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        一品紅帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究

        2016-06-13 02:44:44邱利文

        邱利文

        長(zhǎng)江大學(xué)園藝園林學(xué)院,湖北 荊州 434025;長(zhǎng)江三峽生態(tài)園林有限公司,湖北 宜昌 443000

        劉樂(lè)承

        (長(zhǎng)江大學(xué)園藝園林學(xué)院,湖北 荊州 434025)

        張國(guó)禹,黃桂云

        (長(zhǎng)江三峽生態(tài)園林有限公司,湖北 宜昌 443000)

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        一品紅帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究

        邱利文

        長(zhǎng)江大學(xué)園藝園林學(xué)院,湖北 荊州 434025;長(zhǎng)江三峽生態(tài)園林有限公司,湖北 宜昌 443000

        劉樂(lè)承

        (長(zhǎng)江大學(xué)園藝園林學(xué)院,湖北 荊州 434025)

        張國(guó)禹,黃桂云

        (長(zhǎng)江三峽生態(tài)園林有限公司,湖北 宜昌 443000)

        [摘要]以矮生一品紅(Euphorbia pucherima)“天鵝絨”的帶芽莖段為外植體,研究了影響叢生芽誘導(dǎo)的組培的主要因素。結(jié)果表明:適合帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L+活性炭Ac 0.3%+瓊脂6.5g/L+蔗糖30g/L pH為5.8,萌芽率高達(dá)93.3%,有效芽數(shù)2~3個(gè),芽長(zhǎng)平均2.7cm。

        [關(guān)鍵詞]一品紅(Euphorbia pucherima);帶芽莖段;叢生芽

        一品紅(Euphorbiapucherima)又稱圣誕紅、象牙紅、老來(lái)嬌,是大戟科大戟屬常綠、半常綠灌木,原產(chǎn)墨西哥和熱帶非洲,是世界著名的觀賞花卉之一[1],我國(guó)各地均有栽培。一品紅花期適逢圣誕節(jié)、元旦、春節(jié),且花色艷麗,是理想的冬季室內(nèi)擺放裝飾的節(jié)日用花。目前,市場(chǎng)需求較多的為近年從國(guó)外引進(jìn)的一些矮生優(yōu)良品種,其株高約為30~50cm,株型緊湊,分株多,苞片大,苞片顏色種類多,耐低溫能力強(qiáng),不易掉葉,連續(xù)多年在我國(guó)花卉市場(chǎng)上暢銷且供不應(yīng)求,深受人們的青睞[2]。由于一品紅結(jié)籽少,尤其是一些觀賞價(jià)值較高的矮化、重瓣品種基本不結(jié)實(shí),所以,目前園藝生產(chǎn)上多采用綠枝扦插繁殖,但由于其體內(nèi)含有豐富的白色乳汁,干后呈膠膜狀,造成導(dǎo)管吸水不良,導(dǎo)致扦插繁殖速度慢,且莖段易腐爛,大大降低了一品紅扦插苗成活率,而且得到的插穗苗質(zhì)量不能均勻一致。一些優(yōu)良品種由于枝條少,引進(jìn)初期數(shù)量有限,也在一定程度上限制了優(yōu)良品種的繁殖及普及。若能利用組培方法實(shí)現(xiàn)快速繁殖,則可在短期內(nèi)大量繁殖種苗,帶來(lái)較高的經(jīng)濟(jì)利益[1~3]。目前,一品紅的盆栽越來(lái)越受到業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注,繁殖方法上主要采用一品紅莖段、葉柄、嫩芽等培育出了一品紅的胚狀體或不定芽,但這樣獲得的種苗遺傳性不穩(wěn)定,不能更好地保留母本的優(yōu)良特性[1~6],而利用帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽的組培方法培育出的幼苗遺傳特性較好,能更好地保留母本的優(yōu)良特性。為此,本研究探討了帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽不同分裂素與生長(zhǎng)素的激素組合的影響,這對(duì)一品紅快速繁育及工廠化育苗具有重要意義。

        1材料與方法

        本研究于2011年3月至2012年6月在三峽苗圃研究中心組培實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。組培室內(nèi)溫度為(24±2)℃,濕度為(65±5)%,光照強(qiáng)度為1800~2500lx,光照時(shí)間為13h。

        1.1試驗(yàn)材料

        供試材料選自三峽苗圃研究中心溫室內(nèi)生長(zhǎng)健壯二年生苗,其品種為“天鵝絨”,在采集外植體前10d對(duì)一品紅盆栽苗施用水溶性水肥(N︰P2O5︰K2O為20︰10︰20)500倍液。選取健壯無(wú)病蟲(chóng)害幼嫩的帶芽莖段為外植體,將外植體剪成長(zhǎng)1.0~1.5cm,去除葉片待用。

        1.2試驗(yàn)方法

        1.2.1外植體處理

        將剪好的外植體先用洗衣粉溶液1000倍液浸泡5min,再用流水沖洗30min,涼干后待用。在接種室超凈工作臺(tái)上將預(yù)處理好的外植體用75%酒精消毒30s,然后用無(wú)菌水沖洗3次,再用0.1%HgCl2消毒12min,用無(wú)菌水沖洗5次,分別接種于基本培養(yǎng)基MS+活性炭Ac0.3%+激素組合+瓊脂6.5g/L+蔗糖30g/L、pH為5.6的叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

        1.2.2誘導(dǎo)帶芽莖段定芽萌發(fā)叢生芽

        表1 因素水平設(shè)計(jì)表

        表2 L8(4×24)正交表

        試驗(yàn)采用三因素混合正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),因素水平詳見(jiàn)表1,L8(4×24)正交設(shè)計(jì)見(jiàn)表2,共8個(gè)處理,添加6-BA、2.4-D、NAA不同濃度組合,求得帶芽莖段定芽萌發(fā)叢生芽的最優(yōu)配方。將外植體剪成1.0~1.5cm帶芽的莖段,每瓶接種3個(gè),試驗(yàn)重復(fù)3次,接種7d開(kāi)始,每隔10d調(diào)查1次芽的萌發(fā)、生長(zhǎng)數(shù)量及芽長(zhǎng),40~50d后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,得出最優(yōu)組合,并將最優(yōu)組合再在實(shí)驗(yàn)中檢驗(yàn)。

        1.2.3數(shù)據(jù)的觀測(cè)與處理

        試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,百分率的數(shù)據(jù)先經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析和多重比較。

        2結(jié)果與分析

        2.1萌芽率

        方差分析表明:6-BA、生長(zhǎng)素種類分別對(duì)外植體萌芽率有極顯著和顯著的影響,而生長(zhǎng)素濃度對(duì)外植體萌芽率無(wú)顯著的影響。多重比較結(jié)果(表3)表明:6-BA濃度1.2mg/L萌芽率最高達(dá)64.97%,極顯著地高于其他3個(gè)濃度的萌芽率;多重比較結(jié)果(表4)表明:激素種類NAA的萌芽率達(dá)58.38%,顯著地高于2.4-D的萌芽率,理論上推測(cè)激素組合為6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05~0.10mg/L。試驗(yàn)盡管沒(méi)有考慮因素之間的交互作用,但并不能排除相互作用,故進(jìn)一步作組合間的多重比較表5,結(jié)果表明激素組合配方P6萌芽率顯著高于P1、P2、P3、P4、P5、P7、P8,萌芽率以配方組合P6(6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L)較好(圖1a)。

        表3 6-BA濃度水平間的多重比較

        注:表中同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示在5%水平上差異顯著,不同大寫字母表示在1%水平差異顯著。表4、表5同。

        表4 生長(zhǎng)素種類間的多重比較

        表5 組合間的多重比較

        圖1 一品紅帶芽莖段叢生芽誘導(dǎo)

        2.2有效芽數(shù)

        方差分析表明:6-BA對(duì)外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)有顯著的影響,而生長(zhǎng)素種類和濃度對(duì)外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)無(wú)顯著的影響。多重比較結(jié)果(表3)說(shuō)明:6-BA濃度1.2mg/L外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)平均達(dá)3.0個(gè),顯著地高于其他3個(gè)濃度的有效芽數(shù),理論上推測(cè)激素組合為6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05~0.10mg/L或6-BA 1.2mg/L+2.4-D 0.05~0.10mg/L。試驗(yàn)盡管沒(méi)有考慮因素之間的交互作用,但并不能排除相互作用,故進(jìn)一步作組合間的多重比較表5,結(jié)果表明激素組合配方P5、P6有效芽數(shù)顯著高于P1、P2、P3、P4、P7、P8,有效芽數(shù)以配方組合P6(6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L和6-BA 1.2mg/L,2.4-D 0.1mg/L)較好(圖1b)。

        2.3芽長(zhǎng)

        方差分析表明:6-BA對(duì)外植體萌發(fā)的芽長(zhǎng)有顯著的影響,而生長(zhǎng)素種類和濃度對(duì)外植體萌發(fā)的有效芽數(shù)無(wú)顯著的影響。多重比較結(jié)果(表3)表明:6-BA濃度1.2mg/L外植體萌發(fā)芽長(zhǎng)平均達(dá)1.9cm,顯著地高于其他3個(gè)濃度的萌發(fā)芽長(zhǎng),理論上推測(cè)激素組合為6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05~0.10mg/L或6-BA 1.2mg/L+2.4-D 0.05~0.10mg/L。試驗(yàn)盡管沒(méi)有考慮因素之間的交互作用,但并不能排除相互作用,故進(jìn)一步作組合間的多重比較表5,結(jié)果表明激素組合配方P5、P6芽長(zhǎng)顯著高于P1、P2、P3、P4、P7、P8,萌發(fā)的芽長(zhǎng)以配方組合P6(6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L和6-BA 1.2mg/L,2.4-D 0.1mg/L)較好(圖1c)。

        由此可見(jiàn),以萌芽率為主要指標(biāo),同時(shí)參考有效芽數(shù)和芽長(zhǎng),且生長(zhǎng)勢(shì)表現(xiàn)較佳,一品紅莖段誘導(dǎo)叢生芽以激素組合6-BA 1.2mg/L+NAA 0.05mg/L較好。

        3討論

        1)在一品紅帶芽莖段組培研究中,植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的研究多集中外源激素的使用上,如在叢生芽增殖研究中主要研究是的細(xì)胞分裂素,外植體愈傷組織的誘導(dǎo)方面,使用較高濃度生長(zhǎng)素,以誘導(dǎo)脫分化和促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)[4],在帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽中應(yīng)重點(diǎn)研究生長(zhǎng)素與分裂素的用量,調(diào)整6-BA與NAA添加的比例,促進(jìn)帶芽莖段定芽萌發(fā)叢生芽的萌芽率,有利于有效芽分化,促進(jìn)芽生長(zhǎng)。

        2)在一品紅組織培養(yǎng)中,應(yīng)注意選擇適宜的外植體和合理的消毒時(shí)間,以帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生芽較容易獲得無(wú)菌苗,有利于優(yōu)良品種的推廣,但同一種品種不同部位帶芽莖段定芽誘導(dǎo)叢生發(fā)生的能力的大小有待進(jìn)一步研究。

        [參考文獻(xiàn)]

        [1]顧敏燕,孫莉,鄭淑萍.一品紅組培快繁及配套移栽技術(shù)研究[J].農(nóng)業(yè)科技通訊,2014,(7):160~162.

        [2]邵元健,周蔣陳.一品紅組織培養(yǎng)研究[J].北方園藝,2012,(2):127~129.

        [3]郭海濱,張?zhí)旖?,王曉?一品紅組培苗快繁技術(shù)的研究[J].甘肅農(nóng)業(yè)科技,2011,(5):16~18.

        [4]張穎,王曉立.一品紅組培養(yǎng)研究[J].北方園藝,2011,(24):155~157.

        [5]石峰.一品紅組培技術(shù)研究[J].遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,(5):57.

        [6]張立磊,崔惠,楊和連.一品紅組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)研究[J].廣西園藝,2004,5(3):2~3.

        [收稿日期]2015-10-14

        [作者簡(jiǎn)介]邱利文(1981-),男,碩士生,研究方向?yàn)槿龒{庫(kù)區(qū)特有珍稀植物保護(hù)與繁育。通信作者:劉樂(lè)承, lchliu18@yangtzeu.edu.cn。

        [中圖分類號(hào)]Q813;Q949.753.5

        [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

        [文章編號(hào)]1673-1409(2016)03-0033-04

        [引著格式]邱利文,劉樂(lè)承,張國(guó)禹,等.一品紅帶芽莖段誘導(dǎo)叢生芽的研究[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版) ,2016,13(3):34~36.

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