陜西省寶雞市高新人民醫(yī)院口腔科(寶雞 721000)

惠　杰

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β-防御素2、bcl-2蛋白、雌激素受體及芳香化酶在牙齦瘤組織中的表達(dá)及臨床意義

陜西省寶雞市高新人民醫(yī)院口腔科(寶雞 721000)

惠杰

摘要目的：探討β-防御素2、bcl-2蛋白、雌激素受體及芳香化酶在牙齦瘤組織中的表達(dá)及臨床意義。方法：選取2013年1月至2015年1月于我院進(jìn)行手術(shù)切除牙齦瘤的患者作為觀察組；另選取20例健康個(gè)體作為對(duì)照組。采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)研究對(duì)象的β-防御素2、bcl-2蛋白、雌激素受體及芳香化酶的表達(dá)。結(jié)果：觀察組HBD-2表達(dá)率為60.00%，觀察組HBD-2表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組bcl-2蛋白表達(dá)率為53.33%，強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)的有4例、重度陽(yáng)性表達(dá)的有5例、弱陽(yáng)性表達(dá)的有7例，而對(duì)照組雖有5例弱陽(yáng)性表達(dá)，但表達(dá)率僅為25.00%，觀察組bcl-2蛋白表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組陽(yáng)性表達(dá)率為50.00%，陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組陽(yáng)性表達(dá)率為33.33%，芳香化酶陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論：β-防御素2、bcl-2蛋白蛋白、雌激素受體及芳香化酶在牙齦瘤組織中表達(dá)均明顯增加，可作為牙齦瘤疾病發(fā)生和進(jìn)展的重要指標(biāo)。

主題詞牙齦疾病β-防御素@bcl-2蛋白受體，雌激素芳香酶

牙齦瘤是臨床上一種常見(jiàn)的口腔疾病，高發(fā)群體是中青年，女性比男性發(fā)病率高，且發(fā)病部位集中在前牙區(qū)[1]。目前針對(duì)牙齦瘤的臨床表現(xiàn)和病理分型進(jìn)行診斷。為了探討β-防御素2、bcl-2蛋白、雌激素受體及芳香化酶在牙齦瘤組織中的表達(dá)及臨床意義，我院嘗試開(kāi)展本研究，并取得了不錯(cuò)的效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

對(duì)象與方法

1對(duì)象選取2013年1月至2015年1月于我院進(jìn)行手術(shù)切除牙齦瘤的患者為研究對(duì)象。所有患者均經(jīng)過(guò)病理診斷，符合牙齦瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)并分型。其中肉芽腫型10例、血管瘤型9例、纖維型11例。另選取20例健康個(gè)體，設(shè)為對(duì)照組。在觀察組中，男16例，女14例，平均年齡57.34±8.04歲；在對(duì)照組中，男11例，女9例，平均年齡57.15±8.24歲。兩組患者在性別比例、平均年齡方面均無(wú)明顯差異(P<0.05)，資料具有可比性。

2方法采集樣本：樣本取自患者頜骨囊腫開(kāi)窗術(shù)切取術(shù)窗處的牙齦組織。

2．1試劑：小鼠抗人雌激素受體(單抗即用型試劑)、免抗人芳香化酶抗血清(多抗原液)等。

2．2方法：檢測(cè)研究對(duì)象的β-防御素2、bcl-2蛋白、雌激素受體及芳香化酶的表達(dá)，具體如下：采用免疫組織化學(xué)SP法。所有樣本均進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋，每個(gè)蠟塊均切5張5μm厚的切片(分別用于做芳香化酶與雌激素受體染色、陰性對(duì)照及備用)，然后進(jìn)行脫蠟、脫苯；封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶并修復(fù)抗原，按照試劑盒詳細(xì)步驟和說(shuō)明，進(jìn)行免疫組化染色。然后隨機(jī)選取5個(gè)不重疊的視野進(jìn)行陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)，并以此推算陽(yáng)性細(xì)胞率。

3觀察指標(biāo)比較兩組患者β-防御素2、bcl-2蛋白、雌激素受體及芳香化酶的表達(dá)率。

3．1HBD-2：陽(yáng)性細(xì)胞少于5%，為0分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)6%～25%，為1分；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)26%至50%，為2分；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)51%至75%，為3分；陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多于75%，為4分。陽(yáng)性強(qiáng)度黃色，1分；棕黃色，2分；棕褐色，3分。細(xì)胞陽(yáng)性率與染色強(qiáng)度乘積判定標(biāo)準(zhǔn)：陰性(-)，為0分；弱陽(yáng)性(+)，為1～4分；中度陽(yáng)性(++)，為5～8分，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)，為9～13分。

3．2bcl-2蛋白：強(qiáng)陽(yáng)性(+++)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多于50%；中度陽(yáng)性(++)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在少于26%～50%；弱陽(yáng)性(+)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)少于25%；陰性(-)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0。

3．3 雌激素受體：染色強(qiáng)度評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)為：強(qiáng)陽(yáng)性(+++)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多于50%；中度陽(yáng)性(++)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在25%～50%之間；弱陽(yáng)性(+)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)少于25%；陰性(-)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0。

3．4芳香化酶：強(qiáng)陽(yáng)性(+++)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多于25%；中度陽(yáng)性(++)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在少于25%但多于5%；弱陽(yáng)性(+)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)少于5%；陰性(-)：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0。

選取顯色的陽(yáng)性切片作為芳香化酶與雌激素受體的陽(yáng)性對(duì)照，選取PBS替代一抗作為陰性對(duì)照。

結(jié)果

1兩組患者的HBD-2表達(dá)比較經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)，觀察組HBD-2表達(dá)率為60%，對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)率為35%，觀察組HBD-2表達(dá)率明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1　兩組患者的HBD-2表達(dá)比較

2兩組患者的bcl-2蛋白表達(dá)比較經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)，觀察組bcl-2蛋白表達(dá)率為53.33%，而對(duì)照組雖有5例弱陽(yáng)性表達(dá)，但總表達(dá)率僅為25.00%，觀察組bcl-2蛋白表達(dá)率明顯高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2　兩組患者的bcl-2蛋白表達(dá)比較

3兩組患者的雌激素受體比較觀察組陽(yáng)性表達(dá)率為50.00%，對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)率10.00%，觀察組雌激素受體陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3　兩組患者的雌激素受體表達(dá)比較

4兩組患者的芳香化酶表達(dá)比較經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)，觀察組陽(yáng)性表達(dá)率為33.33%，對(duì)照組全為陰性， 觀察組芳香化酶陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4　兩組患者的芳香化酶表達(dá)比較

討論

牙齦瘤是一種較常見(jiàn)的口腔疾病，主要是由于牙齦過(guò)度增生，上皮細(xì)胞形態(tài)發(fā)生異常，并且增生的上皮釘突形成網(wǎng)狀、片狀嵌入進(jìn)結(jié)締組織里，造成纖維細(xì)胞顯著增加，并且造成結(jié)締組織纖維化、膠原纖維束排列混亂和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)[2]。

HBD-2是一種β-防御素，作用于機(jī)體的免疫系統(tǒng)[3]。有報(bào)道指出，防御素具有裂解腫瘤細(xì)胞的作用，其裂解作用與防御素濃度有關(guān)，而且在多種腫瘤組織中都有防御素表達(dá)的現(xiàn)象[4]。本研究中HBD-2在正常組織中有表達(dá)，在腫瘤組織中表達(dá)更多，說(shuō)明HBD-2的表達(dá)與腫瘤的進(jìn)展有關(guān)，通過(guò)檢測(cè)組織中HBD-2濃度可在一定程度上診斷疾病的進(jìn)展，有利于預(yù)后判斷。

凋亡是一種細(xì)胞程序性死亡現(xiàn)象，其生化變化主要表現(xiàn)為凋亡蛋白改變，bcl-2蛋白正是細(xì)胞凋亡過(guò)程中一種非常重要的蛋白。本研究中，bcl-2蛋白在正常組織中表達(dá)率為25.00%，而在牙齦瘤組織中表達(dá)率為53.33%，正契合了上述研究的結(jié)果，可見(jiàn)觀察組bcl-2蛋白表達(dá)率為53.33%，強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)的有4例、重度陽(yáng)性表達(dá)的有5例、弱陽(yáng)性表達(dá)的有7例，而對(duì)照組雖有5例弱陽(yáng)性表達(dá)，但總表達(dá)率僅為25.00%，表達(dá)與牙齦瘤的發(fā)生有重要關(guān)聯(lián)，檢測(cè)bcl-2蛋白的表達(dá)可以作為判斷牙齦瘤發(fā)生一個(gè)指標(biāo)。

雌激素受體是一種介導(dǎo)雌激素的信號(hào)，具有調(diào)節(jié)生殖系統(tǒng)的生長(zhǎng)、分化以及各種生理機(jī)能。楊健等經(jīng)過(guò)對(duì)煙癮瘤組織中雌激素受體的表達(dá)的研究，發(fā)現(xiàn)雌激素受體表達(dá)與性別和牙齦瘤分型無(wú)明顯相關(guān)性，但卻與牙齦瘤的疾病進(jìn)展有關(guān)，牙齦瘤具有一定的雌激素依賴性。芳香化酶又稱雌激素合成酶，具有催化雄烯二酮向雌二醇轉(zhuǎn)化的作用。本研究中，芳香化酶在正常組織中無(wú)表達(dá)，而在牙齦瘤組織中表達(dá)率為33.33%，明顯高于正常組織，可見(jiàn)芳香化酶的高表達(dá)與牙齦瘤有關(guān)，檢測(cè)芳香化酶濃度可在一定程度上有助于臨床診斷牙齦瘤，提升預(yù)后。

綜上所述，β-防御素2、bcl-2蛋白蛋白、雌激素受體及芳香化酶在牙齦瘤組織中表達(dá)均明顯增加，可將其作為檢測(cè)指標(biāo)用于臨床診斷牙齦瘤疾病發(fā)生和進(jìn)展，對(duì)臨床治療具有指導(dǎo)性意義，在今后的臨床治療中，可以進(jìn)行適當(dāng)?shù)耐茝V。

參考文獻(xiàn)

[1]周曉麗,李宏,張建麗. 瘤體切除、拔牙及即刻牙再植三聯(lián)治療牙齦瘤的臨床研究[J]. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2013,6(6):1187-1188.

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[4]李明,逄愛(ài)慧,李科珍,等. 內(nèi)源性雌激素及其受體與非妊娠期牙齦瘤的關(guān)系[J]. 華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,4(16):484-486.

(收稿：2015-11-18)

【中圖分類號(hào)】R739.8

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.04.025