陳永敢1) 屈 直2) 陳川平 李珍 范平杰 馬紅梅 姜芳燕

摘 要 靈芝是一類木腐真菌，具有重要的藥理價值，靈芝栽培方法研究能為實際應用提供技術支撐。本研究選擇一株分離自海南五指山的靈芝進行室內栽培方法研究，并分析其出芝和菌蓋形成的動態(tài)變化規(guī)律以及子實體的形態(tài)特征。結果表明，靈芝出芝動態(tài)具有顯著的規(guī)律性，隨著時間的進行，出芝逐漸減少；而菌蓋形成沒有明顯的時間規(guī)律。此外，室內栽培靈芝出芝率及菌蓋形成率較高，但子實體大小相對大田栽培靈芝小，反映了可通過增加栽培原料的營養(yǎng)成分提高靈芝子實體大小，為進一步推廣應用室內栽培方法提供參考。

關鍵詞 海南 ；Ganoderma sp. ；靈芝室內 ；栽培

分類號 S567.3+1 Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2016.02.005

Indoor Cultivation Technique of Ganoderma sp. Grown in Hainan

CHEN Yonggan1） QU Zhi2） CHEN Chuanping1）

LI Zhen1） FAN Pingjie1） MA Hongmei1） JIANG Fangyan1）

（1 College of Tropical Biology and Agronomy， Tropical Ocean College of Hainan，

Sanya， Hainan 572022， China；

2 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology， CATAS， Haikou， Hainan 571101）

Abstract Ganoderma spp. is a kind of wood rotting fungi， which has important pharmacological value. The research on the cultivation method of Ganoderma spp. can provide the raw materials for the practical application. In this study， Wzh1 was chosen for indoor cultivation， and analyze the law of fruitbody and pilei producing， and evaluated the fruitbody morphology. The results showed that fruitbody producing decrease gradually along with the time. Additionally， comparing with the Ganoderma spp. cultivated in the field， the formation rate of fruitbody and pilei increased significantly， but the fruitbody was smaller. It reflected that it can add nutrients in the cultivation of raw materials to increase the size of the fruitibody， and further extending the indoor cultivation methods.

Keywords Hainan ； Ganoderma ； indoor ； cultivation

靈芝為腐生菌，常在闊葉樹的倒木、枯木和樹樁上生長。人工栽培條件下，需要碳源、氮源、礦物質等作為培養(yǎng)基原料[1]。由于培養(yǎng)基中含有木質素、纖維素、淀粉等碳水化合物及蛋白質等氮源物質，這些物質分子量較大，靈芝菌絲不易吸收，造成了靈芝生長緩慢及不易栽培成功[2]。

近40年來靈芝栽培技術得到廣泛發(fā)展，其基本的方法是使靈芝菌絲體在室內發(fā)育到生理成熟階段，然后將其移栽到室外，促進生長，最終產(chǎn)出質量較佳的子實體，這種技術有塑料袋、玻璃瓶及椴木露地栽培[3]?，F(xiàn)今通過對水分、溫度、酸堿度、光照、空氣調節(jié)，已可實現(xiàn)在西北地區(qū)氣候、資源環(huán)境條件下，鹿角靈芝的大棚栽培，并且規(guī)?；a(chǎn)[4-6]，此外富鍺靈芝、白鶴靈芝也已實現(xiàn)大田栽培。然而由于土地資源有限，加之控制環(huán)境條件需要大量的能源，一定程度上束縛了大田栽培技術的推廣應用。

自60年代我國實現(xiàn)靈芝室內栽培以來，靈芝的人工栽培技術已得到長足的進步，然而傳統(tǒng)靈芝栽培產(chǎn)量低，很難滿足市場的需求，而且可實現(xiàn)室內栽培的靈芝種類少，特別是產(chǎn)自我國海南五指山的靈芝，其室內栽培方法更鮮有報道[7]。本研究選擇一株分離自海南五指山的野生靈芝，通過控制環(huán)境條件探討實現(xiàn)靈芝室內栽培的方法，以期為進一步推廣應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

菌株Wzs1為本課題組分離自海南五指山野生靈芝子實體，4℃保存于本實驗室。

1.2 方法

1.2.1 菌種制備

培養(yǎng)基為鋸術屑78%、麩皮20%、蔗糖和石膏各1%，混合料含水量在60%～65%（即手握料指縫間有水滲出又不滴下），將拌好的培養(yǎng)料裝入瓶中壓實。裝至瓶肩處，內成平面，表面覆蓋上薄層沙土，用直徑1～1.5 cm的木棍在培養(yǎng)料中插出5 cm小洞，高溫高壓滅菌2 h。培養(yǎng)基滅菌完成之后，于無菌條件下接種，22～28℃培養(yǎng)。

1.2.2 靈芝室內栽培管理

栽培瓶置放于架上，菌絲生長階段溫度維持22～25℃，子實體生長階段溫度維持25～28℃，若溫度高于28℃通風降溫，疊放在一起培養(yǎng)瓶降低高度，疏散瓶距。子實體所處環(huán)境保持高濕度，在生長期，空氣相對濕度增加到90%～92%。

1.2.3 靈芝采收及子實體觀察

菌蓋顏色由乳白色變成米黃色，再由米黃色變成紅褐色時，利用銳刀沿菌柄底部切斷，及時清理余下菌根，不傷及菌絲體以便二潮生長，觀察采收的子實體形態(tài)特征。

2 結果與分析

2.1 靈芝生長的形態(tài)特征

接種完成后，靈芝菌絲在培養(yǎng)瓶中生長，當菌絲體長到一定階段糾結形成原基，即生長進入原基期，形成肉眼可見的乳白色原基（圖1A）。原基分化、膨大、不斷向上生長形成菌柄，菌柄頂端再橫向生長成菌蓋（圖1B）。當菌蓋中出現(xiàn)菌管時，就能產(chǎn)生孢子，直到子實體完全成熟而干枯時停止生長（圖1C）。

2.2 靈芝出芝動態(tài)變化

靈芝菌絲體長滿瓶后轉移到可控制溫度的栽培室，將溫度控制在25～28℃，使其適合子實體生長。本研究中以第1次觀察到Wzs1出芝時間設為第1天，經(jīng)歷5 d后，達到峰值有33瓶出芝，隨后出芝的數(shù)量逐漸減少，呈明顯的下降趨勢，進入17 d后沒有出芝，表明Wzs1室內出芝時間段為16 d。見圖2。

2.3 靈芝子實體菌蓋形成動態(tài)

從出芝到子實體成熟這一階段需要通風，防止室內CO2過高，阻礙菌蓋成熟。靈芝菌蓋形成時間點變化較大，沒有穩(wěn)定的時間點為菌蓋形成高峰。此外，隨著培養(yǎng)時間延長，菌蓋形成也未成明顯下降趨勢，以第1次觀察到Wzs1菌蓋形成時間設為第1天，經(jīng)歷22 d后，菌蓋形成停止。見圖3。

2.4 靈芝子實體形態(tài)特征

隨著菌蓋生長，菌蓋顏色由米黃色變成紅褐色時，可用利刀沿菌柄底部切斷，由于實驗所栽培靈芝數(shù)量過多，隨機抽取30個靈芝子實體測定形態(tài)特征，如表1。

3 討論

靈芝子實體在17～33℃內可生長，低于20℃生長較慢[8]。本研究中室內栽培靈芝表明，靈芝培養(yǎng)溫度以22～25℃較合適，子實體生長的適宜溫度為25～28℃。菌絲生長階段當室溫達到25℃左右時，注意適當通風降溫，使室溫保持在22～25℃[9]。

靈芝菌絲和子實體生長需要充足氧氣供給，一般菌絲生長階段對氧氣需求不高，但子實體生長更需要足夠氧氣供給，此時如果氧氣供應充足，能促進子實體分化；如果CO2累積過多，子實體難以形成，生長緩慢[10]。空氣中CO2含量對靈芝生長影響較大，CO2含量超過0.1%時，菌蓋難以形成；而形成分支較多的“鹿角狀”畸形；空氣中CO2含量過高，子實體生長緩慢[11]。因此，為保證子實體生長對氧氣的需要，當子實體原基形成時，加強培養(yǎng)室通風，根據(jù)氣溫高低縮短和延長通風時間。

本研究揭示了Wzh1靈芝出芝及菌蓋形成的動態(tài)變化規(guī)律，結合靈芝生長環(huán)境條件要求，可在今后栽培工作中提前了解靈芝生長特征，有效控制環(huán)境條件變化，使其更適合靈芝的生長（圖2、3）。本研究中靈芝菌蓋直徑為（1.57±0.51）cm，菌蓋厚度為（0.89±0.09）cm。呂明亮等研究發(fā)現(xiàn)，大田栽培靈芝子實體菌蓋直徑大于8.6 cm，菌蓋厚度大于1.1 cm。通過對比表明，本研究中室內栽培靈芝子實體明顯小于大田栽培靈芝，這反映室內栽培靈芝在營養(yǎng)供給上的不足，因此對培養(yǎng)基成分及供給量均需改進，以期提高靈芝子實體品質[12]。

參考文獻

[1] Shiao M S. Natural products of the medicinal fungus Ganoderma lucidum： occurrence， biological activities， and pharmacological functions. Chemical Record， 2003（3）： 172-180.

[2] Boh B M， Berovic J S， Lin Z B. Ganoderma lucidum and its pharmaceutically active compounds. Biotechnology Annual Review， 2007， 13： 265-301.

[3] 陳永敢，陳光宙，袁學軍，等. 中國產(chǎn)Ganoderma lucidum的系統(tǒng)發(fā)育學分析及栽培技術研究. 北方園藝，2014（8）：92-96.

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