馮靜喬

515000 廣東 汕頭，汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒科

?

臨床研究

Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中的表達意義

馮靜喬

515000 廣東 汕頭，汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒科

【摘要】目的探究Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中的表達意義。方法2010年2月至2014年10月汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒科收治住院的急性白血病患兒100例為觀察組，又根據(jù)疾病類型分為3個亞組，即急性淋巴細胞白血病(ALL)組49例，急性非淋巴細胞白血病(ANLL)組21例，急性髓細胞白血病(AML)組30例。對照組30例，為同年齡正常健康兒童。采用免疫組織化學方法檢測Daxx蛋白的表達。結(jié)果對照組兒童骨髓細胞中Daxx蛋白的表達陽性率與ALL組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.008 3)；對照組兒童骨髓細胞中Daxx蛋白的表達陽性率顯著低于ANLL組和AML組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.008 3)。對照組中Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓中的表達(6.01±1.13)μg/L，顯著高于ALL組(3.55±2.32)μg/L、ANLL組(3.54±2.47)μg/L、AML組(3.12±1.56)μg/L，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中過度表達，可能對促進白血病細胞的增殖、生長過程起到重要作用。

【關鍵詞】急性白血病；Daxx蛋白；兒童

急性白血病是一種造血組織的惡性腫瘤，在醫(yī)學上稱作為血癌[1]。是造血干細胞以及祖細胞中的一種或幾種惡變，從而失去正常細胞的增殖、分化的能力，這種細胞變的持續(xù)增殖無控制，慢慢的骨髓會被逐步取代，并且這種細胞經(jīng)過血液分布到全身組織器官[2]。Daxx是急性白血病中的一種新轉(zhuǎn)錄調(diào)控類型的蛋白，它與正常細胞的轉(zhuǎn)錄分化、增殖生長等生理過程有密切的關系[3]。近年來，相關醫(yī)學研究發(fā)現(xiàn)Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中起到了很大作用[4]。本研究主要對Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中的表達意義和預后的關系做出進一步的研究探討，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料2010年2月至2014年10月汕頭大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒科收治住院的急性白血病患兒100例，為觀察組，又根據(jù)疾病類型分為3個亞組，即急性淋巴細胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)組49例，急性非淋巴細胞白血病(acute non lymphocytic leukemia，ANLL)組21例，急性髓細胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)組30例。對照組30例，為同年齡正常健康兒童，同時排除血液系統(tǒng)疾病。觀察組和對照組受試對象在年齡、性別方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，3個亞組與對照組比較差異也無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

表1　各組兒童一般資料比較

1.2診斷標準參照《白血病的診斷與治療》中急性白血病的診斷標準及FAB分型診斷標準[5]。

1.3納入標準(1)符合急性白血病的診斷標準；(2)骨髓象檢查，增生Ⅰ～Ⅱ級，分類中原始細胞明顯增多，至少>30%；(3)年齡6～17歲；(4)病程為初發(fā)，體質(zhì)適合接受治療者；(5)事前經(jīng)過患者本人及其家屬同意，并經(jīng)過本院倫理部門研究予以肯定指示。

1.4排除標準(1)體質(zhì)十分虛弱不適宜接受治療者；(2)有精神病史者。

1.5檢測方法骨髓涂片時所用的玻片均經(jīng)過消毒處理，涂片涂好后，自然干燥，放在4 ℃的環(huán)境下用丙酮固定30 min，等待自然干燥，隨后置于-20 ℃的冷凍庫中凍存待檢[6]。采用免疫組織化學鏈霉素親和素-生物素-過氧化酶復合物(SABC)方法檢測Daxx蛋白的表達，蘇木精進行染色，采用中性樹膠將玻片密封。判定結(jié)果：Daxx蛋白顏色為黃色，呈顆粒狀，分布于細胞核內(nèi)，陽性細胞散在分布。選擇20個高倍視野，計數(shù)細胞個數(shù)，比較陰陽性。

1.4觀察指標觀察Daxx蛋白在各組兒童急性白血病骨髓中的表達，分析Daxx蛋白在骨細胞中為因變量的表達水平，Daxx蛋白在兒童骨髓細胞中的陽性率。

1.5統(tǒng)計學方法采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學處理，計量資料以表示，多組比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

各組兒童急性白血病骨髓中Daxx蛋白的表達比較見表2。

表2　各組兒童急性白血病骨髓中Daxx蛋白的表達比較

表2結(jié)果表明，各組Daxx蛋白在骨髓中的表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。進一步兩兩比較，ALL組、ANLL組、AML組Daxx蛋白在骨髓中的表達顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(q=6.72,5.50,7.09，P<0.01)。

表2結(jié)果還表明，對照組與ALL組、ANLL組及AML組4組兒童骨髓細胞中Daxx蛋白的表達陽性率比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，進一步兩兩比較，對照組與ALL組比較差異無統(tǒng)計學意義(χ2=6.32，P=0.012>0.008 3)；ANLL組和AML組兒童骨髓細胞中Daxx蛋白的表達陽性率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=20.66,12.27，P<0.008 3)。ALL組兒童骨髓細胞中Daxx蛋白的表達陽性率顯著低于ANLL組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=7.88，P<0.008 3)；AML組兒童骨髓細胞中Daxx蛋白的表達陽性率與ALL組和ANLL組比較差異無統(tǒng)計學意義(χ2=2.06，2.00，P>0.008 3)。

3討論

兒童急性白血病極大危害孩子的健康成長，給家長和孩子都造成嚴重的身體、心理以及經(jīng)濟上的損害，必須及時進行救治。一般平均存活壽命為2～4個月，甚至在就診數(shù)十天后就會失去生命。所以在平時的生活中就應該重視起來。目前，臨床治療白血病總原則為滅殺患兒體內(nèi)白血病細胞[8]，控制病變細胞大量的增生繁殖，進而放置白血病細胞浸潤，下面簡單介紹治療的原則。首先，患兒應注意多加休息[9]?；純簯苊饨佑|過高的溫度，當出現(xiàn)嚴重的貧血時應及時臥床休息[10]。其次，患兒要避免感染發(fā)生。研究表明，臨床上感染是導致死亡的最大的原因，因此患者應該做好充分的防止感染工作[11]。平時應該注意口腔、手腳衛(wèi)生，防止出血、潰爛等發(fā)生；室內(nèi)要注意通風良好，定期對室內(nèi)空氣消毒[12]。最后，患兒如果出現(xiàn)貧血，應及時糾正。

近年來，相關醫(yī)學研究發(fā)現(xiàn)Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中起到了很大作用[13]。Daxx蛋白在影響細胞轉(zhuǎn)錄、生長以及凋亡的機制以及作用還存在很大的爭議。Daxx蛋白是一種非常重要的信號分子，在細胞核中作為調(diào)控轉(zhuǎn)錄的分子發(fā)揮很重要的促進凋亡的作用,可促進白血病細胞的增殖、生長，在兒童的急性白血病中發(fā)揮至關重要的作用。劉靜等[14]對Daxx蛋白在兒童急性白血病中的表達進行了研究，并對其與急性白血病臨床分型和預后之間的關系進行了探討，通過檢測50例兒童急性白血病患者骨髓細胞Daxx蛋白的表達,Daxx在ALL組、ANLL組、AML組患兒骨髓細胞中的陽性表達率分別為26.5%、62.5%、38.0%，稍低于較本研究的30.61%、66.67%、46.67%，這可能與本研究選取樣本的數(shù)量有關，其研究結(jié)果表明Daxx蛋白在兒童急性白血病中異常表達,并且與兒童急性白血病的某些臨床特征密切相關,認為在兒童急性白血病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要的作用。本研究發(fā)現(xiàn)其中ANLL組陽性率高達66.67%，這說明Daxx蛋白在ANLL細胞中調(diào)控異常；在100例急性白血病患兒中，其中有57例患者呈陽性，而對照組的30例患兒中僅有2例呈陽性，說明Daxx蛋白可對白血病細胞的增殖、生長起到一定的促進作用，值得更進一步的深入研究。

綜上所述，本研究Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細胞中過度表達，可能對促進白血病細胞的增殖、生長起到重要作用。

參考文獻

[1]黃禮彬,張曉莉,譚惠珍，等.兒童急性白血病耐藥相關microRNA的篩選[J].中山大學學報(醫(yī)學科學版),2012,33(5):592-596.

[2]李曉輝,張劍白,王亞君，等.TRIP3基因與兒童急性白血病免疫分型關系的研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學學報,2011,45(3):272-274.

[3]周東風,翟麗娜,潘峰，等.樹突狀細胞與細胞因子誘導的殺傷細胞共培養(yǎng)細胞過繼免疫治療兒童急性白血病[J].實用兒科臨床雜志,2012,4(3):166-169.

[4]盧新天.兒童急性白血病預后影響因素[J].實用兒科臨床雜志,2011,26(15):1155-1158.

[5]李金梅,成秉林,周晉.白血病的診斷與治療[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2008.

[6]岳志霞,鄭胡鏞.兒童急性白血病遺傳學研究進展[J].中國實驗血液學雜志,2013,21(3):791-795.

[7]方希敏,潘夏蓁,錢江潮，等.兒童急性白血病化療后感染的臨床分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2013，23(5):1087-1089.

[8]楊月明,劉伶.兒童白血病常規(guī)劑量環(huán)磷酰胺致心臟毒性1例報告[J].中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學，2014，6(4):383-384.

[9]曲延章.兒童急性白血病影響因素分析[J].中國公共衛(wèi)生,2014,30(12):1606-1607.

[10]朱麗丹,孔佩艷,劉紅，等.52例急性白血病患兒長期存活分析[J].重慶醫(yī)學，2011，40(36)：3703-3704.

[11]Kent EE,Mitchell SA,Oakley-girvan I,et al.The importance of symptom surveillance during follow-up care of leukemia,bladder,and colorectal cancer survivors[J].Support Care Cancer，2014，22(1):163-172.

[12]Yujiri T,Tanaka M,Taguchi A,et al.Reactivation of hepatitis B virus in a hepatitis B surface antigen-negative patient with acute promyelocytic leukemia treated with arsenic trioxide[J].Ann Hematol，2014，93(2):351-352.

[13]翟元梅,石軍.白血病相關骨髓纖維異常的研究進展[J].中國實驗血液學雜志，2014，22(1)：229-231.

[14]劉靜,張柳清,胡群，等.Daxx蛋白在兒童急性白血病中的表達及其臨床意義[J].中國當代兒科雜志，2007，9(1):33-36.

(本文編輯：劉穎)

Expression significance of Daxx protein in bone marrow cells of children with acute leukemia

FENGJingqiao.

TheFirstAffiliatedHospitalofShantouUniversity，Shantou515000，China.

【Abstract】ObjectiveTo explore the expression significance of Daxx protein in bone marrow cells of children with acute leukemia.MethodsTotally 100 cases of children with acute leukemia were selected as the research object in this study from Feb.2010 to Oct.2014 in the First Affiliated Hospital of Shantou University Medical College and divided into 3 groups according to the type of disease,including acute lymphoblastic leukemia(ALL)group of 49 cases,acute non-lymphocytic leukemia(ANLL)group of 21 cases,acute myeloid leukemia(AML)group of 30 cases.The control group consisted of 30 cases,who were normal healthy children of the same age.The expression of Daxx protein was detected by immunohistochemical method.ResultsThe expression rate of Daxx protein in the control group(6.67%)was much smaller than that in ALL group(30.38%),ANLL group(66.67%)and AML group(46.67%),the difference being statistically significant(P<0.05).Expression of Daxx protein in the control group in the bone marrow of children with acute leukemia(6.01±1.13)μg/L was significantly higher than that in ALL group(3.55±2.32)μg/L,ANLL group(3.54±2.47)μg/L and AML group(3.51±2.53)μg/L,the difference being statistically significant(P<0.05).ConclusionThe overexpression of Daxx protein in bone marrow cells of children with acute leukemia may play an important role in promoting the proliferation and growth of leukemia cells.

【Keywords】Acute leukemia;Daxx protein;Children

作者簡介：馮靜喬(1979-)，女，醫(yī)學碩士，主治醫(yī)師。研究方向：小兒血液病的基礎與臨床研究，E-mail：fengjingqiao2015@163.com

doi：10.3969/j.issn.1674-3865.2016.02.011

【中圖分類號】R725.5

【文獻標識碼】A

【文章編號】1674-3865(2016)02-0161-03

(收稿日期：2015-08-25)