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        蒙藥多糖的研究進(jìn)展

        2016-06-14 16:36:26趙玉英內(nèi)蒙古民族大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院內(nèi)蒙古通遼028000
        山東工業(yè)技術(shù) 2016年10期
        關(guān)鍵詞:單糖酶法蒙藥

        黎 明,趙玉英(內(nèi)蒙古民族大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院,內(nèi)蒙古 通遼 028000)

        蒙藥多糖的研究進(jìn)展

        黎明,趙玉英
        (內(nèi)蒙古民族大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,內(nèi)蒙古通遼028000)

        本文綜述了蒙藥中多糖類成分的提取方法,含量測定方法及其生物活性等。通過對這些提取方法、測定手段與生物活性進(jìn)行綜合性的論述與分析,對其發(fā)展進(jìn)行了展望,為開發(fā)利用蒙藥多糖提供一定的科學(xué)借鑒依據(jù)。

        蒙藥;多糖;研究進(jìn)展

        0 前言

        研究表明,從蒙藥中提取的多糖類成分具有抗腫瘤、抗氧化、抗輻射、降血脂、降血糖及增強免疫力等生理活性;所以從蒙藥中提取出多糖類成分及測定其含量對蒙藥開發(fā)利用有著十分重要的意義。本文介紹了近年來蒙藥中多糖類成分的提取方法及含量測定方法,并對蒙藥多糖的生理活性進(jìn)行了綜述,以作為今后的研究提供有效的科學(xué)依據(jù)。

        1 蒙藥中多糖的提取方法

        1.1水提醇沉法

        多糖是極性較大的高分子化合物,提取溶劑選擇水是因為水的極性較強。用水作為溶劑提取多糖時,將提取液濃縮,加入乙醇,使多糖從提取液中沉出。用水提醇沉法,提取蒙藥水溶性多糖的研究報道很多[1-2]。影響多糖提取效率的因素有:用水量、提取溫度、提取時間、提取次數(shù)等,可通過優(yōu)化工藝條件來提高多糖的提取率。

        1.2酸提法

        酸提法是將蒙藥粉末與稀酸溶液混合,在一定溫度下提取數(shù)小時后過濾,取濾液濃縮,并加入一定量乙醇,所得沉淀即為酸提多糖[3-4]。由于溶液中的H+抑制了酸溶性雜質(zhì)的溶出,酸提法得到的多糖化合物純度較高,但在酸性條件下會引起多糖中糖苷鍵的斷裂,導(dǎo)致多糖提取率下降,所以運用酸提法提取蒙藥多糖時,一定要控制好酸度和溫度。

        1.3醇堿提取法

        醇堿提取法是一種新興的多糖提取方法。該法是按照一定的比例向樣品中加入碳酸鈉-乙醇溶液,在一定溫度下提取,將提液過濾,濃縮,最后用乙醇沉淀來獲得多糖[5]。醇堿提取法殘渣中多糖的殘留量較低,提取效果較好,在實際生產(chǎn)中有著廣闊的應(yīng)用前景。

        1.4酶提取法

        酶法是通過酶促反應(yīng),加速蒙藥中有效成分的釋放,使多糖的提取率增加。酶法分為單一酶法和復(fù)合酶法。酶法具有條件溫和[6]、易于去除雜質(zhì)、回收率高和節(jié)能等優(yōu)點,因此酶法提取蒙藥多糖的應(yīng)用前景十分廣闊。由于酶具有專一性和選擇性的特點,應(yīng)用時多采用復(fù)合酶。

        1.5超聲提取法

        超聲提取法是利用超聲波對有機大分子的破壞能力,加快多糖的析出,從而提高提取效率,縮短提取時間,利用超聲波提取了廣棗、黑木耳、花生、阿爾泰狗娃花等多糖。超聲提取法是一種實用高效的提取方法。

        1.6微波取法

        微波提取法的原理是當(dāng)微波透過細(xì)胞壁作用到細(xì)胞內(nèi)部時,能量被細(xì)胞吸收,使細(xì)胞內(nèi)壓力超過了細(xì)胞壁的承受能力,細(xì)胞壁迅速破裂形成微孔,使細(xì)胞內(nèi)的多糖釋放到溶液中。高岐已用微波法提取了廣棗中多糖。

        2 蒙藥中多糖含量的測定方法

        2.1比色法(分光光度法)

        比色法使用歷史悠久,目前已廣泛應(yīng)用于多糖含量測定,特別是苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法應(yīng)用最廣。

        (1)苯酚-硫酸法的基本原理是利用糖類在濃硫酸作用下,水解生成糠醛或其衍生物,可與苯酚試劑縮合產(chǎn)生顏色物質(zhì),于480~490 nm處有特征吸收,其顏色深淺與糖的濃度成線性關(guān)系[7],該方法被廣泛使用。

        (2)蒽酮-硫酸法測定多糖含量是利用多糖在濃硫酸作用下,水解生成單糖,并可以脫水生成羥甲基糠醛,羥甲基糠醛與蒽酮絡(luò)合成藍(lán)色化合物,其顏色深淺與糖的濃度成線性關(guān)系。利用蒽酮-硫酸法測定蒙藥驢耳風(fēng)毛菊多糖的含量和蒙藥蕁麻多糖的含量[8]。

        比色法用于測定多糖含量簡單易行,且重復(fù)性、精密度、回收率等均非常好。

        2.2滴定法

        滴定法原理是利用多糖能水解成具有還原性,然后直接進(jìn)行還原滴定。采用多糖經(jīng)乙醇沉淀分離后,加酸、加熱水解成單糖,以次甲基藍(lán)作指示劑,滴定經(jīng)標(biāo)定過的堿性酒石酸銅溶液,根據(jù)樣液消耗的體積,計算其含量。此方法快速,不需精密儀器,對所有多糖均可適用。

        2.3高效液相色譜法(HPLC法)

        HPLC法測定多糖的各組分單糖含量,各單糖含量之和為總糖含量。HPLC還可以測定多糖的分子量分布情況。HPLC法有分析速度快,分離效能好、選擇性強、靈敏度高等方面的優(yōu)點。

        2.4氣相色譜法(GC法)

        GC法可定性、定量分析多糖的組分及含量,一般是將多糖酸水解后衍生物法以增加其揮發(fā)性,來測定多糖的各組分單糖含量,各單糖含量之和為總糖含量。

        3 蒙藥多糖的活性

        蒙藥多糖主要應(yīng)用于抗腫瘤、抗凝血、抗病毒、抗氧化、抗輻射、降血脂、降糖及增強免疫力等方面。

        3.1增強免疫力

        研究表明,目前發(fā)現(xiàn)的大多蒙藥多糖類成分都具有一定的免疫調(diào)節(jié)活性,是一類非特異性的免疫調(diào)節(jié)劑。大量藥理實驗證明,多糖不僅能激活T、B淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK)、細(xì)胞病毒T淋巴細(xì)胞(CTL)和樹突狀細(xì)胞(DC)等免疫細(xì)胞,還能促進(jìn)細(xì)胞的生成和抗體的生成,對免疫系統(tǒng)發(fā)揮多方面的調(diào)節(jié)作用。

        3.2抗腫瘤作用

        抗腫瘤活性是目前分離鑒定的大部分多糖都具有的活性之一。多糖成分發(fā)揮抗腫瘤作用的途徑主要是通過調(diào)節(jié)或提高機體免疫能力,與抗癌劑或化療藥合用,影響癌基因的表達(dá)而起到抗腫瘤作用。

        3.3降血糖作用

        糖尿病是當(dāng)前危害人類尤其是中老年人身體健康的主要頑癥之一,被冠為“沉默的殺手”是由于體內(nèi)胰島素分泌不足造成的以糖、脂肪,蛋白質(zhì)等代謝紊亂為主的內(nèi)分泌性疾病。大部分蒙藥多糖對高血糖的小鼠都有降血糖的作用。

        3.4抗氧化、抗衰老作用

        蒙藥多糖具有清除羥基自由基和超氧陰離子自由基的能力,從而起到抗氧化作用。且其清除能力與多糖的濃度存在一定的量效關(guān)系。多糖還可促使腦神經(jīng)的修復(fù),改善機體氧化相關(guān)代謝酶的活性,從而起到抗衰老作用。

        3.5其他活性

        蒙藥多糖除了上述的幾種活性還存在抗凝血、抗病毒、抗輻射、降血脂等生理活性。在未來的研究中,有關(guān)多糖的活性尤其是作用機制、構(gòu)效關(guān)系等方面的研究仍然是多糖研究的熱點和趨勢,圍繞多糖展開的新蒙藥開發(fā)仍然具有巨大的潛力。

        4 綜合分析

        4.1多糖提取方法綜合分析

        蒙藥多糖的提取方法由不同藥材而定,一般常規(guī)法中的水提法不易破壞生物活性提取率較高[1-2]。根據(jù)不同的用途和活性選擇酸提法、堿提法,菌類藥物用酸提法,如從香菇提取出多糖成分。選擇酸提法、堿提法時控制酸度和溫度非常重要。此外,超聲波提取法經(jīng)常和其他提取方法協(xié)同使用。微波提取法經(jīng)常和酶提取法協(xié)同使用。將微波提取技術(shù)應(yīng)用到蒙藥中多糖的提取,提高了多糖提取率,但是此方法耗能大,會破壞多糖結(jié)構(gòu),阻礙了蒙藥中多糖的提取。綜上所述,蒙藥多糖的提取方法,如何選擇應(yīng)根據(jù)藥材所含多糖活性及其它化學(xué)成分的性質(zhì)而定。

        4.2多糖含量測定方法分析

        多糖含量的測定方法各有優(yōu)缺點,可見分光光度法的儀器價廉,操作簡單,但只能測定多糖總含量。HPLC法不但能測總糖含量,還能測定多糖的各組分單糖的種類和含量,HPLC法有分析速度快,分離效能好、選擇性強、靈敏度高等方面的優(yōu)點。GC法能測定多糖的各組分單糖含量,其各單糖含量之和為總糖含量,該方法衍生化難度大。多糖含量測定方法經(jīng)常使用比色法。

        4.3多糖生物活性綜合分析與展望

        多糖不但應(yīng)用于抗腫瘤、抗凝血、抗病毒、抗氧化、抗輻射、降血脂、降糖及增強免疫力等方面。還在食品方面、化工方面、材料方面的也有潛在的應(yīng)用價值。

        [1]劉齊,楊芳,杜萍等.三種方法對板栗殼多糖提取的比較[J].食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報,2013,3(05).

        [2]習(xí)楠,康佳等.不同提取條件下黃芪莖葉與根中多糖含量的比較分析[J].中獸醫(yī)學(xué)雜志,2013,172(03).

        [3]許燕燕.植物多糖的提取方法和工藝[J].福建水產(chǎn),2006,25(03)[4]徐曄,劉濤.蒙藥廣棗酚酸類化學(xué)成分的研究[J].北方藥學(xué),2012(07).

        [5]田洛,范榮軍等.醇堿提取法提取黃芪多糖[J].吉林大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版),2006(04).

        [6]鄭靜,林英等.超聲波法和超聲波酶法提取靈芝多糖的條件研究[J].食用菌學(xué)報,2006,13(01).

        [7]項朋志,劉麗梅,貝玉祥等.訶子多糖的提取及其抗氧化活性研究[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2009(02).

        [8]徐懷德,秦盛華.超聲波輔助提取光皮木瓜多糖及其體外抗氧化性研究[J].食品科學(xué),2010(10).

        10.16640/j.cnki.37-1222/t.2016.10.240

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