)與開發(fā)技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院水生動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖州師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,浙江湖州313000)
試驗(yàn)選擇525尾體質(zhì)健壯,規(guī)格6.87±0.12 g的草魚幼魚,隨機(jī)分成5組,分別為對(duì)照組(基礎(chǔ)日糧)、4個(gè)實(shí)驗(yàn)組(基礎(chǔ)日添加?;撬嶂?.5‰、1.0‰、1.5‰和2.0‰),每組設(shè)3個(gè)重復(fù),正式飼養(yǎng)60 d。飼養(yǎng)結(jié)束后測(cè)定魚體生長(zhǎng)指標(biāo)、全魚成分、血清和肝臟以及腸道的生化指標(biāo)。結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,適量的?;撬峥娠@著提高草魚的增重率和特定生長(zhǎng)率、存活率、血清中補(bǔ)體C3、C4和溶菌酶含量,以及肝臟中超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性、總抗氧化能力、還原型谷胱甘肽,腸道中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性;降低餌料系數(shù)、肝臟中谷胱甘肽還原酶活性、丙二醛含量(P< 0.05)。此外,堿性磷酸酶水平在?;撬岬奶砑恿繛?.0 g/kg時(shí)與對(duì)照組相比顯著提高(P<0.05),而牛黃酸對(duì)草魚肝體比、內(nèi)臟比、肥滿度,以及全魚的水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分含量,血清中總蛋白含量的無顯著影響(P>0.05)。因此適量的牛磺酸不但可增強(qiáng)草魚幼魚腸道消化酶活性,促進(jìn)草魚幼魚的生長(zhǎng),而且能提高魚體的抗氧化能力和非特異性免疫力。以增重率為指標(biāo),草魚幼魚飼料中?;撬嶙钸m添加量為1.24 g/kg。
草魚;?;撬幔簧L(zhǎng);免疫;抗氧化能力
?;撬幔═aurine,2-氨基乙磺酸),是一種小分子β-含硫氨基酸,又稱牛膽堿、牛膽素。?;撬崮芙Y(jié)合膽酸,促進(jìn)蛋白質(zhì)、糖類和礦物質(zhì)的代謝,增進(jìn)脂肪和脂溶性物質(zhì)的消化吸收,保護(hù)細(xì)胞,提高動(dòng)物機(jī)體免疫力[1-3]。已有研究表明:在水產(chǎn)動(dòng)物日糧中添加?;撬崮軌蚱鸬礁纳普T食效果、提高抗缺氧能力、增強(qiáng)免疫機(jī)能和促生長(zhǎng)的作用[4]。由于魚類特別是肉食性魚類自身合成?;撬岬哪芰^弱[5],所以缺乏?;撬釙r(shí)容易發(fā)生生長(zhǎng)不良,甚至部分魚類還會(huì)出現(xiàn)綠肝綜合征,而當(dāng)飼料中補(bǔ)充?;撬岷螅@些魚類的生長(zhǎng)性能得到明顯改善,綠肝綜合征的發(fā)生率也大為降低[6]。目前已有較多有關(guān)牛磺酸在魚類飼料中應(yīng)用的報(bào)道,但研究?jī)?nèi)容主要集中在作為誘食劑、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑和提高魚類的繁殖性能方面,而且研究對(duì)象主要集中于海水魚類[7-10],對(duì)淡水魚類?;撬岬臓I(yíng)養(yǎng)需求研究較少,尤其是同一種魚在不同生長(zhǎng)階段對(duì)?;撬岬倪m宜添加劑量研究更少。
本試驗(yàn)選用“四大家魚”養(yǎng)殖產(chǎn)量之首的草魚幼魚作為研究對(duì)象,在植物蛋白源為主的飼料中添加不同量牛磺酸,研究其對(duì)草魚幼魚生長(zhǎng)、免疫與抗氧化以及消化酶活性的影響,為牛磺酸在草魚飼料中適宜添加量提供理論依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料
?;撬豳?gòu)自美國(guó)Sigma公司(純度≥99%)。試驗(yàn)飼料的基礎(chǔ)日糧組成及主要營(yíng)養(yǎng)成分見表1。試驗(yàn)共配制5種等氮等能飼料,以基礎(chǔ)日糧飼喂對(duì)照組,其余4組于基礎(chǔ)飼料中分別添加?;撬嶂?‰、0.5‰、1.0‰、1.5‰和2.0‰。飼料原料分別粉碎后過60目篩,加入相應(yīng)比例的?;撬岵⒊浞只靹?,然后用小型飼料造粒機(jī)制成粒徑為1 mm的沉性顆粒飼料,40℃烘干后置于4℃冰柜中保存?zhèn)溆谩?/p>
試驗(yàn)用草魚幼魚購(gòu)自湖州華興特種水產(chǎn)育苗場(chǎng)。選取健康的草魚魚種525尾,初始體體重6.87±0.12 g,隨機(jī)分成5組,每組3個(gè)重復(fù),于規(guī)格為500 L的循環(huán)養(yǎng)殖桶中用對(duì)照飼料暫養(yǎng),每桶放養(yǎng)35尾魚。暫養(yǎng)期間每天投料2次(08:30、16:30),日投喂量為魚體重2%~5%。日換水量為每桶1/3水體積,投喂1 h后清理殘餌。暫養(yǎng)期間pH為6.8~7.6,水溫為26~31℃,溶解氧>5 mg/L,氨氮<0.05 mg/L。
表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ),%)Tab.1Formula and nutrient composition of basal diet(air-dry basis,%)
1.2 飼養(yǎng)管理
將暫養(yǎng)7 d后的草魚幼魚分別飼喂在基礎(chǔ)日糧(表1)中添加?;撬嶂?‰、0.5‰、1.0‰、1.5‰和2.0‰的5種飼料60 d。每天投喂時(shí)間和次數(shù)同暫養(yǎng)。日投喂量根據(jù)魚類攝食、氣候變化及水溫情況作適當(dāng)調(diào)整,以每次投喂后1 h無殘餌為宜。試驗(yàn)用水pH、水溫、溶解氧和氨氮量同暫養(yǎng)。
1.3 采樣與處理
正式飼養(yǎng)60 d后進(jìn)行采樣,采樣前禁食24 h,將每桶魚計(jì)數(shù),每桶隨機(jī)選取體重相近的草魚3尾,用濃度為100 mg/L的3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽(MS-222)作快速深度麻醉,量體長(zhǎng)和稱重后用一次性醫(yī)用注射器從尾靜脈采血。血樣于4℃冰箱中靜置1~2 h后,以4℃3 000 r/min離心10 min制備血清,血清于-20℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
采血后的魚體立即剖開腹腔,剝離出內(nèi)臟和肝胰臟并進(jìn)行稱重,取適量肝臟和腸道于-80℃保存待用。另外選取全魚置于-80℃保存待用。
1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法
1.4.1 生長(zhǎng)與形體指標(biāo)
生長(zhǎng)與形體指標(biāo)增重率(weight gain rate,WGR)、特定生長(zhǎng)率(specific growth rate,SGR)、餌料系數(shù)(feed coefficient,F(xiàn)C)、成活率(Survival rate,SR)、肝體比(hepatosomatic index,HSI)、內(nèi)臟比(viscerosomatic index,VSI)、肥滿度(condition factor,CF)分別按下式計(jì)算:
式中,Wt(g)為魚末體均重;W0(g)為魚初體均重;t(d)為飼喂天數(shù);FI(g)每尾魚平均攝食飼料總量(風(fēng)干樣重);N0為初魚尾數(shù);Nt末魚尾數(shù);Wh(g)為每尾魚末肝臟重;Wb(g)為每尾魚末體重;Wv(g)為每尾魚末內(nèi)臟重;L(cm)為每尾魚末體長(zhǎng)。
1.4.2 飼料和肌肉樣品成分分析
由微量凱氏定氮法(GB/T6432-1994)測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量;由105℃烘箱干燥法(GB6435-1986)測(cè)定水分含量;由550℃灼燒法(GB/T6438-1992)測(cè)定粗灰分含量;由索氏抽提法(GB/T6433-1994)測(cè)定粗脂肪含量;總能利用氧彈測(cè)熱儀測(cè)定。
1.4.3 血液、肝臟和腸道生化指標(biāo)的測(cè)定
以下指標(biāo)均用購(gòu)自南京建成生物工程研究所試劑盒按照說明書測(cè)定:血清非特異性免疫指標(biāo)總蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)、堿性磷酸酶(ALP)、補(bǔ)體C3和C4;肝臟抗氧化指標(biāo)超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、過氧化氫酶(CAT)、總抗氧化能力(T-AOC)、還原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA);腸道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶。
1.5 數(shù)據(jù)處理與分析
用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件包中的單因素方差分析(one-way ANOVA)和Tukey多重比較實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),P<0.05表示差異顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Means±SD)表示。
2.1 ?;撬釋?duì)草魚生長(zhǎng)性能的影響
由表2可知,?;撬岬奶砑恿繛?.0 g/kg和1.5 g/kg飼料時(shí),草魚的增重率、特定生長(zhǎng)率、成活率與對(duì)照組相比均顯著提高(P<0.05),在添加量為2.0 g/kg飼料時(shí)與對(duì)照組差異不顯著(P<0.05),其中增重率分別提高了23.60%、16.36%,特定生長(zhǎng)率分別提高了13.19%、9.34%,成活率分別提高了16.84%、17.89%。飼料中添加?;撬岽笥?.5g/kg飼料時(shí)餌料系數(shù)與對(duì)照組相比顯著降低(P<0.05)。在形體指標(biāo)上,添加牛黃酸組的草魚的內(nèi)臟比、肝臟比、肥滿度與對(duì)照組比差異不顯著(P>0.05)。由此可見?;撬峥纱龠M(jìn)草魚生長(zhǎng)、提高草魚存活率、降低餌料系數(shù),但對(duì)草魚形體指標(biāo)的影響不顯著;過高的?;撬幔?.0g/kg飼料)并不能有效提高草魚的增重率、特定生長(zhǎng)率和成活率。
表2 ?;撬釋?duì)草魚生長(zhǎng)及形體指標(biāo)的影響Tab.2Effects of taurine on growth and shape index of grass carp
2.2 牛磺酸在草魚飼料中的適宜添加水平
通過回歸分析,得到增重率與飼料中牛磺酸含量的關(guān)系為y=-2 662.9 x2+662.25 x+196.44(y表示增重率%,x表示飼料?;撬崽砑恿浚?,R2=0.884 3,其擬合曲線如圖1所示。當(dāng)飼料中?;撬崽砑恿繛?.24 g/kg時(shí),草魚幼魚將獲得最大的生長(zhǎng)率。
圖1 飼料?;撬崽砑恿繉?duì)草魚增重率的影響Fig.1Effects of dietary taurine levels on weight gain rate(WGR)of grass carp
2.3 牛磺酸對(duì)草魚全魚成分的影響
由表3可知,與對(duì)照組相比,添加?;撬峤M的草魚的水分、粗脂肪、粗蛋白和灰分變化均不顯著(P>0.05)。可見?;撬釋?duì)草魚全魚成分無顯著影響。
2.4 ?;撬釋?duì)草魚血清非特異性免疫指標(biāo)的影響
由表4可知,與對(duì)照組相比,在?;撬釣?.0 g/kg和1.5 g/kg飼料時(shí)草魚血清中溶菌酶、補(bǔ)體C3、C4含量顯著提高(P<0.05),其中溶菌酶含量分別提高了31.65%、32.49%,補(bǔ)體C3含量分別提高了66.67%、61.90%,補(bǔ)體C4含量則分別提高了66.67%、66.67%;在牛磺酸添加量為2.0 g/kg飼料時(shí),與對(duì)照組相比上述指標(biāo)變化差異不顯著(P> 0.05)。?;撬崽砑恿繛?.0 g/kg時(shí),草魚堿性磷酸酶活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其它試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異不明顯(P>0.05)。與對(duì)照組相比,?;撬岬奶砑訉?duì)草魚血清總蛋白的含量影響不顯著(P>0.05)。由此可見,適量的?;撬峥稍鰪?qiáng)草魚的非特異性免疫力。
表3 飼料牛磺酸對(duì)草魚全魚成分的影響(%)Tab.3Effects of dietary taurine levels on whole fish composition of grass carp
表4 飼料?;撬釋?duì)草魚血清非特異性免疫指標(biāo)的影響Tab.4Effects of dietary taurine on serum non-specific immune parameters of grass carp
2.5 ?;撬釋?duì)草魚肝臟抗氧化指標(biāo)的影響
由表5可知,與對(duì)照組相比,當(dāng)?;撬岬奶砑恿看笥?.5 g/kg飼料時(shí),草魚肝臟的超氧化物歧化酶活性顯著提高;當(dāng)牛磺酸的添加量大于1.0 g/kg飼料時(shí),草魚肝臟的過氧化氫酶活性、谷胱甘肽過氧化物酶活性、還原型谷胱甘肽和總抗氧化能力均顯著提高(P<0.05)。在?;撬岬奶砑恿繛?.0 g/kg和1.5 g/kg飼料時(shí),谷胱甘肽還原酶活性與丙二醛含量與對(duì)照組相比均顯著降低(P<0.05),谷胱甘肽還原酶活性分別降低了32.62%、33.22%,丙二醛含量分別降低了26.42%、28.93%;谷胱甘肽還原酶活性與丙二醛在添加量為2.0 g/kg飼料時(shí)與對(duì)照組相比差異均不顯著(P>0.05)。由此可見,?;撬岬奶砑恿繛?.0 g/kg和1.5 g/kg時(shí)可提高草魚肝臟的抗氧化能力。
表5 飼料牛磺酸對(duì)草魚肝臟抗氧化指標(biāo)的影響Tab.5Effects of dietary taurine on liver antioxidant indices of grass carp
2.6 ?;撬釋?duì)草魚腸道消化酶活性的影響
從表6中可以看到,在?;撬崽砑恿扛哂?.0 g/kg飼料時(shí),草魚腸道胰蛋白酶和淀粉酶活力都顯著高于對(duì)照組(P<0.05);?;撬崽砑恿繛?.0 g/kg飼料和1.5 g/kg飼料時(shí),脂肪酶活性明顯高于對(duì)照組,而牛磺酸為2.0 g/kg飼料時(shí)脂肪酶變化不顯著。說明以草魚腸道胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶為指標(biāo),牛磺酸的量為1.0 g/kg飼料時(shí)最佳。
表6 飼料?;撬釋?duì)草魚腸道消化酶活性的影響Tab.6Effects of dietary taurine levels on intestinal digestive enzyme activities of grass carp
3.1 ?;撬釋?duì)草魚生長(zhǎng)、品質(zhì)和健康的影響
已有的研究表明,飼料中添加適量的?;撬峥纱龠M(jìn)魚類特別是肉食性魚的生長(zhǎng)性能[4],但?;撬崽砑舆^量反而對(duì)魚類的生長(zhǎng)性能不起作用或者起抑制作用。QI等[11]在多寶魚的飼料中添加?;撬岬牧繛?.5%~1.5%的范圍內(nèi)時(shí),增重率與特定生長(zhǎng)率都大于對(duì)照組;周銘文等[12]在斜帶石斑魚的飼料中添加牛磺酸的研究中增重率也明顯提高;羅莉等[13]等發(fā)現(xiàn)在草魚飼料中添加?;撬?00 mg/kg時(shí),特定生長(zhǎng)率、飼料效率和蛋白質(zhì)效率均比對(duì)照組顯著提高,而飼料中?;撬崽砑恿窟_(dá)到1 800 mg/kg后,蛋白質(zhì)效率比、生長(zhǎng)效率、飼料效率均低于對(duì)照組,說明添加過量的牛磺酸將抑制草魚生長(zhǎng)和飼料的利用。本試驗(yàn)對(duì)草魚的研究結(jié)果支持上述結(jié)論:飼料中添加1.0 g/kg和1.5 g/kg牛磺酸時(shí),可顯著促進(jìn)草魚生長(zhǎng)、提高草魚存活率、降低餌料系數(shù),但對(duì)草魚形體指標(biāo)肝體比、內(nèi)臟比和肥滿度的影響不顯著,添加量為2.0 g/kg時(shí)對(duì)草魚的生長(zhǎng)無顯著促進(jìn)作用。
本試驗(yàn)和其它大部分研究表明,飼料中添加適量牛磺酸對(duì)不同生長(zhǎng)期的草魚生長(zhǎng)性能均有促進(jìn)作用[13,14]。本試驗(yàn)用魚初始體重為6.87±0.12 g,羅莉等[13]研究用草魚初始體重為38.1~38.9 g,王清濱等[14]所用草魚初始體重為45.13±2.78 g。但YANG等[15]用添加0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 g/kg飼料?;撬犸曃钩跏俭w重5.26±0.03 g的草魚8周,發(fā)現(xiàn)各?;撬嵩囼?yàn)組增重率均低于不加牛磺酸的對(duì)照組,且1.0 g/kg飼料和1.0 g/kg飼料時(shí)增重率顯著降低(P<0.05);YANG等[15]對(duì)此的解釋采用了KIM等[16]在鯉魚幼魚研究中觀點(diǎn),認(rèn)為草魚幼魚類似鯉魚幼魚可自身合成?;撬帷2蒴~幼魚是否能自身合成?;撬徇€需進(jìn)一步研究。
魚體水分含量、粗蛋白、粗脂肪是魚品質(zhì)高低的重要指標(biāo),肥滿度是粗略衡量魚類能量?jī)?chǔ)備和健康的指標(biāo),在養(yǎng)殖過程中,肥滿度的變化情況可以反映魚類的營(yíng)養(yǎng)狀況。在本試驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,添加?;撬峤M的草魚的水分、粗脂肪、粗蛋白、灰分、肝體比、內(nèi)臟比和肥滿度變化均不顯著,說明?;撬釋?duì)草魚品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)健康無顯著影響。YEH和HWANG[17]的研究認(rèn)為,草魚的膽酸鹽主要是5α-鯉膽甾醇硫酸酯,占總膽鹽的94.6%,?;撬峤Y(jié)合膽鹽僅占1.7%,所以,他們認(rèn)為?;撬岵豢赡艽龠M(jìn)草魚通過膽酸途徑對(duì)脂質(zhì)的利用。本試驗(yàn)支持YEH和HWANG結(jié)論。但羅莉等[13]在草魚飼料中添加?;撬幔~體水分含量下降,體蛋白和體脂含量顯著增加,灰分含量、內(nèi)臟指數(shù)、肥滿度各試驗(yàn)組之間差異不顯著;王清濱[14]等在高脂飼料中添加適量的?;撬?,草魚肝體指數(shù)和臟體指數(shù)降低,肥滿度提高,肌肉中粗脂肪含量顯著降低,原因可能與實(shí)驗(yàn)條件有關(guān)。
3.2 牛磺酸對(duì)草魚腸道消化酶的影響
?;撬嵩隰~類肝臟中與膽酸、鵝脫氧膽酸等游離膽酸形成?;悄懰?、?;蛆Z脫氧膽酸等結(jié)合膽汁酸[4],膽汁酸乳化脂肪,激活脂肪酶的活性,從而促進(jìn)脂類物質(zhì)消化吸收;在酸性條件下淀粉酶活性較高,?;撬崮芴岣唢暳纤岫?,增強(qiáng)淀粉酶活性[4]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在?;撬崽砑恿扛哂?.0 g/kg飼料時(shí),草魚腸道胰蛋白酶和淀粉酶活力都顯著高于對(duì)照組,牛磺酸添加量為1.0g/kg飼料和1.5 g/kg飼料時(shí),脂肪酶活性顯著高于對(duì)照組,說明?;撬峥纱龠M(jìn)飼料脂肪、淀粉和蛋白質(zhì)的消化利用,促進(jìn)生長(zhǎng)。此結(jié)果與羅莉等[13]和王清濱[14]等在草魚中的研究結(jié)論相同。高春生等[18]在黃河鯉魚幼魚中的研究也得出了上述結(jié)論。另外,在本研究中,?;撬釣?.0 g/kg飼料時(shí)脂肪酶變化不顯著,表明?;撬岬奶砑恿坎⒉皇窃礁咴胶谩ANG等[15]的研究認(rèn)為?;撬釋?duì)草魚無促生長(zhǎng)作用,由于其論文中沒有消化酶數(shù)據(jù),故不知道魚消化酶變化是否和生長(zhǎng)指標(biāo)的變化相對(duì)應(yīng)。
3.3 ?;撬釋?duì)草魚血清非特異性免疫指標(biāo)和肝臟抗氧化指標(biāo)的影響
魚類血液成分的變化是用來評(píng)價(jià)魚體健康狀況、營(yíng)養(yǎng)狀況以及對(duì)環(huán)境的適應(yīng)狀況的重要指標(biāo)[19]。溶菌酶具有溶菌效應(yīng),是生物體內(nèi)重要的非特異性免疫因子之一,機(jī)體溶菌酶活性提高,其免疫力也相應(yīng)提高。堿性磷酸酶(AKP)提高魚體的抗病力的機(jī)理是通過改變病原體的表面結(jié)構(gòu)從而增強(qiáng)被侵襲機(jī)體對(duì)病原體的識(shí)別和吞噬能力。補(bǔ)體是抵抗病原微生物感染的重要成分,補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4參與補(bǔ)體的激活過程。本研究結(jié)果表明,適量?;撬幔?.0 g/kg和1.5 g/kg飼料)能顯著提高草魚血清中溶菌酶、補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4含量;在?;撬崽砑恿繛?.0 g/kg飼料時(shí),與對(duì)照組相比上述指標(biāo)變化差異不顯著。1.0 g/kg飼料的?;撬崽砑恿磕茱@著草魚堿性磷酸酶活性,表明適量的牛磺酸可增強(qiáng)草魚的非特異性免疫力。邱小琮等[20]在鯉魚、徐奇友等[21]在虹鱒仔魚也證明了牛磺酸可以提高魚的免疫能力。
?;撬峒捌溲苌锟汕宄龣C(jī)體活性氧及其他氧化性有害物,或通過增強(qiáng)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的抗氧化能力來保護(hù)動(dòng)物免遭氧化傷害[4]。新陳代謝過程中過多的自由基會(huì)引起動(dòng)物細(xì)胞脂質(zhì)過氧化反應(yīng),脂質(zhì)過氧化物的主要成分是丙二醛(MDA),具有很強(qiáng)的生物毒性,會(huì)破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能網(wǎng)。谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)等組成的抗氧化酶系統(tǒng)可清除過多的自由基,減少脂質(zhì)的過氧化損傷[19],其中CAT和GSH-Px可催化過氧化氫生成水和氧,SOD可特異性地催化超氧化物自由基轉(zhuǎn)化為過氧化氫;GSH-Px還可介導(dǎo)還原型谷胱甘肽催化脂質(zhì)過氧化物分解成無毒的醇[22]。因此,檢測(cè)魚體血液和肝臟中SOD、CAT、GSH-Px和MDA可較準(zhǔn)確反映機(jī)體內(nèi)的抗氧化狀況。王清濱等[14]的研究結(jié)果顯示,添加?;撬岣鹘M草魚血清和肝胰臟中SOD和CAT活性均有不同程度升高,丙二醛含量降低;邱小琮等人[23]在鯉魚的飼料中添加?;撬崾辊庺~血清和肝胰臟中的過氧化氫酶活力顯著提高。本研究結(jié)果也表明,適量的?;撬峥娠@著提高草魚肝臟的抗氧化能力,草魚肝臟的SOD活性、過氧化氫酶活性、谷胱甘肽過氧化物酶活性、還原型谷胱甘肽和總抗氧化能力都得到顯著提高,谷胱甘肽還原酶活性與丙二醛含量與對(duì)照組相比均顯著降低。
飼料中添加適量的牛磺酸可促進(jìn)草魚幼魚的生長(zhǎng),提高草魚魚體的腸道消化酶活性、抗氧化能力和非特異性免疫力,對(duì)防病抗病有一定的功效。以增重率為指標(biāo),草魚幼魚飼料中?;撬嶙钸m添加量為1.24 g/kg。
[1]LINDA S T,LEY S J.Influence of dietary taurine on performance and fat retention in broilers and turkey poults fed varying levels of fat[J].Poultry Science,1992,71:880-885.
[2]STURMAN J A.Taurine deficiency in the developing cat:persistence of the cerebellar external granule cell layer[J].Neuroscience Research,1985,13:405-416.
[3]HUXTABLE R J.Physiological actions of taurine[J].Physiological Review,1992,72(1):101-163.
[4]王和偉,葉繼丹,陳建春.牛磺酸在魚類營(yíng)養(yǎng)中的作用及其在魚類飼料中的應(yīng)用[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(7):1 418-1 428.
[5]GOTO T,TIBA K,SAKURADA Y,et al.Determination of hepatic cysteinesulfinate decarboxylase activity in fish by means of OPA-prelabeling and reverse-phase high-performance liquid chromatographic separation[J].Fisheries Science,2001,67(3): 553-555.
[6]TAKAGI S,MURATA H,GOTO T,et al.Efficacy of taurine supplementation for preve-nting green liver syndrome and improving growth performance in yearling red sea b-ream?Pagrus major?fed low-fishmeal diet[J].Fisheries Science,2006,72(6):1 191-1 199.
[7]KIM S K,TAKEUCHI T,YOKOYAMA M,et al.Effect of dietary taurine levels on growth and feeding behavior of juvenile Japanese flounder Paralichthys olivaceus[J].Aquaculture,2005,250:765-774.
[8]GAYLORD T G,BARROWS F T,TEAGUE A M,et al.Supplementation of taurine and methionine to all-plant protein diets for rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)[J].Aquaculture,2007,269:514-524.
[9]CHATZIFOTIS S,POLEMITOU I,DIVANACH P,et al.Effect of dietary taurine supplementation on growth performance and bile salt activated lipase activity of common dentex,Dentex dentex,fed a fish meal/soy protein concentrate-based diet[J]. Aquaculture,2008,275:201-208.
[10]TAKAGI S,MURATA H,GOTO T,et al.Necessity of dietary taurine Supplementation for preventing green liver symptom and improving growth performance In yearling red sea bream Pagrus major fed nonfishmeal diets based on soy protein concentrate [J].Fisheries Science,2010,76:119-130.
[11]QI G,AI Q,MAI K,et al.Effects of dietary taurine supplementation to a casein-base diet on growth performance and taurine distribution in two sizes of juvenile turbot[J].Aquaculture,2012,s358-359(1):122-128.
[12]周銘文,王和偉,葉繼丹.斜帶石斑魚生長(zhǎng)性能、體成分和組織游離氨基酸含量對(duì)飼料中牛磺酸含量的響應(yīng)[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(3):785-794.
[13]羅莉,文華,王琳.?;撬釋?duì)草魚生長(zhǎng)、品質(zhì)、消化酶和代謝酶活性的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2006,18(3):166-171.
[14]王清濱,王秋舉,楊翼羽,等.?;撬釋?duì)投喂高脂飼料草魚幼魚生長(zhǎng)、肌肉品質(zhì)及抗氧化能力的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2015,43(7):49-56.
[15]YANG H,TIAN L,HUANG J,et al.Dietary taurine can improve the hypoxia-tolerance but not the growth performance in juvenile grass carp Ctenopharyngodon idellus[J].Fish Physiol Biochem,2013,39(5):1 071-1 079.
[16]KIM S K,MATSUNARI H,TAKEUCHI T,et al.Comparison of taurine biosynthesis ability between juveniles of Japanese flounder and common carp[J].Amino Acids,2008,35:161-168.
[17]YEH Y H,HWANG D F.High-performance liquid chromatographic determination for bile components in fish,chicken and duck[J].J Chromatogr B,2001,751:1-8.
[18]高春生,范光麗,王艷玲.?;撬釋?duì)黃河鯉魚生長(zhǎng)性能和消化酶活性的影響[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2007,23(6):645-647.
[19]明建華,葉金云,張易祥,等.蠅蛆粉和L-肉堿對(duì)青魚生長(zhǎng)、免疫與抗氧化指標(biāo)及抗病力的影響[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2013, 28(2):80-86.
[20]邱小琮,趙紅雪.?;撬釋?duì)鯉生長(zhǎng)及血清T3、T4含量的影響[J].淡水漁業(yè),2006,36(1):22-24.
[21]徐奇友,許紅,鄭秋珊,等.?;撬釋?duì)虹鱒仔魚生長(zhǎng)、體成分和免疫指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,19(5):544-548.
[22]SIES H.Oxidative stress:oxidants and antioxidants[J].Experimental Physiology,1997,82(2):291-295.
[23]邱小琮,趙紅雪,王遠(yuǎn)吉,等.牛磺酸對(duì)鯉非特異性免疫及抗氧化能力的影響[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào),2008,17(4):429-434.
Effects of Dietary Taurine on the Growth,Innate Immune Response and Antioxidant Capacity and Digestive Enzyme Activity of Juvenile Grass Carp(Ctenopharyngodon idella)
XU Lu-xi,MING Jian-hua,ZHANG Yi-xiang,et al
(State-Province Joint Engineering Laboratory of Aquatic Animal Breeding and Nutrition,Zhejiang Provincial Key Laboratory of Aquatic Resources Conservation and Development,Key Laboratory of Aquatic Animal Genetic Breeding and Nutrition of Chinese Academy of Fishery Sciences,School of Life Sciences,Huzhou University,Huzhou313000,China)
Five hundred twenty five healthy juvenile grass carps with initial body weight of 6.87±0.12 g were randomly selected and divided into five groups,one control(basal diet)and four treatments groups(basaldiet with 0.5‰,1.0‰,1.5‰and 2.0‰taurine supplements),with in three replicates.After feeding for 60 days, we investigated the individual growth performance,whole fish components and biochemical parameters of digestive enzyme activities derived from fish serum,liver and intestine.Compared with the control group,the diet supplemented with an appropriate amount of taurine significantly increased the weight gain rate,specific growth rate,survival rate,as well as the complement-3/4 and lysozyme(LSZ)level in serum.Administrating with suitabletaurinealsoincreasedtheactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD),catalase(CAT),andglutathioneperoxidase (GSH-Px)in liver,along with the enhanced total antioxidant capacity(T-AOC)and glutathione peroxidase(GSHPx)level.Meanwhile,the activities of trypsin,amylase and lipase were significantly increased in intestinal tracts, but the feed coefficient,activity of glutathione reductase(GR)and the malondialdehyde(MDA)contents were significantly decreased in liver(P<0.05).In addition,when administrated with 1.0 g/kg taurine to the basal diet,the activities of serum alkaline phosphatase(ALP)was significantly increased in treatment groups(P<0.05).However, the taurine had no influence on the grass carps in terms of the hepatosomatic index,viscerosomatic index, condition factor,whole fish moisture,crude protein,ether extract,ash content and the total protein(TP)content in blood serum.Collectively,our results suggested that the suitable amount of taurine(1.24 g/kg)could not only facilitate the growth of juvenile grass carps,and increased the intestinal digestive enzyme activity,but also improved d the oxidation resistance and the innate immune response.
grass carp;taurine;growth;antioxidation;immunity
S963
A
1008-830X(2016)06-0464-08
2016-07-18
現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-46-21);國(guó)家自然科學(xué)基金(31372544);農(nóng)業(yè)部淡水漁業(yè)和種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(KF201506);湖州市公益性技術(shù)應(yīng)用重點(diǎn)項(xiàng)目(2015GZ07)
徐璐茜(1995-),女,浙江衢州人,研究方向:水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料.E-mail:792255658@qq.com
明建華,副教授.E-mail:mingjh686@zjhu.edu.cn