陳亮　沈燕　孫如意

摘 要：該文以水生動物斑馬魚及大型溞為受試生物，在實驗室條件下測定了5%煙嘧磺隆·21%莠去津可分散油懸浮劑對2種水生生物的急性毒性，并進行了安全性評價。結(jié)果表明，5%煙嘧磺隆·21%莠去津可分散油懸浮劑對斑馬魚和大型溞的毒性均為中毒，因而在水田及附近應謹慎施用，避免造成對水生生物的危害。

關(guān)鍵詞：5%煙嘧磺隆·21%莠去津可分散油懸浮劑；斑馬魚；大型溞；急性毒性；安全性評價

中圖分類號 X171 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2016）17-0034-03

Abstract：Aquatic animal zebrafish and Daphnia magna are as test organisms in this paper，under laboratory conditions，5% nicosulfuron-21% atrazine dispersed oil suspension agent was studied on two acute toxicity of aquatic organisms，and safety evaluation. The results showed that the 5% nicosulfuron-21% atrazine dispersed oil suspension agent are poisoning to zebar fish and daphnia magna.so in the paddy field and the nearby caution should be applied，to avoid causingharm to aquatic organisms.

Key words：5% nicosulfuron-21% atrazine dispersed oil suspension agent；Zebra fish；Daphnia magna；Acute toxicity；Safety evaluation

農(nóng)藥污染是世界主要環(huán)境污染問題之一，長期以來受到了全球范圍內(nèi)的廣泛關(guān)注，隨著農(nóng)藥使用量的增加，殘留農(nóng)藥進入水體對水環(huán)境的污染日益加重，對水生生物的危害也越來越大，甚至對人類健康產(chǎn)生了潛在威脅[1]。大型溞和斑馬魚均為經(jīng)合組織（OECD）推薦的環(huán)境毒理試驗代表性受試生物，被廣泛應用于水生生物毒性的測試和評價[2-4]。

煙嘧磺隆和莠去津是玉米和谷物田地中的常用除草劑品種，煙嘧磺隆系磺酰脲類除草劑，主要用于防治禾本科雜草并兼治若干闊葉雜草，莠去津是三氮苯類除草劑，用于防除闊葉雜草和多種一年生禾本科雜草。文獻表明，煙嘧磺隆和莠去津混用不僅可以提高藥效，還可以克服對煙嘧磺隆中度敏感的玉米品種藥害[5-7，12]。目前國內(nèi)研究主要集中于其除草效果和殘留降解方面[5-12]，而有關(guān)上述2種除草劑對水生生物的毒性研究則相對較少。為此，本研究選用5%煙嘧磺隆·21%莠去津可分散油懸浮劑，參照國家《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》[13]中農(nóng)藥對水生物的毒性等級，分別測定了其對斑馬魚和大型溞的急性毒性，結(jié)合試驗藥液的真實濃度，對其進行安全性評價，以期為科學評價其對水生系統(tǒng)可能造成的危害提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試生物 藍色斑馬魚（Brachydanio rerio），購自合肥裕豐花鳥市場飛揚水族館，平均體重0.25g，平均體長2.5cm，健康無病，與試驗相同條件下預養(yǎng)10d，預養(yǎng)期間自然死亡率0.6%（<5.0%），試驗前24h停止喂食。大型溞（Daphnia magna），選用實驗室條件下孤雌繁殖代數(shù)3代以上、出生時間6～24h的幼溞用于試驗。

1.2 試驗藥劑 5%煙嘧磺隆·21%莠去津可分散油懸浮劑，由上海市農(nóng)藥研究所提供。

1.3 主要儀器設(shè)備 電子天平、智能人工氣候箱、光學顯微鏡、血球計數(shù)板、超凈工作臺、高壓滅菌鍋、酸度計、便攜式pH計、溶解氧測定儀、硬度計、溫濕度記錄儀、移液器、容量瓶、三角瓶、量筒、玻璃缸、玻璃棒、燒杯、滴管等。SHIMADZU LCMSMS-8030，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，分液漏斗，濃縮瓶。

1.4 試驗方法

1.4.1 魚類急性毒性試驗 在預實驗確定的濃度范圍內(nèi)，按照1.2倍幾何倍差設(shè)置5個濃度組，進行正式試驗時，以不加藥的曝氣水為空白對照。試驗中，每處理均放入10條斑馬魚，試驗周期為96h，于24h、48h、72h和96h觀察記錄各處理斑馬魚死亡數(shù)和中毒癥狀以及供試物各濃度溶液的溫度、溶解氧濃度、pH值等。于試驗開始后0h、48h和96h時分別留取藥液樣品，檢測藥液真實濃度。

1.4.2 溞類急性活動抑制試驗 在預實驗確定的濃度范圍內(nèi)，按照1.3倍幾何倍差設(shè)置7個濃度組，試驗時，以不加藥的人工稀釋水為空白對照。試驗用50mL的燒杯裝30mL各處理組藥液及對照組溶液，每個濃度4個重復，每個重復放入5只幼溞。于24h、48h觀察和記錄供試幼溞中毒癥狀和受抑制數(shù)以及供試物溶液的溫度、溶氧量、pH值、硬度等。并于試驗開始后0h和48h時分別留取藥液樣品，檢測藥液真實濃度。

1.5 藥液真實濃度檢測 隨著試驗的進行，藥液會發(fā)生一定程度的降解，其實際濃度與初始設(shè)計濃度存在一定差別，故需分別在魚類急性毒性試驗的0h、48h、96h，溞類急性活動抑制試驗的0h、48h以及藻類生長抑制試驗的0、72h測定藥液的真實濃度。取混勻后的式樣0.1mL，加入0.9mL超純水稀釋，混合均勻后過0.22μm水系濾膜，待測。

1.6 數(shù)據(jù)處理 根據(jù)試驗期間斑馬魚的死亡數(shù)和大型溞的受抑制數(shù)，用統(tǒng)計軟件SPSS 20.0處理數(shù)據(jù)，得到5%煙嘧磺隆·21%莠去津可分散油懸浮劑對2種水生生物的回歸方程、差異顯著性、半致死濃度LC50或半抑制濃度EC50以及95%置信限[16]。

1.7 毒性等級劃分 參照《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》進行毒性等級劃分。按魚類半致死濃度LC50（96h）值，將農(nóng)藥對魚類毒性等級劃分為4個等級：劇毒（LC50≤0.1mg a. i. /L）；高毒（0.110mg a. i. /L）。按溞類半抑制濃度EC50（48h）值，將農(nóng)藥對溞類毒性等級劃分為4個等級：劇毒（EC50≤0.1mg a. i. /L）；高毒（0.1