徐 佳，劉愛寧，嚴(yán)霜紅

(江南大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 無(wú)錫 214062)

血清TGF-β1和VEGF水平判定吉西他濱聯(lián)合卡鉑治療非小細(xì)胞肺癌患者反應(yīng)性臨床研究*

徐 佳，劉愛寧，嚴(yán)霜紅

(江南大學(xué)附屬醫(yī)院，江蘇 無(wú)錫 214062)

摘 要:目的:探討TGF-β1和VEGF是否可以作為非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者化療后對(duì)藥物反應(yīng)性的生物學(xué)標(biāo)志。方法:選取我院2012年4月至2014年4月收治的58例NSCLC患者作為NSCLC組，同期健康志愿者60名為對(duì)照組。NSCLC組吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療2個(gè)療程，化療前后酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清中TGF-β1和VEGF水平，同時(shí)在化療結(jié)束后評(píng)價(jià)臨床療效。結(jié)果:NSCLC組患者治療前的血清TGF-β1和VEGF水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0. 05)；化療后，CR+PR組患者血清TGF-β1和VEGF水平較化療前明顯降低，相反，化療后SD+PD組患者血清TGF-β1和VEGF水平較化療前明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論:非小細(xì)胞肺book=56,ebook=60癌患者血清中TGF-β1和VEGF水平升高，且治療后TGF-β1和VEGF變化能反映患者對(duì)吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療的反應(yīng)性。

關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1； 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子； 非小細(xì)胞肺癌； 化 療

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和致死率呈逐年上升的趨勢(shì)，據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球惡性腫瘤患者中約13%的患者為肺癌[1]。本文通過檢測(cè)患者在吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療前后血清TGF-β1和VEGF水平，評(píng)估TGF-β1和VEGF水平變化是否可以作為判定患者對(duì)吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療的反應(yīng)性。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院2012年4月至2014年4月收治的58例非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者作為NSCLC組，同時(shí)間段內(nèi)選取60名健康志愿者納入對(duì)照組。58 例NSCLC患者中女性患者17例，男性患者41例，平均年齡為57±2.7歲；對(duì)照組中女性21例，男性39例，平均年齡56±2.4歲。納入研究的NSCLC患者符合以下標(biāo)準(zhǔn):①組織學(xué)或病理診斷證實(shí)為非小細(xì)胞肺癌以及卡氏評(píng)分≥70分；②肝腎及血液功能正常；③心電圖顯示心功能正常。NSCLC組排除標(biāo)準(zhǔn)為:①NSCLC并發(fā)其它內(nèi)科疾病或腎結(jié)石的患者；②患有除NSCLC意外的其它腫瘤的患者；③NSCLC并發(fā)風(fēng)濕及免疫性疾病、血管栓塞疾病、血液凝固障礙或其它心血管疾病患者；④臨床和病理資料不完整的患者；⑤懷孕和哺乳期婦女。60名入選的健康志愿者為我院體檢中心體檢的健康人員，所有健康受試者無(wú)任何肺部疾病。

1.2治療方法:所有NSCLC組患者采用吉西他濱聯(lián)合卡鉑進(jìn)行化療，吉西他濱(gemcitabine，GEM，200mg/支，江蘇豪森制藥有限公司，批號(hào):120210)1250mg/ m2加入250mL生理鹽水中，靜脈滴注，1次/ d，8d為1個(gè)療程，卡鉑Carboplatin，100mg/支，齊魯制藥，批號(hào): 1110112ES)300mg/ m2加入250mL生理鹽水中，靜脈滴注，1次/ d，21d為一個(gè)療程，所有患者治療2個(gè)療程。

1.3血清TGF-β1和VEGF水平的檢測(cè):在NSCLC組患者治療的前1d和2個(gè)療程治療結(jié)束后取患者隔夜空腹的血液3mL，同時(shí)取60名健康受試者的隔夜空腹外周血液3mL。將收集的血液樣品3500rpm/ s離心5min，將分離的血清置于-20℃冰箱冷藏待下一步的檢測(cè)。TGF-β1和VEGF濃度采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELSIA)檢測(cè)(ELSIA試劑盒購(gòu)自上海嵐派生物公司)。檢測(cè)過方法參照文獻(xiàn)[3]進(jìn)行。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所測(cè)各樣品的濃度值。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔以及樣品孔均做復(fù)孔。

1.4化療后療效的評(píng)估:NSCLC組患者2個(gè)療程結(jié)束后的1周行肺部CT掃描檢查，根據(jù)文獻(xiàn)[6]制定實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià):①完全緩解(CR):所有已知病灶消失；②部分緩解(PR):已知病灶線性測(cè)量面積減少≥30%；③病情穩(wěn)定(SD):已知病灶線性測(cè)量面積減少＜30%或增加＜20%；④病情進(jìn)展(PD):已知病灶和新病灶增加＞20%?；熀笥行镃R+PR，無(wú)效為SD+PD。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)樣本的t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1NSCLC患者化療前血清TGF-β1和VEGF水平: 58例NSCLC患者化療前檢測(cè)的血清TGF -β1和VEGF水平在不同性別、年齡、病理類型間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但在不同臨床分期間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1　58例NSCLC患者化療前血清TGF-β1和VEGF水平(±s)

表1　58例NSCLC患者化療前血清TGF-β1和VEGF水平(±s)

項(xiàng)目　例數(shù)　TGF-β1(ng/ mL)　t　p　VEGF(pg/ mL)　t　p性別　男　41　41.19±10.84　1.01　0.158　246.8±52.7　1.0599　0.1468 女17　38.16±9.71　263.1±54.8年齡　≤70　39　39.91±9.15　0.329　0.3716　249.7±50.8　0.4147　0.3399 ＞70　19　40.79±10.37　255.7±53.6病理類型　鱗狀細(xì)胞癌　26　37.98±9.42　1.4248　0.0798　256.2±51.7　0.5322　0.2983腺癌　32　42.06±11.87　248.9±49.3臨床分期?、?、Ⅱ　40　36.83±8.49　3.817　0.0001　243.5±48.6　1.9764　0.026Ⅲ、Ⅳ　18　47.92±13.41　269.9±51.4

2.2NSCLC患者化療前與健康受試者血清TGF-β1 和VEGF水平比較:58例NSCLC患者化療前檢測(cè)的血清TGF-β1和VEGF水平明顯高于健康受試者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2　58例NSCLC患者化療前與健康受試者血清TGF-β1和VEGF水平比較

2.3NSCLC患者化療前后血清TGF-β1和VEGF水平變化:對(duì)58例化療的NSCLC患者進(jìn)行療效評(píng)價(jià)，其中CR為0，PR63.79%(37/58)，SD20.69%(12/58)，PD(9/58) 15. 52%，臨床有效(CR + PR) 37例(63. 79%)，臨床無(wú)效(SD+PD)21例(36.21%)。聯(lián)合方案化療后有效(CR+PR)的患者血清TGF-β1和VEGF水平明顯較化療前降低，差異顯著(P＜0.05)。相反，聯(lián)合方案化療后無(wú)效(SD+PD)的患者血清TGF-β1 和VEGF水平明顯較化療前升高，差異顯著(P＜0. 05)，見表3。

表3　58例NSCLC患者化療前后血清TGF-β1和VEGF水平變化

3 討 論

TGF-β1是一種能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、免疫抑制和腫瘤生成的多功能細(xì)胞因子。有研究表明，腫瘤分泌的TGF-β1能夠促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移、血管生成以及免疫逃避等，如乳腺癌及肺癌等[4]。與此研究一致的是，血清TGF-β1高水平的NSCLC患者生存期普遍較差[5]。我們的研究也表明，血清TGF -β1水平在NSCLC患者化療前后均較正常健康人高。正常情況下，TGF-β1和其它組織因子之間的相互抑制處于一個(gè)平衡狀態(tài)，然而，當(dāng)過度表達(dá)TGF-β1而打破這個(gè)平衡時(shí)，那么它的表達(dá)就有利于腫瘤的進(jìn)展。因此，TGF -β1長(zhǎng)期過度在腫瘤微環(huán)境中表達(dá)將增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲及遷移能力，從而促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。在我們的研究中，聯(lián)合化療方案治療2個(gè)療程后，NSCLC有效的患者血清中TGF-β1水平較化療前明顯降低，但是，顯示出抗藥性的無(wú)效組NSCLC化療患者血清中TGF-β1水平變化則正好相反。藥物敏感的有效組NSCLC患者血清中TGF-β1水平較化療前明顯降低的原因可能是由于肺部腫瘤病灶的減小，從而導(dǎo)致血液中釋放的TGF-β1減少。相反，抗藥性的無(wú)效組NSCLC患者則可能是由于腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移造成的。

非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移受到腫瘤血管生成的影響，而VEGF則是目前已知的能夠調(diào)控腫瘤血管的生成最強(qiáng)細(xì)胞因子之一，VEGF能夠直接促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的有絲分裂，同時(shí)還能參與蛋白的水解以及細(xì)胞外基質(zhì)基底膜的降解，從而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移，為腫瘤新生血管生成提供良好的條件，此外，VEGF還能夠直接作用于腫瘤細(xì)胞表面的相應(yīng)受體，促進(jìn)腫瘤病灶的生長(zhǎng)。我們的研究結(jié)果表明，NSCLC患者聯(lián)合方案化療前后血清中VEGF的水平能夠反映出腫瘤對(duì)藥物的反應(yīng)性。這一結(jié)果表明，血清中VEGF的水平可以作為生物標(biāo)志物，反映NSCLC患者對(duì)吉西他濱聯(lián)合卡鉑化療的反應(yīng)性。藥物敏感的有效組NSCLC患者血清中VEGF水平較化療前明顯降低，其原因可能是腫瘤新生血管減少，導(dǎo)致腫瘤營(yíng)養(yǎng)和微環(huán)境發(fā)生改變，從而導(dǎo)致腫瘤病灶減小，使腫瘤表達(dá)的VEGF減少，釋放入血液中的VEGF也同時(shí)減少。相反，抗藥性的無(wú)效組NSCLC患者則可能是病情無(wú)法得到有效控制，腫瘤進(jìn)一步惡化導(dǎo)致腫瘤表達(dá)的VEGF增多而釋放入血液中，釋放出來(lái)的VEGF進(jìn)入腫瘤微環(huán)境后，通過改造微環(huán)境，如增加各種蛋白酶和腫瘤基質(zhì)降解酶的分泌、促進(jìn)新生血管的形成等來(lái)進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展，包括發(fā)生遠(yuǎn)處的侵襲和轉(zhuǎn)移。

近年來(lái)，利用聯(lián)合化療的方案進(jìn)行NSCLC的治療已經(jīng)成為一個(gè)重要的研究領(lǐng)域。越來(lái)越多的研究表明，聯(lián)合化療能有效地抑制腫瘤新生血管的生成，從而能夠有效地抑制腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移，達(dá)到延長(zhǎng)患者生存期的目的。然而，對(duì)化療藥物的敏感性降低這又成為了NSCLC治療面臨的難題之一，確定患者在化療時(shí)對(duì)藥物的反應(yīng)性，是臨床治療制定化療方案的有效依據(jù)之一。因此尋找反映化療反應(yīng)性的血液生物學(xué)標(biāo)志物非常重要，本研究使用吉西他濱聯(lián)合卡鉑對(duì)NSCLC患者進(jìn)行2個(gè)療程的化療。結(jié)果顯示，血清TGF-β1和VEGF水平變化能夠有效的反映聯(lián)合化療方案治療NSCLC的效果，這提示，在NSCLC聯(lián)合化療中，使用血清TGF-β1和VEGF作為血液生物標(biāo)志物反映患者對(duì)藥物的反應(yīng)性是可行的，可以為制定化療方案提供切實(shí)的依據(jù)。

參考文獻(xiàn):

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[5] 盧紅陽(yáng).小細(xì)胞肺癌腫瘤組織VEGF表達(dá)及其與預(yù)后的

Serum TGF-β1 and VEGF Levels Predicting Patients Response in Gemcitabine Pluscarboplatin Treating Non-small Cell Lung Cancer

XU Jia，LIU Aining，YAN Shuanghong
(The Affiliated Hospital of Jiangnan University，Jiangsu Wuxi 214062，China)

Abstract:Objective: To investigate whether the serum levels of transforming growth factor beta 1 (TGF-β1) and vascular endothelial growth factor (VEGF) are biomarkers of response to the chemotherapy. Method: A total of 118 subjects were recruited at our hospital between April 2012 and April 2014，including 58 NSCLC patients receiving chemotherapy (gemcitabine plus carboplatin)(NSCLC group) and 60 healthy controls(control group).Serum TGF-β1and VEGF levels were measured before and after chemotherapy using enzyme-linked immunosorbent assay (ELSIA)，and the serum TGF-β1and VEGF levels were measured when undergoing physical medical examination. The clinical efficacy was evaluated after chemotherapy. Result: Compared to control group，the serum TGF-β1and VEGF levels were significantly higher in NSCLC group before chemotherapy(P＜0.05).Importantly，serum TGF-β1and VEGF levels decreased significantly after chemotherapy in CR+PR group in comparison with before chemotherapy(P＜0.05). By contrast，serum TGF-β1and VEGF levels were markedly higher after chemotherapy in the SD+PD group in comparison with before chemotherapy(P＜0.05). Conclusion: The serum TGF-β1and VEGF levels of NSCLC patients were raised，which can show the patients' respense to GC regimen

Key words:TGF-β1； VEGF； NSCLC； Chemotherapy

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B

doi:10.3969/ j.issn.1006-6233.2016.01.019

文章編號(hào):1006-6233(2016)01-0055-05

*基金項(xiàng)目:江蘇省自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目，(編號(hào):BK2012101)