徐 佳，劉愛寧，嚴霜紅

(江南大學附屬醫(yī)院，江蘇 無錫 214062)

血清TGF-β1和VEGF水平判定吉西他濱聯(lián)合卡鉑治療非小細胞肺癌患者反應性臨床研究*

徐 佳，劉愛寧，嚴霜紅

(江南大學附屬醫(yī)院，江蘇 無錫 214062)

摘 要:目的:探討TGF-β1和VEGF是否可以作為非小細胞肺癌(NSCLC)患者化療后對藥物反應性的生物學標志。方法:選取我院2012年4月至2014年4月收治的58例NSCLC患者作為NSCLC組，同期健康志愿者60名為對照組。NSCLC組吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療2個療程，化療前后酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法檢測血清中TGF-β1和VEGF水平，同時在化療結束后評價臨床療效。結果:NSCLC組患者治療前的血清TGF-β1和VEGF水平明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0. 05)；化療后，CR+PR組患者血清TGF-β1和VEGF水平較化療前明顯降低，相反，化療后SD+PD組患者血清TGF-β1和VEGF水平較化療前明顯升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論:非小細胞肺book=56,ebook=60癌患者血清中TGF-β1和VEGF水平升高，且治療后TGF-β1和VEGF變化能反映患者對吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療的反應性。

關鍵詞:轉化生長因子β1； 血管內(nèi)皮生長因子； 非小細胞肺癌； 化 療

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和致死率呈逐年上升的趨勢，據(jù)統(tǒng)計，全球惡性腫瘤患者中約13%的患者為肺癌[1]。本文通過檢測患者在吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療前后血清TGF-β1和VEGF水平，評估TGF-β1和VEGF水平變化是否可以作為判定患者對吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療的反應性。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院2012年4月至2014年4月收治的58例非小細胞肺癌(NSCLC)患者作為NSCLC組，同時間段內(nèi)選取60名健康志愿者納入對照組。58 例NSCLC患者中女性患者17例，男性患者41例，平均年齡為57±2.7歲；對照組中女性21例，男性39例，平均年齡56±2.4歲。納入研究的NSCLC患者符合以下標準:①組織學或病理診斷證實為非小細胞肺癌以及卡氏評分≥70分；②肝腎及血液功能正常；③心電圖顯示心功能正常。NSCLC組排除標準為:①NSCLC并發(fā)其它內(nèi)科疾病或腎結石的患者；②患有除NSCLC意外的其它腫瘤的患者；③NSCLC并發(fā)風濕及免疫性疾病、血管栓塞疾病、血液凝固障礙或其它心血管疾病患者；④臨床和病理資料不完整的患者；⑤懷孕和哺乳期婦女。60名入選的健康志愿者為我院體檢中心體檢的健康人員，所有健康受試者無任何肺部疾病。

1.2治療方法:所有NSCLC組患者采用吉西他濱聯(lián)合卡鉑進行化療，吉西他濱(gemcitabine，GEM，200mg/支，江蘇豪森制藥有限公司，批號:120210)1250mg/ m2加入250mL生理鹽水中，靜脈滴注，1次/ d，8d為1個療程，卡鉑Carboplatin，100mg/支，齊魯制藥，批號: 1110112ES)300mg/ m2加入250mL生理鹽水中，靜脈滴注，1次/ d，21d為一個療程，所有患者治療2個療程。

1.3血清TGF-β1和VEGF水平的檢測:在NSCLC組患者治療的前1d和2個療程治療結束后取患者隔夜空腹的血液3mL，同時取60名健康受試者的隔夜空腹外周血液3mL。將收集的血液樣品3500rpm/ s離心5min，將分離的血清置于-20℃冰箱冷藏待下一步的檢測。TGF-β1和VEGF濃度采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELSIA)檢測(ELSIA試劑盒購自上海嵐派生物公司)。檢測過方法參照文獻[3]進行。根據(jù)標準曲線計算所測各樣品的濃度值。每個標準品和空白孔以及樣品孔均做復孔。

1.4化療后療效的評估:NSCLC組患者2個療程結束后的1周行肺部CT掃描檢查，根據(jù)文獻[6]制定實體瘤療效評價標準進行評價:①完全緩解(CR):所有已知病灶消失；②部分緩解(PR):已知病灶線性測量面積減少≥30%；③病情穩(wěn)定(SD):已知病灶線性測量面積減少＜30%或增加＜20%；④病情進展(PD):已知病灶和新病灶增加＞20%?；熀笥行镃R+PR，無效為SD+PD。

1.5統(tǒng)計學方法:應用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用配對樣本的t檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1NSCLC患者化療前血清TGF-β1和VEGF水平: 58例NSCLC患者化療前檢測的血清TGF -β1和VEGF水平在不同性別、年齡、病理類型間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，但在不同臨床分期間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1　58例NSCLC患者化療前血清TGF-β1和VEGF水平(±s)

表1　58例NSCLC患者化療前血清TGF-β1和VEGF水平(±s)

項目　例數(shù)　TGF-β1(ng/ mL)　t　p　VEGF(pg/ mL)　t　p性別　男　41　41.19±10.84　1.01　0.158　246.8±52.7　1.0599　0.1468 女17　38.16±9.71　263.1±54.8年齡　≤70　39　39.91±9.15　0.329　0.3716　249.7±50.8　0.4147　0.3399 ＞70　19　40.79±10.37　255.7±53.6病理類型　鱗狀細胞癌　26　37.98±9.42　1.4248　0.0798　256.2±51.7　0.5322　0.2983腺癌　32　42.06±11.87　248.9±49.3臨床分期?、瘛ⅱ颉?0　36.83±8.49　3.817　0.0001　243.5±48.6　1.9764　0.026Ⅲ、Ⅳ　18　47.92±13.41　269.9±51.4

2.2NSCLC患者化療前與健康受試者血清TGF-β1 和VEGF水平比較:58例NSCLC患者化療前檢測的血清TGF-β1和VEGF水平明顯高于健康受試者，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2　58例NSCLC患者化療前與健康受試者血清TGF-β1和VEGF水平比較

2.3NSCLC患者化療前后血清TGF-β1和VEGF水平變化:對58例化療的NSCLC患者進行療效評價，其中CR為0，PR63.79%(37/58)，SD20.69%(12/58)，PD(9/58) 15. 52%，臨床有效(CR + PR) 37例(63. 79%)，臨床無效(SD+PD)21例(36.21%)。聯(lián)合方案化療后有效(CR+PR)的患者血清TGF-β1和VEGF水平明顯較化療前降低，差異顯著(P＜0.05)。相反，聯(lián)合方案化療后無效(SD+PD)的患者血清TGF-β1 和VEGF水平明顯較化療前升高，差異顯著(P＜0. 05)，見表3。

表3　58例NSCLC患者化療前后血清TGF-β1和VEGF水平變化

3 討 論

TGF-β1是一種能夠調(diào)節(jié)細胞生長、分化、免疫抑制和腫瘤生成的多功能細胞因子。有研究表明，腫瘤分泌的TGF-β1能夠促進腫瘤的轉移、血管生成以及免疫逃避等，如乳腺癌及肺癌等[4]。與此研究一致的是，血清TGF-β1高水平的NSCLC患者生存期普遍較差[5]。我們的研究也表明，血清TGF -β1水平在NSCLC患者化療前后均較正常健康人高。正常情況下，TGF-β1和其它組織因子之間的相互抑制處于一個平衡狀態(tài)，然而，當過度表達TGF-β1而打破這個平衡時，那么它的表達就有利于腫瘤的進展。因此，TGF -β1長期過度在腫瘤微環(huán)境中表達將增強腫瘤細胞的侵襲及遷移能力，從而促進腫瘤的轉移。在我們的研究中，聯(lián)合化療方案治療2個療程后，NSCLC有效的患者血清中TGF-β1水平較化療前明顯降低，但是，顯示出抗藥性的無效組NSCLC化療患者血清中TGF-β1水平變化則正好相反。藥物敏感的有效組NSCLC患者血清中TGF-β1水平較化療前明顯降低的原因可能是由于肺部腫瘤病灶的減小，從而導致血液中釋放的TGF-β1減少。相反，抗藥性的無效組NSCLC患者則可能是由于腫瘤的復發(fā)和轉移造成的。

非小細胞肺癌的生長、侵襲和轉移受到腫瘤血管生成的影響，而VEGF則是目前已知的能夠調(diào)控腫瘤血管的生成最強細胞因子之一，VEGF能夠直接促進血管內(nèi)皮細胞增殖的有絲分裂，同時還能參與蛋白的水解以及細胞外基質(zhì)基底膜的降解，從而促進血管內(nèi)皮細胞遷移，為腫瘤新生血管生成提供良好的條件，此外，VEGF還能夠直接作用于腫瘤細胞表面的相應受體，促進腫瘤病灶的生長。我們的研究結果表明，NSCLC患者聯(lián)合方案化療前后血清中VEGF的水平能夠反映出腫瘤對藥物的反應性。這一結果表明，血清中VEGF的水平可以作為生物標志物，反映NSCLC患者對吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療的反應性。藥物敏感的有效組NSCLC患者血清中VEGF水平較化療前明顯降低，其原因可能是腫瘤新生血管減少，導致腫瘤營養(yǎng)和微環(huán)境發(fā)生改變，從而導致腫瘤病灶減小，使腫瘤表達的VEGF減少，釋放入血液中的VEGF也同時減少。相反，抗藥性的無效組NSCLC患者則可能是病情無法得到有效控制，腫瘤進一步惡化導致腫瘤表達的VEGF增多而釋放入血液中，釋放出來的VEGF進入腫瘤微環(huán)境后，通過改造微環(huán)境，如增加各種蛋白酶和腫瘤基質(zhì)降解酶的分泌、促進新生血管的形成等來進一步促進腫瘤的進展，包括發(fā)生遠處的侵襲和轉移。

近年來，利用聯(lián)合化療的方案進行NSCLC的治療已經(jīng)成為一個重要的研究領域。越來越多的研究表明，聯(lián)合化療能有效地抑制腫瘤新生血管的生成，從而能夠有效地抑制腫瘤的生長、侵襲和轉移，達到延長患者生存期的目的。然而，對化療藥物的敏感性降低這又成為了NSCLC治療面臨的難題之一，確定患者在化療時對藥物的反應性，是臨床治療制定化療方案的有效依據(jù)之一。因此尋找反映化療反應性的血液生物學標志物非常重要，本研究使用吉西他濱聯(lián)合卡鉑對NSCLC患者進行2個療程的化療。結果顯示，血清TGF-β1和VEGF水平變化能夠有效的反映聯(lián)合化療方案治療NSCLC的效果，這提示，在NSCLC聯(lián)合化療中，使用血清TGF-β1和VEGF作為血液生物標志物反映患者對藥物的反應性是可行的，可以為制定化療方案提供切實的依據(jù)。

參考文獻:

[1] Wu H，et al. Association between the telomerase reverse transcriptase (TERT) rs2736098 polymorphism and cancer risk: evidence from a case-control study of non-small-cell lung cancer and a meta-analysis[J].PLoS One，2013，8 (11): 763～772.

[2] Aberle D R，et al.Reduced lung-cancer mortality with lowdose computed tomographic screening [ J]. N Engl Med，2011，365(5): 395～409.

[3] 陳潔，茍淑萍，欒文革，等.重組人血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合順鉑治療非小細胞肺癌惡性胸腔積液的療效及對VEGF、HIF-1α腫瘤標志物的影響[J].臨床和實驗醫(yī)學，2014，(21):1778～1780.

[4] 黃永紅.外周血及大腸癌組織TGF-β1含量檢測及臨床意義[J].南方醫(yī)科大學學報，2014，(12):1790～1793.

[5] 盧紅陽.小細胞肺癌腫瘤組織VEGF表達及其與預后的

Serum TGF-β1 and VEGF Levels Predicting Patients Response in Gemcitabine Pluscarboplatin Treating Non-small Cell Lung Cancer

XU Jia，LIU Aining，YAN Shuanghong
(The Affiliated Hospital of Jiangnan University，Jiangsu Wuxi 214062，China)

Abstract:Objective: To investigate whether the serum levels of transforming growth factor beta 1 (TGF-β1) and vascular endothelial growth factor (VEGF) are biomarkers of response to the chemotherapy. Method: A total of 118 subjects were recruited at our hospital between April 2012 and April 2014，including 58 NSCLC patients receiving chemotherapy (gemcitabine plus carboplatin)(NSCLC group) and 60 healthy controls(control group).Serum TGF-β1and VEGF levels were measured before and after chemotherapy using enzyme-linked immunosorbent assay (ELSIA)，and the serum TGF-β1and VEGF levels were measured when undergoing physical medical examination. The clinical efficacy was evaluated after chemotherapy. Result: Compared to control group，the serum TGF-β1and VEGF levels were significantly higher in NSCLC group before chemotherapy(P＜0.05).Importantly，serum TGF-β1and VEGF levels decreased significantly after chemotherapy in CR+PR group in comparison with before chemotherapy(P＜0.05). By contrast，serum TGF-β1and VEGF levels were markedly higher after chemotherapy in the SD+PD group in comparison with before chemotherapy(P＜0.05). Conclusion: The serum TGF-β1and VEGF levels of NSCLC patients were raised，which can show the patients' respense to GC regimen

Key words:TGF-β1； VEGF； NSCLC； Chemotherapy

文獻標識碼:B

doi:10.3969/ j.issn.1006-6233.2016.01.019

文章編號:1006-6233(2016)01-0055-05

*基金項目:江蘇省自然科學基金青年基金項目，(編號:BK2012101)