白吉明　李建華　王　翔　馮　軍

(承德醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)院　承德市中心醫(yī)院腫瘤科，河北　承德　067000)

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FAC聯(lián)合化療對(duì)乳腺癌患者抗氧化酶、肝臟轉(zhuǎn)氨酶和心肌酶的影響

白吉明李建華王翔馮軍

(承德醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)院承德市中心醫(yī)院腫瘤科，河北承德067000)

〔摘要〕目的探討5-氟尿嘧啶，阿霉素，環(huán)磷酰胺(FAC)聯(lián)合化療對(duì)乳腺癌患者血清抗氧化酶、肝臟轉(zhuǎn)氨酶和心肌酶的影響。方法選取承德市中心醫(yī)院腫瘤科2012年8月至2013年8月住院的40例女性乳腺癌患者。接受FAC聯(lián)合化療的乳腺癌患者為FAC聯(lián)合化療組(n=20)；未接受化療的乳腺癌患者為乳腺癌組(n=20)；并選擇20例同年齡階段的健康女性為對(duì)照組(n=20)。檢測3組間過氧化氫酶(CAT)、還原型谷胱甘肽(GSH)、尿酸(UA)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和肌酐的水平。結(jié)果乳腺癌組與FAC聯(lián)合化療組血清CAT和GSH的水平較對(duì)照組顯著降低，脂質(zhì)過氧化作用和NO水平顯著升高(P<0.05)。FAC聯(lián)合化療組血清CK和LDH水平較其他兩組顯著升高(P<0.05)。結(jié)論FAC聯(lián)合化療可以加速乳腺癌患者體內(nèi)已被激活的氧化應(yīng)激系統(tǒng)。這種氧化應(yīng)激具有細(xì)胞毒作用，其對(duì)心肌細(xì)胞的損傷作用尤為顯著。

〔關(guān)鍵詞〕乳腺癌；心臟功能；肝功能；化療；氧化應(yīng)激

1對(duì)象和方法

1.1研究對(duì)象承德市中心醫(yī)院腫瘤科住院的40例經(jīng)手術(shù)石蠟病理證實(shí)的乳腺癌患者。根據(jù)國際癌癥控制聯(lián)盟(UICC1997)指南，多數(shù)入組的乳腺癌患者為Ⅱ期，少數(shù)為Ⅰ期和Ⅲ期。根據(jù)TNM分期和病理結(jié)果，34例患者為浸潤性導(dǎo)管癌，4例為浸潤性小葉癌，1例為黏液腺癌，1例為髓樣癌。根據(jù)有無接受化療，將乳腺癌患者分為2組，乳腺癌組是經(jīng)病理證實(shí)的新發(fā)現(xiàn)的乳腺癌患者，但未接受化療與激素治療，共20例。FAC組為已經(jīng)接受2個(gè)FAC周期化療的乳腺癌患者(5-氟尿嘧啶500 mg/m2，阿霉素50 mg/m2，環(huán)磷酰胺500 mg/m2)，共20例。另選20例同年齡階段的健康女性作為對(duì)照組。患有與自由基改變相關(guān)疾病的患者不包括在內(nèi)，例如：糖尿病、高血壓、心肌缺血、心肌梗死、腎臟疾病、胰腺疾病、肺部疾病等。3組在社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況和飲食方式方面無明顯差異。記錄患者的病史，比較各組間檢驗(yàn)與檢查結(jié)果。所有患者均無藥物濫用與藥物依賴史，重型顱腦損傷或癲癇癥病史。

1.2試劑與儀器阿霉素注射液(深圳萬樂藥業(yè)有限公司提供)，環(huán)磷酰胺(山西普德藥業(yè)股份有限公司提供)和5-氟尿嘧啶(天津金耀氨基酸有限制藥公司提供)，生化指標(biāo)測定所需儀器(酶標(biāo)儀BioRad450 美國BioRad公司；ROCHE電化學(xué)分析儀E601 瑞士ROCHE公司；全自動(dòng)化學(xué)分析儀7180 日本日立公司)，蒸餾水(用于生化分析)，T80紫外/可見分光光度計(jì)(用于光譜光度測量，由英國PG儀器有限公司提供)。

1.3血清的采集、準(zhǔn)備和生化指標(biāo)檢測所有受試者空腹10～12 h，采用BD真空學(xué)清管采外周靜脈血4 ml(FAC組要求在第2周期化療后24 h后)，2 h內(nèi)3 000 r/min離心10 min，分離血清，然后將其存儲(chǔ)在-70℃凍存待檢。按照國際臨床化學(xué)和實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)聯(lián)盟(IFCC)有關(guān)酶學(xué)活性測定(37℃)參考方法的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)，使用HITACHI 7600進(jìn)行乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酐、尿酸(UA)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的測定，采用原廠試劑校準(zhǔn)品及儀器參數(shù)，常規(guī)檢測；酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測還原型GSH、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)，按說明書操作，Bio-Rad680酶標(biāo)儀測定；采用直接紫外法測定血清CAT，按試劑盒說明書操作，T80紫外可見分光光度計(jì)測定。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)的組間比較行單因素方差分析。

2結(jié)果

2.1各組抗氧化酶水平比較無論是否接受化學(xué)治療，乳腺癌患者CAT活性及GSH水平顯著低于對(duì)照組，NO與MDA水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。接受FAC化療的乳腺癌患者較未接受化療者CAT活性及GSH水平顯著降低，NO與MDA水平顯著增高(P<0.05)。見表1。

2.2各組心肌酶活性比較未接受化療的乳腺癌患者CK與對(duì)照組相似(P>0.05)。與對(duì)照組及未接受化療的乳腺癌組相比，接受FAC化療的乳腺癌患者CK活性顯著升高(P<0.05)。與對(duì)照組及未接受化療的乳腺癌組相比，接受FAC化療的乳腺癌患者LDH活性顯著升高(P<0.05)，見表2。

表1各組抗氧化酶水平比較(x±s,n=20)

組別CAT(U/L)GSH(mg/dl)NO(μmol/ml)MDA(nmol/ml)對(duì)照組739±27.534.1±2.20.35±0.037.0±0.31乳腺癌組455±36.91)24.7±1.41)3.6±0.41)9.5±0.21)FAC組270±18.231)2)15.4±0.551)2)6.5±0.61)2)11.3±0.721)2)

與對(duì)照組比較：1)P<0.05；與乳腺癌組比較：2)P<0.05，下表同

表2各組心肌酶活性比較(x±s,n=20，U/L)

組別LDHCK對(duì)照組259.7±18.913.6±3.2乳腺癌組303.2±7.917.4±1.8FAC組368.9±19.61)2)32.1±2.61)2)

2.3各組腎功能、轉(zhuǎn)氨酶水平比較3組間ALT、AST活性、肌酐、UA水平相近(P>0.05)，但乳腺癌患者UA、ALT水平明顯高于對(duì)照組(見表3)。

表33組腎功能、轉(zhuǎn)氨酶水平比較(x±s,n=20)

組別肌酐(mg/dl)UA(mg/dl)ALT(U/L)AST(U/L)對(duì)照組0.65±0.045.23±0.267.7±0.448.3±0.44乳腺癌組0.73±0.0325.7±0.241)7.62±0.81)8.7±0.47FAC組0.74±0.0455.6±0.321)7.65±0.477.9±0.6

3討論

ROS與乳腺癌的發(fā)生，發(fā)展過程有關(guān)〔5〕，ROS在腫瘤的發(fā)生中起著重要的作用，在正常情況下，ROS水平的調(diào)控是通過內(nèi)源性的機(jī)制來完成的，包括GSH和CAT。ROS水平升高可以啟動(dòng)DNA損傷，并可能最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生〔6〕。Kasapovic＇等〔7〕研究發(fā)現(xiàn)，CAT和SOD活性減弱，表明在乳腺癌患者中增強(qiáng)自由基的活性的同時(shí)抗氧化防御機(jī)制減弱?；熀腿橄侔┗颊唧w內(nèi)增高的NO濃度會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞毒活性升高，因此，抑制NO的產(chǎn)生對(duì)于改善乳腺癌的預(yù)后很重要。NO通過激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶和磷酸肌醇3-激酶等多種致癌信號(hào)途徑，促進(jìn)癌癥的發(fā)展〔8〕。NO產(chǎn)生增多會(huì)影響細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)，還會(huì)激活致癌途徑。NO誘導(dǎo)干細(xì)胞在乳腺癌中的腫瘤特征〔9〕。本研究結(jié)果顯示NO與氧化應(yīng)激標(biāo)志物在乳腺癌患者中共同調(diào)節(jié)乳腺癌的進(jìn)展，F(xiàn)AC化療增加了乳腺癌患者已有的氧化應(yīng)激能力。

Alshabanah等〔10〕研究表明阿霉素不僅增加了自由基形成，同時(shí)也減少其對(duì)ROS的解毒能力。阿霉素不僅能夠增加自由基的形成，還可以降低其對(duì)ROS系統(tǒng)的解毒能力，這就導(dǎo)致組織損傷和硫代巴比妥酸物質(zhì)的水平增加?；熕幬锸怯H水性的，不能穿透細(xì)胞內(nèi)膜，但阿霉素可透入線粒體外膜而進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，其可與輔酶Q10競爭受體使電子轉(zhuǎn)移到氧分子，從而促進(jìn)超氧化物自由基的形成〔11〕。阿霉素還可嵌入DNA環(huán)，通過增強(qiáng)細(xì)胞膜磷脂不飽和脂肪酸的過氧化作用，產(chǎn)生氧化性應(yīng)激而干擾正常的細(xì)胞代謝。本研究顯示：心臟是最易受氧化應(yīng)激影響的器官，F(xiàn)AC聯(lián)合化療組心肌酶CK和LDH水平明顯升高，表明其主要的副作用為心臟毒性。阿霉素可使LDH透過線粒體膜而進(jìn)入血液，從而使血清LDH水平增高。有研究表明，阿霉素可誘導(dǎo)自由基的產(chǎn)生，引發(fā)膜脂過氧化和破壞心肌細(xì)胞，從而使血清CK水平增高〔12〕。其還可以選擇性下調(diào)GSH-Px活性，使體內(nèi)過氧化氫水平升高，使心臟的抗氧化活性低。與心肌細(xì)胞的線粒體不同，肝臟細(xì)胞缺乏從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到呼吸鏈的還原當(dāng)量NADH相關(guān)途徑。

本實(shí)驗(yàn)提示NO水平的增加，CAT和GSH的降低增強(qiáng)了脂質(zhì)過氧化水平，證明乳腺癌導(dǎo)致氧化應(yīng)激。FAC化療方案的治療加大了氧化應(yīng)激導(dǎo)致的心臟毒性，因此，強(qiáng)烈建議在化療過程中監(jiān)測血清氧化指標(biāo)和心肌酶。

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〔2014-11-09修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)

乳腺癌發(fā)病的主要危險(xiǎn)因素包括：年齡、月經(jīng)初潮早、絕經(jīng)晚、初次受孕晚、肥胖、乳房組織致密、使用口服避孕藥、服用激素類藥物、吸煙酗酒、飲食習(xí)慣、家族病史、未哺乳以及既往的一些良性乳腺疾病。一些基因包括BRCA1和BRCA2，HER2/neu和P53蛋白與乳腺癌的易感性和發(fā)展相關(guān)〔1〕。氧化應(yīng)激是由于體內(nèi)活性氧自由基(ROS)與抗氧化系統(tǒng)之間的平衡受到干擾。ROS包括過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、維生素和谷胱甘肽(GSH)等。有研究表明ROS參與啟動(dòng)和促進(jìn)癌變，引起某些抑癌基因的失活或丟失〔2〕。蒽環(huán)類藥物是目前發(fā)現(xiàn)的最有效的抗癌藥物〔3〕，大多數(shù)乳腺癌患者選用5-氟尿嘧啶、阿霉素和環(huán)磷酰胺(FAC)聯(lián)合化療，但這些抗腫瘤藥物可以引起抗氧化劑水平的降低〔4〕，其主要副作用是心肌損傷和嘔吐，這大大限制了它們的作用。因此，本研究探討氧化應(yīng)激對(duì)乳腺癌的影響以及接受聯(lián)合化療的患者肝臟轉(zhuǎn)氨酶和心肌酶的變化。

〔中圖分類號(hào)〕R737.9

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)08-1908-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.08.056

第一作者：白吉明(1984-)，男，主治醫(yī)師，碩士，主要從事乳腺、甲狀腺、胃腸道惡性腫瘤的治療研究。