殷其改，郝　麗，楊海燕，苗　莉

(徐州醫(yī)學(xué)院附屬連云港第一人民醫(yī)院新生兒科，江蘇連云港 222000)

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S100A8、S100A9蛋白在急性肺損傷新生兒血清中的動態(tài)變化及意義

殷其改，郝麗，楊海燕，苗莉

(徐州醫(yī)學(xué)院附屬連云港第一人民醫(yī)院新生兒科，江蘇連云港 222000)

[摘要]目的探討S100A8、S100A9蛋白在急性肺損傷(ALI)新生兒血清中的動態(tài)變化。方法選擇該院2011年1月至2013年12月收治的ALI患兒30例(ALI組)、濕肺患兒30例(濕肺組)及同期產(chǎn)科出生的健康新生兒30例(對照組)，采取酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法分別檢測各組對象S100A8及S100A9蛋白的動態(tài)變化。結(jié)果ALI組在發(fā)病第1、3、7天血清S100A8、S100A9蛋白均明顯高于濕肺組及對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，ALI組S100A8蛋白在發(fā)病第1天升高最為明顯[(187.29.±29.71) pg/mL]，S100A9蛋白在發(fā)病第3天升高最為明顯[(280.01±42.29 )pg/mL]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，第7天時(shí)二者均有不同程度下降。濕肺組S100A8、S100A9蛋白較對照組升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論S100A8、S100A9蛋白參與了新生兒ALI的發(fā)病，對新生兒ALI早期診斷、治療及預(yù)后有著一定的潛在臨床應(yīng)用價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]嬰兒，新生；急性肺損傷；S100A8蛋白；S100A9蛋白

新生兒急性肺損傷(acute lung injury,ALI)是新生兒疾病中常見的危重癥，嚴(yán)重影響著患兒的生存質(zhì)量。急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS )是ALI的嚴(yán)重形式。Flori 等[1]曾統(tǒng)計(jì)兒童ALI的病死率為22%。有研究認(rèn)為新生兒ARDS病死率與成人和兒童相似，為50%～60%[2]。由于ARDS是ALI連續(xù)病理過程中最嚴(yán)重的階段，所有ARDS均經(jīng)歷ALI，而ALI并不一定發(fā)展成ARDS[3]。早期發(fā)現(xiàn)并及時(shí)有效的治療ALI可以阻斷其病情繼續(xù)向ARDS發(fā)展，從而降低ALI死亡率。目前針對ALI/ARDS的研究多為成人，對新生兒的ALI/ARDS研究甚少，本研究以ALI的新生兒為研究對象，采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測患兒血清S100A8、S100A9蛋白的動態(tài)變化，探討其在新生兒ALI發(fā)病早期診斷中的意義。

1資料與方法

1.1一般資料選擇本院2011年1月至2013年12月收治的ALI患兒30例(ALI組)，其中男18例，女12例；胎齡37～42周，日齡1～5 d；體質(zhì)量2.4～4.5 kg；敗血癥4例，擇期剖宮產(chǎn)患兒8例，重度窒息5例，新生兒缺氧缺血性腦病4例，休克4例，胎糞吸入綜合征3例，化膿性腦膜炎2例；30例患兒中，22例行機(jī)械通氣治療，19例治愈，7例好轉(zhuǎn)，4例放棄治療后死亡。新生兒ALI/ARDS診斷標(biāo)準(zhǔn)包括：(1)有發(fā)病的高危因素；(2)急性起病，呼吸頻數(shù)和(或)呼吸窘迫；(3)低氧血癥，動脈血氧分壓(PaO2)與吸入氧濃度(FiO2)比值，<200 mm Hg診斷為ARDS，< 300 mm Hg 診斷為ALI；(4)X線胸片顯示雙肺彌散浸潤性陰影伴肺水腫改變;(5)肺毛細(xì)血管楔壓(PCWP)≤18 mm Hg或臨床能除外心源性肺水腫。凡符合以上5項(xiàng)可診斷[4]。選擇同期在本院新生兒科住院的濕肺患兒30例(濕肺組)，其中男17例，女13例；胎齡37+4～42+3周，日齡1～3 d，出生體質(zhì)量2.8～4.5 kg。濕肺診斷參照實(shí)用新生兒學(xué)[5]。選擇本院產(chǎn)科同期出生的健康足月兒30例作為對照組，其中男14例，女16例；胎齡37～41+6周，日齡1～4 d，3組對象的胎鈴、出生體質(zhì)量及日齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1儀器及試劑S100A8、S100A9蛋白測試盒購自上海西塘生物科技有限公司，實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照試劑盒操作說明進(jìn)行，由專業(yè)檢驗(yàn)師進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.2.2觀察指標(biāo)及測定方法ALI組及濕肺組于入院后第1、3、7天抽取靜脈血2 mL，放于加有抗凝劑的塑料試管中，離心10 min 后，取上清液-20 ℃保留備用。采用ELISA法測定各組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的S100A8、S100A9蛋白的水平，對照組新生兒僅抽取生后第1天靜脈血測定以上2個(gè)指標(biāo)的水平。

2結(jié)果

2.1各組對象S100A8蛋白水平的比較入院第1天ALI組S100A8蛋白較對照組及濕肺組明顯升高(P<0.01)，而在第3天逐漸下降，第7天下降明顯，但與濕肺組相比明顯升高(P<0.05)；濕肺組在第1天S100A8蛋白較對照組有升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；濕肺組在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)S100A8蛋白比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1　3組對象各時(shí)間點(diǎn)S100A8蛋白水平

a：P<0.01，與ALI組比較；-：此項(xiàng)無數(shù)據(jù)。

2.2各組對象S100A9蛋白水平的比較入院第1天ALI組S100A9蛋白水平較對照組及濕肺組明顯升高(P<0.05)；第3天ALI組S100A9蛋白達(dá)到高峰，且與第1天比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；第7天ALI組S100A9蛋白逐漸下降，與第1、3天比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；ALI組與濕肺組各個(gè)時(shí)間段S100A9蛋白水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，但濕肺組3個(gè)時(shí)間點(diǎn)S100A9蛋白表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；濕肺組與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2　3組對象各時(shí)間點(diǎn)S100A9蛋白水平

a：P<0.01，與同組入院第1天比較；b：P<0.01，與同組入院第3天比較；c：P<0.01，與ALI組比較；-：此項(xiàng)無數(shù)據(jù)。

3討論

新生兒ALI/ARDS是由多種原因引起的肺部彌散性損害,以頑固性低氧血癥、呼吸窘迫、肺順應(yīng)性下降和彌散性滲出為主要特征，ARDS是ALI的嚴(yán)重形式。肺部是全身最易受損的首位靶器官，ALI/ARDS易致嚴(yán)重低氧血癥,進(jìn)而引起其他臟器功能不全,甚至多臟器功能衰竭。近年來，在新生兒重癥監(jiān)護(hù)室(NICU)病房中ALI逐年增多，嚴(yán)重的危害著新生兒的健康。ALI病情危重，進(jìn)展快，要取得肺組織做病理學(xué)診斷是不現(xiàn)實(shí)的，因此新生兒ALI/ARDS的合理診斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)充分考慮新生兒的特殊解剖生理及病理特點(diǎn)[6]，如何做到早期診斷、早期預(yù)防并及時(shí)干預(yù)，對降低患兒的死亡率、提高生存率有著重要的意義。

ALI/ARDS發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，確切機(jī)制尚不完善明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為ALI/ARDS發(fā)生、發(fā)展的中心環(huán)節(jié)是多種損傷因素導(dǎo)致的瀑布式炎癥級聯(lián)反應(yīng)，其發(fā)病機(jī)制與多種因素有關(guān)，細(xì)胞因子的過渡釋放、中性粒細(xì)胞(PMN)介導(dǎo)的氧中毒、機(jī)械通氣等均會造成肺損傷。因此ALI/ARDS不僅僅是單純意義上的肺部疾病，更重要的是多種炎癥細(xì)胞及其釋放的炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子間接介導(dǎo)的肺炎癥反應(yīng)，也是全身系統(tǒng)炎癥疾病的肺部表現(xiàn)。

目前發(fā)現(xiàn)S100蛋白家族共有21個(gè)成員,其中與肺部疾病相關(guān)的主要有S100A8、S100A9、S100A12,S100蛋白在ALI發(fā)病中的作用機(jī)制可能與促進(jìn)嗜PMN的遷移、細(xì)胞因子的相互作用、NF-κB、促進(jìn)炎癥因子的表達(dá)等多種因素有關(guān)。有研究表明，S100A8和S100A9在介導(dǎo)氣道上皮炎癥、肺損傷、血栓、缺血性腦損傷等方面均有作用[7]，多項(xiàng)研究顯示S100A8、S100A9、S100A12這3種蛋白參與炎癥反應(yīng)，尤其是S100A8蛋白[8]。體外研究顯示，S100A8能夠在特定條件下刺激炎癥細(xì)胞釋放炎癥蛋白和炎癥介質(zhì)，直接參與炎癥疾病過程[9]。Chang等[10]通過對ARDS患者及健康者進(jìn)行S100A8檢測發(fā)現(xiàn)，與健康者比較，ARDS患者的氣管肺泡灌洗液中S100A8的表達(dá)量明顯增加；Lorenz等[11]也證實(shí)，在成人ARDS患者的支氣管肺泡灌洗液中，S100A12、S100A8及S100A9的水平明顯升高，并提出S100蛋白可能參與了呼吸道的炎癥。在慢性肺病纖維化患者的血清中及肺部感染性疾病中有一種高表達(dá)的抗原蛋白，并證實(shí)其為S100A8/S100A9蛋白[12]。有學(xué)者提出，血清中S100A8及S100A9水平可作為肺部病變的標(biāo)志物[13],由此可見S100A8及S100A9蛋白可能通過不同的機(jī)制參與了ALI的發(fā)病過程。

本研究發(fā)現(xiàn)，在新生兒ALI發(fā)病第1天，血清S100A8蛋白明顯升高，第3天時(shí)逐漸下降，第7天時(shí)明顯下降，濕肺組及對照組血清中S100A8蛋白無明顯升高，而ALI組S100A9蛋白在第3天升高較為明顯，第7天時(shí)下降，同樣在濕肺組雖有升高，但與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示S100A8、S100A9在ALI的形成過程中不同時(shí)間的表達(dá)高峰不同，S100A8蛋白表達(dá)較早，提示此兩項(xiàng)指標(biāo)可能在ALI發(fā)病過程中起著不同的作用。在ALI的發(fā)病機(jī)制及檢測指標(biāo)尚不完善的情況下，通過檢測新生兒ALI血漿S100A8、S100A9蛋白水平，對臨床上早期干預(yù)具有重要的指導(dǎo)意義，為今后開展S100蛋白受體拮抗劑、治療ALI提供理論依據(jù)，但因本研究樣本數(shù)偏少，還需今后進(jìn)行多中心、大樣本的臨床試驗(yàn)進(jìn)一步明確S100蛋白的臨床價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]Flori HR，Glidden DV，Rutherford GW，et al．Pediatric acute lung injury：prospective evaluation of risk factors associated with mortality[J].Am J Respir Crit Care Med，2005，171(9)：995-1001．

[2]PhuaJ，BadiaJR，AdhikariNK，etal．Has

mortality from acute respiratory distress syndrome decreased over time?:A systematic review[J]．Am J Respir Crit Care Med，2009，179(3)：220-227．

[3]李華強(qiáng)．新生兒急性肺損傷中幾個(gè)問題的思考[J] ．中國新生兒科雜志，2011，26(1)：5-9．

[4]Gortner L，M?ller J，Reiss I，et al．ARDS/ALI in childhood：treatment guideline[J]．Klin Padiatr，2011，223(7)：440-444．

[5]邵肖梅，葉鴻瑁，邱小汕.實(shí)用新生兒學(xué)[M].4版，北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：393-395

[6]Sürmeli-Onay O，Korkmaz A，Yigit S，et al．Surfactant therapy in late preterm infants：respiratory distress syndrome and beyond[J]．Turk J Pediatr，2012，54(3)：239-246．

[7]Goyette J，Geczy CL．Inflammation-associated S100 proteins：new mechanisms that regulate function[J]．Amino Acids，2011，41(4)：821-842．

[8]Halayko AJ，Ghavami S．S100A8/A9：a mediator of severe asthma pathogenesis and morbidity?[J].Can J Physiol Pharmacol，2009，87(10)：743-755．

[9]Katano M,Okamoto K,Suematsu N,et al.Increased expression of S100 calcium binding protein A8 in GM-CSF-stimulated neutrophils leads to the increased expressions of IL-8 and IL-16[J].Clin Exp Rheumatol,2011,29(5):768-775.

[10]Chang DW，Hayashi S，Gharib SA，et al．Proteomic and computational analysis of bronchoalveolar proteins during the course of the acute respiratory distress syndrome[J].Am J Respir Crit Care Med,2008，178(7)：701-709．

[11]Lorenz E，Muhlebach MS，Tessier PA，et al．Different expression ratio of S100A8/S100A9 and S100A12 in acute and chronic lung diseases[J].Respiratory medicine，2008，102(4)：567-573.

[12]Zhao J，Endoh I，Hsu K，et al．S100A8 modulates mast cell function and suppresses eosinophil migration in acute asthma[J].Antioxid Redox Signal，2011，14(9)：1589-1600．

[13]Van Bon L，Cossu M，Loof A，et al.Proteomic analysis of plasma： indentifies the Toll-like receptor agonists S100A8/A9 as a novel possible marker for systemic sclerosis phenotype[J]．Ann Rheum Dis，2014，73(8)：1585-1589．

Dynamic changes and clinical significance of serum S100A8 and S100A9 protein in newborns with acute lung injury

YinQigai,HaoLi,YangHaiyan,MiaoLi

(DepartmentofNeonatalogy,AffiliatedLianyungangMunicipalFirstPeople′sHospital,XuzhouMedicalCollege,Lianyungang,Jiangsu222000,China)

[Abstract]ObjectiveTo study the dynamic changes of serum S100A8 and S100A9 protein in newborns with acute lung injury(ALI).MethodsThirty newborns with ALI(ALI group) were enrolled in this study,30 newborns with wet lung(wet lung group) and 30 healthy newborns(control group) were selected.The changes of serum S100A8 and S100A9 protein levels were detected by the enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsThe levels of serum S100A8 and S100A9 protein on 1,3,7 d after ALI onset in the ALI group were significantly higher than those in the wet lung group and the control group,the difference was statistically significant(P<0.01).The increase of serum S100A8 protein level in the ALI group was most significant on 1 d after onset[(187.29.±29.71)pg/mL],while which of serum S100A9 was most obvious on 3 d after onset[(280.01±42.29 )pg/mL],the differences were statistically significant (P<0.01),both were decreased to some extent on 7 d.The serum S100A8 and S100A9 protein levels in the wet lung group were higher than those in the control group without statistical difference (P>0.05)．ConclusionS100A8 and S100A9 protein are involved in the pathogenesis of ALI，which have certain potentially clinical application value in the early diagnosis,treatment and prognosis of ALI．

[Key words]infant,newborn；acute lung injury；S100A8 protein;S100A9 protein

作者簡介：殷其改(1973-)，副主任醫(yī)師，碩士研究生，主要從事新生兒腦損傷研究。

doi:論著·臨床研究10.3969/j.issn.1671-8348.2016.04.020

[中圖分類號]R722.12

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1671-8348(2016)04-0490-02

(收稿日期：2015-08-08修回日期：2015-10-16)