唐秀鋒 劉本祥 楊家貴 鄔永忠 譚國良 顏忠 牟洪明

摘 要 為了解決室內(nèi)培育大鯢在人工繁殖過程中雌雄發(fā)育不同步的關(guān)鍵問題，對(duì)大鯢的室內(nèi)培育及人工繁殖技術(shù)做了初步研究，結(jié)果表明通過雄鯢提前2～3 d催產(chǎn)，采取勾卵器自泄殖孔牽引雌鯢卵帶排卵能較好的解決雌雄大鯢發(fā)育不同步的問題，從而提高大鯢卵粒受精率。

關(guān)鍵詞 大鯢；室內(nèi)培育；人工繁殖；催產(chǎn)

中圖分類號(hào)：S947.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2016.16.024

知網(wǎng)出版網(wǎng)址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/50.1186.s.20160705.2344.027.html 網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-7-5 23：44：00

大鯢（Andrias davidianus），俗稱“娃娃魚”，是國家二類保護(hù)動(dòng)物，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及廣泛的開發(fā)利用前景。近年來，全國已有多家單位進(jìn)行了大鯢仿生態(tài)、原生態(tài)繁殖，取得一定效果[1]，但大鯢繁殖過程中的雌雄發(fā)育不同步及受精率低的問題仍然較為突出[2]，隨著國家對(duì)人工繁殖的仔二代大鯢實(shí)施標(biāo)識(shí)管理，將有利于大鯢的開發(fā)利用，為了更充分的開發(fā)利用大鯢的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，對(duì)大鯢的室內(nèi)培育及人工繁殖技術(shù)做了初步研究，采用不同的催產(chǎn)方法及人工排卵方式較好地解決了大鯢雌雄發(fā)育不同步的關(guān)鍵問題，取得較好的效果，為大鯢的規(guī)?；斯し敝抽_辟了新的途徑。

1 材料與方法

1.1 水源條件

大鯢親本培育水源為地下水和地表水，地下水流量為12 m3/h，水溫18～20℃，地表水為天然的地表水，水溫8～35℃，地表水經(jīng)砂石簡單過濾，除去水中懸浮物。

1.2 大鯢培育池

大鯢培育池建在室內(nèi)，面積200 m2，白天關(guān)閉窗簾遮光，每口培育池面積為1.2 m×1.6 m的長方形水泥池，池內(nèi)有棲息洞，每池單獨(dú)進(jìn)、排水，池深0.7 m，水深可調(diào)，每口培育池放養(yǎng)1尾大鯢親本。

1.3 親本來源

大鯢親本65尾（50♀∶15♂）是2006年從四川省引進(jìn)的野生大鯢，體質(zhì)健壯、體形較好、年齡均在6齡以上的親本。

1.4 親本培育

1.4.1 餌料投喂

大鯢親本餌料全部投喂活餌料，以30～50 g活鯽魚、鯉魚種為主，每月補(bǔ)充1次泥鰍，每周加餌1次。各培育池的加餌量視各親本生長發(fā)育情況而定，每池保持的餌料魚數(shù)量：4—9月（產(chǎn)卵期間除外）為 15～20尾，10—12月為10～15尾，12—次年3月為3～5尾。全年投喂的餌料魚總量中鯽魚占70%，鯉魚種20%，鰍魚5%，其它餌料5%。

1.4.2 水質(zhì)管理

水深10～20 cm，每周徹底換水2～3次，換水時(shí)要將池底糞便和其他污物清理干凈，常年微流水培育。

1.4.3 水溫調(diào)控

配有3 kW的空調(diào)2臺(tái)，5—9月水溫升至23℃以上，轉(zhuǎn)為地下水，開起空調(diào)，將水溫控制在20～22℃。在10—次年4月，水溫在23℃以下時(shí)，培育室開窗通風(fēng)，保持室內(nèi)空氣清新，空調(diào)停用，加大進(jìn)水量，以自然水溫的地表水培育親本。

1.5 大鯢催產(chǎn)技術(shù)

1.5.1 大鯢親本的雌雄鑒別

繁殖季節(jié)雌性大鯢的腹部稍膨大，泄殖孔周圍無明顯的圓形吸盤狀突起；雄鯢泄殖孔周圍有明顯的圓形吸盤狀突起，突起越明顯，一般發(fā)育較好。

1.5.2 催產(chǎn)藥物及劑量

用類似物（LRH-A2）、絨毛膜（HCG）作催產(chǎn)藥物，能達(dá)到較好的催產(chǎn)效果。催產(chǎn)藥物選用寧波激素廠生產(chǎn)的LRH-A2、HCG。雌雄親本均采用一針注射，藥物劑量雌雄親本相同。催產(chǎn)藥物及劑量為每kg重量LRH-A2 3～8 μg+HCG 500～1000國際單位。

1.5.3 催產(chǎn)方法及時(shí)間

大鯢親本在培育池原池內(nèi)進(jìn)行催產(chǎn)，催產(chǎn)前撈盡餌料魚，水溫控制在20～22℃，催產(chǎn)時(shí)間為8月上中旬，雌雄配比為（5～8）∶1，雄性親本比雌鯢提前65～72 h催產(chǎn)。

1.6 大鯢精液檢查

雄鯢催產(chǎn)96 h后每天采集精液觀察精子活動(dòng)情況，確定精液質(zhì)量較好的大鯢備用。

1.7 大鯢的排卵

方法1：卵帶自行排出。2008—2009年在雌親本注射催產(chǎn)藥物后，定時(shí)巡池，觀察到雌親本有卵帶排出，就及時(shí)將卵帶拉出來。

方法2：勾卵器輔助勾卵。2010—2013年，在雌鯢催產(chǎn)后96～120 h，無卵帶排出的雌鯢用勾卵器輔助將卵帶及時(shí)勾出。排卵工具為勾卵器及排卵布袋，勾卵器為長20～25 cm、前段為勾子狀光滑銅絲，排卵布袋是兩張?jiān)〗碓趥?cè)面用2個(gè)拉鏈縫制而成。

1.8 人工受精

每尾雌鯢親本排卵完畢，將已檢查準(zhǔn)備好的精液1～2 mL注入盛卵的容器里，同時(shí)加入適量的0.6%的生理鹽水，充分?jǐn)噭?，然后靜置3～5 min，即完成人工授精。

1.9 受精卵的孵化

大鯢卵受精后，將受精卵放入避光的孵化車間孵化池進(jìn)行微流水、控溫孵化，水溫通過冷水機(jī)調(diào)節(jié)，孵化期間水溫控制在17～19℃，24～30 h后受精卵出現(xiàn)二分期可計(jì)算受精率，平時(shí)每天將未受精卵和胚胎停止發(fā)育的壞死卵及時(shí)清除，翻動(dòng)受精卵1～2次。

2 結(jié)果與分析

2.1 大鯢親本室內(nèi)培育結(jié)果

通過空調(diào)、地下水和地表水的合理轉(zhuǎn)換，大鯢室內(nèi)培育池的水溫變化在8～23℃，完全能滿足大鯢親本發(fā)育對(duì)水溫的要求。同時(shí)，采用地下水與地表水相結(jié)合的方式培育大鯢親本，在大鯢的非原產(chǎn)地能更好地滿足大鯢親本發(fā)育對(duì)水質(zhì)的要求。

2.2 催產(chǎn)結(jié)果

2.2.1 大鯢精子活力的觀察

雄鯢在催產(chǎn)96 h開始每天都觀察1次精子的活動(dòng)情況，發(fā)育不好的雄鯢精子在96～216 h鏡檢基本不動(dòng)，發(fā)育較好的雄鯢精子活力情況有一定的規(guī)律。從表1可知，雄鯢的精子活力最好的時(shí)間是在催產(chǎn)后168～192 h，1尾好的雄鯢可以配10～20尾雌鯢。

試驗(yàn)觀察表明，水溫18～20℃雌鯢的最佳效應(yīng)時(shí)間在96～120 h，與雄鯢精子活力最好的時(shí)間168～192 h存在差異，這就是大鯢在發(fā)育過程中雌雄發(fā)育不同的問題，如果采用一般魚類的催產(chǎn)方法，雌雄大鯢的卵帶與精液的最佳效應(yīng)時(shí)間就不一致，從而導(dǎo)致無法獲得高的受精率。

2.2.2 雌鯢排卵結(jié)果

水溫在20～22℃，雌鯢在催產(chǎn)后48～200 h內(nèi)都有卵帶自行排出，多年觀察表明，在96～120 h間排出的卵粒受精效果好，提前自行排出的卵粒質(zhì)量較差，受精能力低，而延遲排出的卵粒成深黃色，無光澤，卵粒過熟，受精率低下。2008—2009年采取卵帶自行排出后排卵，雌鯢催產(chǎn)率分別達(dá)到63%、66%，受精率分別為28%、35%；2010—2013年，采取在效應(yīng)時(shí)間96～120 h內(nèi)用勾卵器輔助排卵，催產(chǎn)率在80%以上，受精率在70%以上，明顯比卵帶自行排出的催產(chǎn)率和受精率都高，具體情況見表2。

3 結(jié)論

3.1 雄鯢提前2～3 d催產(chǎn)

水溫18～20℃，雄鯢精子活力好的時(shí)間為催產(chǎn)后168～192 h，而雌鯢卵帶的最佳效應(yīng)時(shí)間為催產(chǎn)后96～120 h，通過雄鯢提前2～3 d催產(chǎn)，能解決雌雄大鯢發(fā)育不同步的問題，從而提高受精率。

3.2 勾卵器輔助勾卵是大鯢較好的排卵方式

人工飼養(yǎng)的大鯢由于餌料豐富，活動(dòng)量小，親鯢體型較肥，即使是到了效應(yīng)時(shí)間，多數(shù)雌鯢都無法自行排出卵帶，從而導(dǎo)致催產(chǎn)率和受精率低下。雌性大鯢卵粒的最佳受精時(shí)間在催產(chǎn)后96～120 h，根據(jù)大鯢卵粒間有卵帶相連的特殊性，采取勾卵器自泄殖孔牽引卵帶排卵，在最佳排卵時(shí)間將卵粒一次性全部排出，進(jìn)行人工授精，可以在卵粒的最佳效應(yīng)時(shí)間內(nèi)很好的解決雌鯢卵粒無法及時(shí)排出的問題，大大提高了親本的產(chǎn)卵數(shù)量和卵粒的受精率。

參考文獻(xiàn)：

[1]李成.幾種大鯢繁育模式的比較[J].當(dāng)代水產(chǎn)， 2013（12）：78-79.

[2]李新民.全人工條件下大鯢繁殖生物學(xué)初報(bào)[J].河北漁業(yè)，2007（2）：43-45.

（責(zé)任編輯：敬廷桃）