郭巖松　柳海艷　鐘贛生　許皖　張建美　劉珍清　修琳琳　王思睿

100029　北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院[郭巖松(碩士研究生)、許皖(碩士研究生)、張建美(碩士研究生)、修琳琳(博士研究生)、王思睿(碩士研究生)],基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院方藥系(鐘贛生、柳海艷),科研實(shí)驗(yàn)中心(劉珍清)

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甘遂半夏湯加減甘遂及不同品種甘草對(duì)腹水模型大鼠心肝腎功能的影響

郭巖松柳海艷鐘贛生許皖張建美劉珍清修琳琳王思睿

100029北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院[郭巖松(碩士研究生)、許皖(碩士研究生)、張建美(碩士研究生)、修琳琳(博士研究生)、王思睿(碩士研究生)],基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院方藥系(鐘贛生、柳海艷),科研實(shí)驗(yàn)中心(劉珍清)

【摘要】目的通過(guò)分析含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水模型大鼠的心肝腎臟功能指標(biāo)的變化，探討甘草品種對(duì)甘遂甘草配伍“反”或“不反”的影響。方法Wistar大鼠220只隨機(jī)分成11組，空白組、模型組、陽(yáng)性藥組、全方炙甘草組、全方脹果組、全方光果組、去遂炙甘草組、去遂脹果組、去遂光果組、去草組、去草遂組，除空白組和模型組外連續(xù)給藥10天，然后腹主動(dòng)脈取血，離心，檢測(cè)心肝腎功能相關(guān)指標(biāo)。分析方法選擇方差分析，方差齊采用LSD方法，方差不齊采用Dunnet T3分析方法。結(jié)果(1)在肝功能中TP和ALB合成方面，全方(炙脹果甘草)組的藥效相對(duì)優(yōu)于全方(炙光果甘草)組和全方(炙甘草)組，且三個(gè)全方組去掉一味反藥或兩味反藥組在促進(jìn)由于Walker-256細(xì)胞造成的大鼠肝臟ALB和TP合成降低方面的療效優(yōu)于三個(gè)全方組。(2)含甘遂與不同品種甘草反藥組合的甘遂半夏湯全方在對(duì)Walker-256細(xì)胞造成的大鼠心功能、腎功能和肝功能中AST的含量、ALT的含量、AST/ALT比值和ALP含量變化方面無(wú)明顯影響。結(jié)論甘草、光果甘草和脹果甘草這三個(gè)不同品種的甘草對(duì)甘遂甘草反藥組合在心功能、腎功能和肝功能中AST的含量、ALT的含量、AST/ALT比值和ALP含量方面無(wú)明顯影響，但在改善由于Walker-256細(xì)胞造成的大鼠肝臟蛋白合成異常方面，脹果甘草優(yōu)于光果甘草和甘草。

【關(guān)鍵詞】十八反；甘遂甘草反藥組合；甘草；光果甘草；脹果甘草

甘遂甘草反藥組合屬于中藥“十八反”的范疇，十八反到底能否同用，歷代醫(yī)家一直在爭(zhēng)論，有的醫(yī)家從用藥安全的考慮認(rèn)為“十八反”不宜同用，有的人則認(rèn)為“十八反”也可以合理的運(yùn)用來(lái)治療某些疑難病癥，漢代醫(yī)家張仲景在《金匱要略》中就記載了含有甘遂甘草反藥組合的方劑甘遂半夏湯，主治留飲。本課前期研究得出的結(jié)論為：甘遂半夏湯中甘遂甘草以低劑量(按大鼠體質(zhì)量甘遂0.11 g/kg，炙甘草1.67 g/kg)配伍應(yīng)用時(shí)，在利水作用等方面表現(xiàn)出較好的療效，并且毒性相對(duì)較小[1-2]。甘草作為一味常用中草藥，產(chǎn)地和品種對(duì)其化學(xué)成分和藥理作用影響很大，而甘遂半夏湯原方并未指明甘草的具體品種，《中華人民共和國(guó)藥典》中甘草的來(lái)源共有三個(gè)，即豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草GlycyrrhizainflateBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根及根莖，故本實(shí)驗(yàn)以甘草不同品種作為考察條件，探討不同品種甘草是否會(huì)影響甘遂甘草反藥組合的藥效和毒性。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

Wistar大鼠，SPF級(jí)，雄性，體質(zhì)量180～200 g，220只，由維通利華(北京)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司提供。許可證號(hào):SCXK(京)2012-0001。

1.2實(shí)驗(yàn)藥物

醋甘遂:為大戟科植物甘遂EuphorbiakansuiT. N. Liou ex T. P. Wang的干燥塊根。由安徽豐原銅陵中藥飲片廠提供。批號(hào)120301。

炙甘草:為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.的干燥根和根莖的炮制品，安徽豐原銅陵中藥飲片廠提供和炮制。批號(hào)120201。

炙光果甘草:為豆科植物光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根和根莖。由安徽豐原銅陵中藥飲片廠提供和炮制，批號(hào)120201。

炙脹果甘草:為豆科植物脹果甘草GlycyrrhizainflateBat.干燥根和根莖的炮制品，由安徽豐原銅陵中藥飲片廠提供和炮制。批號(hào)120201。

法半夏:為天南星科植物半夏Pinelliaternate(Thunb) Breit.的塊莖，經(jīng)甘草和石灰炮制的炮制品，由安徽豐原銅陵中藥飲片廠提供。批號(hào)100701，

白芍:為毛莨科植物芍藥PaeonialactifloraPall.的根，由安徽豐原銅陵中藥飲片廠提供。

呋塞米片:由江蘇亞邦愛(ài)普森藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)H32021428。

1.3藥物制備

甘遂半夏湯處方組成：醋甘遂0.11 g/kg(研粉末)，炙甘草/炙脹果甘草/炙光果甘草1.67 g/kg，法半夏0.9 g/kg，白芍1.5 g/kg，蜂蜜1.5 g/kg。

全方炙甘草藥液(以下簡(jiǎn)稱全方炙甘草組)的制備:將炙甘草、法半夏、白芍加水浸泡煎煮兩次，合并藥液后加入蜂蜜，放至水浴鍋上濃縮至1.14 g/mL，臨用時(shí)按比例加入醋甘遂粉末,加入水至0.568 g/mL。

全方炙脹果甘草藥液(以下簡(jiǎn)稱全方脹果組)的制備:同上，甘草品種更換為炙脹果甘草。

全方炙光果甘草藥液(以下簡(jiǎn)稱全方光果組)的制備:同上，甘草品種更換為炙光果甘草。

全方炙甘草去醋甘遂藥液(以下簡(jiǎn)稱去遂炙甘草組)的制備: 同全方炙甘草藥液的制備，不加入醋甘遂,加水稀釋至0.557 g/mL。

全方炙光果甘草去醋甘遂藥液(以下簡(jiǎn)稱去遂光果組)的制備:同上，甘草品種更換為炙光果甘草。

全方炙脹果甘草去醋甘遂藥液(以下簡(jiǎn)稱去遂脹果組)的制備:同上，甘草品種更換為炙脹果甘草。

全方去甘草藥液(以下簡(jiǎn)稱去草組)的制備:同全方炙甘草藥液的制備，煎煮時(shí)不加入炙甘草稀釋至0.401 g/mL。

全方去甘草和醋甘遂藥液(以下簡(jiǎn)稱去草遂組)的制備:同上，臨用時(shí)不加醋甘遂粉末。稀釋至0.39 g/mL。

陽(yáng)性藥液的制備：取呋噻米片，加水充分溶解，稀釋至0.42 g/mL。

1.4實(shí)驗(yàn)試劑

丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase，ALT)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：207192G)，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：207251G)，堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：207071F)，肌酐(creatinine，CRE)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：112261K)，尿素(blood urea nitrogen，BUN)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：206151F)，總蛋白(total protein，TP)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：109291H)，白蛋白(albumin，ALB)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：208162G)，乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：209137L)，肌酸激酶(creatine kinase，CK)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)：206146K)，均購(gòu)自北京利德曼生化股份有限公司。

1.5實(shí)驗(yàn)儀器

臺(tái)式高速冷凍離心機(jī):型號(hào)為TGL-16A，長(zhǎng)沙平凡儀器儀表有限公司生產(chǎn)；全自動(dòng)生化儀(BECKMAN COULTER，CX4PRO)。

1.6模型的復(fù)制

將凍存于-70℃冰箱中的Walker-256細(xì)胞于37℃水浴復(fù)蘇，分為0.6 mL、0.8 mL、1 mL劑量注入大鼠體內(nèi),長(zhǎng)出腹水后收集腹水，再以每只1 mL的劑量注入新一批大鼠體內(nèi)進(jìn)行二次傳代，二次傳代的大鼠長(zhǎng)出腹水后，收集淡黃色的腹水進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),以1.68×106個(gè)細(xì)胞/mL的濃度注入正式實(shí)驗(yàn)的大鼠體內(nèi),每只注射1 mL[1]。

1.7分組及給藥

將wistar大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為：空白組、模型組、呋塞米陽(yáng)性藥組、全方炙甘草組、全方炙甘草去醋甘遂組(以下簡(jiǎn)稱去遂炙甘草組)、全方炙脹果甘草組(以下簡(jiǎn)稱全方脹果組)、全方炙脹果甘草去醋甘遂組(以下簡(jiǎn)稱去遂脹果組)全方炙光果甘草組(以下簡(jiǎn)稱全方光果組)、全方炙光果甘草去醋甘遂組，(以下簡(jiǎn)稱去遂光果甘草組)，全方去甘草組(以下簡(jiǎn)稱去草組)全方去甘草甘遂組，(以下簡(jiǎn)稱去草遂組)，每組20只大鼠。除正常喂養(yǎng)外，每天上午除空白組、模型組外，其余各組灌胃給予相應(yīng)藥物，空白組和模型組給予蒸餾水灌胃，所有給藥組灌胃體積均為1 mL/100 g大鼠體質(zhì)量。

注：因?yàn)樗斓哪Ｐ蜑閻盒愿顾势骄拷M有4～6只動(dòng)物死亡。

1.8樣本處理方法及觀察指標(biāo)

給藥10天后所有大鼠禁食不禁水12小時(shí)，次日用水合氯醛麻醉,腹主動(dòng)脈取血，用高速冷凍離心機(jī)3000 rpm離心10分鐘，分離血清，用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)心肝腎功能相關(guān)指標(biāo)。

1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

生化指標(biāo)采用SPSS 21.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，分析方法采用單因素方差分析，方差齊則以LSD為參照標(biāo)準(zhǔn)，方差不齊以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1含有不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水大鼠的肝功能的影響

2.1.1AST統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，全方脹果組和去遂光果組AST升高且具有顯著性差異(P<0.01)；去遂炙甘草組、去遂脹果組、去草組和去草遂組AST升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。與模型組相比，各給藥組AST含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，AST含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的AST含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.1.2ALT統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，去遂光果組ALT含量升高，且具有顯著性差異(P<0.01)，模型組和其余各給藥組ALT含量均有升高的趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與模型組相比，各給藥組的ALT含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，ALT含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的ALT含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。2.1.3AST/ALT比值統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，模型組AST/ALT有升高的趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，陽(yáng)性藥組AST/ALT值升高且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，全方脹果組、全方光果組、去遂炙甘草組和去草組的AST/ALT升高且具有顯著性差異(P<0.01)，其他各組與空白組相比AST/ALT僅有升高的趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與模型組相比，各給藥組AST/ALT值有降低的趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，AST/ALT含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的AST/ALT比值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.1.4ALP統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，模型組、陽(yáng)性藥組、全方脹果組、去遂光果組、全方炙甘草組的ALP降低且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01或P<0.05)。其他組與空白組相比ALP含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與模型組相比，各給藥組ALP含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，ALP含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的ALP含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.1.5ALB統(tǒng)計(jì)結(jié)果以LSD為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，模型組的ALB含量降低具有顯著性差異(P<0.01)，去草組ALB有降低的趨勢(shì)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，去遂炙甘草組和去遂光果組ALB降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，其他各給藥組與空白組相比均有顯著性差異(P<0.01)。與模型組相比，陽(yáng)性藥組ALB有升高的趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其他各給藥組ALB升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01或P<0.05)。與全方炙甘草組相比，去遂炙甘草組、去草組、去草遂組的ALB升高，且具有顯著性差異(P<0.01)。與全方脹果組相比，去草組和去草遂組ALB升高具有顯著性差異(P<0.01)。與全方光果組相比，去草組ALB含量升高且具有顯著性差異(P<0.01)。三個(gè)全方組的ALB含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.1.6TP統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，模型組、陽(yáng)性藥組和全方炙甘草組TP含量降低具有顯著性差異(P<0.01)，與模型組相比，全方炙甘草組、全方光果組和陽(yáng)性藥組TP含量有升高趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，全方脹果組TP含量升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，其他各給藥組與模型組相比TP含量升高具有顯著性差異(P<0.01)。與全方炙甘草組相比，去遂炙甘草組、去草組、去草遂組TP升高，具有顯著性差異(P<0.01)。與全方脹果組相比，去草組TP含量升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。與全方光果組相比，去遂光果組、去草組、去草遂組的TP不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的TP含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。肝功能具體結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水大鼠肝功能的影響±s)

注： 與空白組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05。與全方(炙甘草)組比較cP<0.05；與全方(炙脹果甘草)組比較，dP<0.05，與全方(炙光果甘草)組比較eP<0.05。

表2　含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)癌性腹水大鼠腎功能的影響±s)

注： 與空白組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05。與全方(炙甘草)組比較cP<0.05；與全方(炙脹果甘草)組比較，dP<0.05，與全方(炙光果甘草)組比較eP<0.05。

表3　含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水模型大鼠心功能的影響±s)

注： 與空白組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05。與全方(炙甘草)組比較cP<0.05；與全方(炙脹果甘草)組比較，dP<0.05，與全方(炙光果甘草)組比較eP<0.05。

2.2含有不同品種甘草的甘遂半夏湯加減甘遂甘草反藥組合對(duì)腹水大鼠的腎功能的影響情況

2.2.1CRE統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，模型組、去遂炙甘草組、去遂脹果組、全方光果組和陽(yáng)性藥組CRE含量有升高趨勢(shì)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其余各組與CRE含量均升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比，全方脹果組和去草組CRE含量升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，CRE含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的CRE含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.2.2BUN統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，模型組、全方脹果組、去遂炙甘草組、去遂光果組和陽(yáng)性藥組BUN含量升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01或P<0.05)。與模型組相比，各給藥組BUN含量不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，BUN含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的BUN含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。腎功能具體結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3含有不同品種甘草的甘遂半夏湯加減甘遂甘草反藥組合對(duì)腹水大鼠模型的心功能的影響情況

2.3.1LDH統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組比各組LDH有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與模型組比較去遂光果組LDH升高且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，LDH含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的LDH含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.3.2CK統(tǒng)計(jì)結(jié)果以Dunnett T3為參照標(biāo)準(zhǔn)。與空白組相比，除去遂脹果組和全方光果組CK含量有降低趨勢(shì)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)外，模型組和其他各給藥組的CK含量均降低，且具有顯著差異(P<0.01)。與模型組相比，去遂(炙甘草)組CK含量升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。三個(gè)全方組分別與相對(duì)應(yīng)的去掉一味或兩味反藥組相比，CK含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。三個(gè)全方組的CK含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。心功能具體結(jié)果見(jiàn)表3。

3討論

3.1含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水模型大鼠肝功能的影響

血清中AST的含量、ALT的含量以及AST/ALT比值對(duì)臨床肝臟病變的診治有一定幫助。肝炎病變輕時(shí)AST/ALT比值下降，重時(shí)比值上升，比值逐漸升高往往表示肝功能損害持續(xù)加重[3]。堿性磷酸酶ALP在體內(nèi)廣泛存在，當(dāng)肝細(xì)胞受損，血中ALP便升高[4]。但是當(dāng)腎臟出現(xiàn)腫瘤所致的惡病質(zhì)等可能會(huì)出現(xiàn)血清中ALP的降低[5]。

大鼠血清中AST、ALT、AST/ALT比值和ALP的結(jié)果顯示，在全方條件下，與空白組比較，全方脹果組大鼠血中AST含量及AST/ALT的比值升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而模型組、陽(yáng)性藥組、全方炙甘草組和全方脹果組大鼠血清中ALP的含量降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其原因可能是Walker-256細(xì)胞造成了大鼠腎臟功能的衰竭或惡病質(zhì)進(jìn)而導(dǎo)致大鼠血中ALP含量降低。而與模型組比較含甘遂與不同品種甘草反藥組合的甘遂半夏湯全方在改善上述肝功能指標(biāo)方面均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，由此說(shuō)明含甘遂與不同品種甘草反藥組合的甘遂半夏湯全方對(duì)大鼠肝功能中AST含量、ALT含量、AST/ALT比值和ALP含量方面未表現(xiàn)出明顯的藥效，但也未表現(xiàn)出明顯的毒性，且甘草的品種對(duì)此無(wú)明顯影響。

在全方去掉一味或兩味反藥的條件下，全方去掉其中一味或兩味反藥組與相對(duì)應(yīng)的全方組相比，上述幾個(gè)肝功能指標(biāo)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明全方去掉一味或兩味反藥對(duì)上述幾項(xiàng)肝功能指標(biāo)無(wú)明顯影響。全方去掉一味或兩味反藥在上述幾個(gè)肝功能指標(biāo)方面未表現(xiàn)出明顯的藥效，也未表現(xiàn)出明顯的毒性。

有研究顯示，肝功能障礙常能導(dǎo)致TP降低[6]。其中ALB則僅由肝臟合成，在肝臟受到損害時(shí)，ALB的合成、細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)和釋放發(fā)生障礙, 則可能引起血清內(nèi)ALB減少[7]。TP和ALB檢測(cè)結(jié)果均證明，Walker-256細(xì)胞造成了大鼠肝臟功能的損傷。

在全方條件下，與空白組相比三個(gè)全方組的ALB和TP含量均降低或降低具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，全方脹果組ALB和TP含量較模型組均升高且有差異，全方炙甘草組和全方光果組僅ALB含量較模型組升高且有差異，而TP含量與模型組相比無(wú)明顯差異，故綜合全方條件下的結(jié)果來(lái)看，全方脹果組在改善由于Walker-256細(xì)胞造成的大鼠肝臟ALB和TP合成降低方面的療效優(yōu)于全方炙甘草組和全方光果組。

在全方去掉一味或兩味反藥的條件下，與空白組相比較，全方去掉一味或兩味反藥組中僅去草組的ALB僅有降低的趨勢(shì)，其他給藥組均降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。全方去掉一味或兩味反藥組的TP含量與空白組相比僅有降低的趨勢(shì)，無(wú)明顯差異。與模型組比較，全方去掉一味或兩味反藥組的TP和ALB含量均升高且有差異。與全方炙甘草組相比，去遂炙甘草組、去草組、去草遂組的ALB和TP含量均升高；與全方光果組相比，去草組的ALB升高，TP含量無(wú)明顯變化，去遂光果組和去草遂組ALB和TP含量均無(wú)明顯變化，與全方脹果組相比，去草組ALB含量均升高，去遂脹果組ALB和TP含量無(wú)明顯變化，去草遂組ALB含量升高TP含量無(wú)明顯變化，故在改善由于walker-256細(xì)胞造成的大鼠肝臟ALB和TP合成降低方面，全方去掉一味或兩味反藥組優(yōu)于相應(yīng)的全方組。

3.2含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水模型大鼠腎功能的影響

BUN與CRE是臨床常用的評(píng)價(jià)腎功能的指標(biāo)，當(dāng)腎功能不全時(shí)，肌酐在體內(nèi)蓄積升高成為對(duì)人體有害的毒素[8]。在腎功能損害早期，血尿素氮BUN可在正常范圍，當(dāng)腎小球功能嚴(yán)重受損時(shí)，血尿素氮水平才迅速升高[8]。

在全方條件下，與空白組相比全方炙甘草組的BUN和CRE均具有升高的趨勢(shì)或升高具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與模型組相比全方脹果組的CRE升高且有差異，其他兩個(gè)全方組的CRE含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各給藥組的BUN含量較模型組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。全方脹果組CRE含量較模型組升高是否屬于藥物的毒性還需進(jìn)一步研究。故含不同品種甘草的甘遂半夏湯全方未表現(xiàn)出明顯的藥效，且甘草品種對(duì)此無(wú)明顯的影響，是否表現(xiàn)出毒性有待于進(jìn)一步研究。

在全方去掉一味或兩味反藥的條件下，與空白組相比，各給藥組的CRE和BUN含量有升高的趨勢(shì)或具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與模型組相比，去草組的CRE含量升高且有差異。但是否屬于藥物的毒性需要進(jìn)一步研究，其他給藥組的BUN和CRE含量?jī)H有升高的趨勢(shì)。全方去掉一味或兩味反藥組的BUN和CRE含量較相對(duì)應(yīng)的全方組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。故全方去掉一味或兩味反藥組在腎功能指標(biāo)CRE和BUN方面未表現(xiàn)出明顯的藥效，是否表現(xiàn)出毒性有待于進(jìn)一步研究。

3.3含不同品種甘草的甘遂半夏湯加減反藥組合對(duì)腹水模型大鼠心功能的影響

CK和LDH是臨床常用的評(píng)價(jià)心臟功能的指標(biāo)。腫瘤等疾病致機(jī)體免疫功能下降可以引起外周血中CK活性的下降[9]。LDH含量常用于診斷心肌梗死，但是由于其分布廣泛, 故特異性較差[10]。

在全方條件下，與空白組相比，三個(gè)全方組的CK含量均有降低的趨勢(shì)或降低具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與模型組相比三個(gè)全方組CK含量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明含甘遂與不同品種甘草反藥組合的甘遂半夏湯全方對(duì)大鼠心功能CK含量方面未表現(xiàn)出明顯的藥效，但也未表現(xiàn)出明顯的毒性，且甘草的品種對(duì)此無(wú)明顯影響。

在全方去掉一味或兩味反藥組合的條件下，與空白組相比，全方去掉一味或兩味反藥組的CK含量均有降低的趨勢(shì)或具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與模型組相比去遂炙甘草組CK含量升高且有差異，是否屬于藥效還需要進(jìn)一步研究。全方去掉其中一味或兩味反藥組與相對(duì)應(yīng)的全方組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。故全方去掉一味或兩味反藥組在CK方面未表現(xiàn)出明顯的毒性，是否表現(xiàn)出藥效有待于進(jìn)一步研究。

本實(shí)驗(yàn)有可能在取材時(shí)出現(xiàn)了溶血現(xiàn)象，而LDH含量對(duì)溶血的敏感度較大，造成了數(shù)據(jù)離散度大，故含有甘草不同品種的甘遂半夏湯全方及去掉其中一味或兩味反藥對(duì)LDH的影響還需進(jìn)一步研究。

綜上所述，含甘遂與不同品種甘草反藥組合的甘遂半夏湯全方在對(duì)Walker-256細(xì)胞造成的大鼠心功能、腎功能和肝功能中AST的含量、ALT的含量、AST/ALT比值和ALP含量方面無(wú)明顯影響，即甘草品種對(duì)上述方面無(wú)明顯影響，且甘遂甘草反藥組合對(duì)上述方面也無(wú)明顯影響。而在肝功能中TP和ALB合成方面，全方脹果組的藥效相對(duì)優(yōu)于全方光果組和全方炙甘草組，且三個(gè)全方組去掉一味反藥或兩味反藥組在促進(jìn)由于Walker-256細(xì)胞造成的大鼠肝臟ALB和TP合成降低方面的療效優(yōu)于三個(gè)全方組。

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(本文編輯： 禹佳)

Comparing the effect ofGansuiBanxiadecoction plus or reduce kansui and varieties of glycyrrhiza on heart, liver and kidney function of ascites model rat

GUOYan-song，LIUHai-yan，ZHONGGan-sheng，etal.

SchoolofBasicMedicalSciences,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,ChinaCorrespondingauthor：ZHONGGan-sheng，E-mail：zhonggansheng@sohu.com

【Abstract】ObjectiveTo analyze the changes of varieties glycyrrhiza in modified Gansui Banxia decoction on heart liver and kidney function of malignant ascites rat model , and to explore the effects of glycyrrhiza varieties on the incompatible herb. Methods220 Wistar rats were randomly divided into blank group, model group, positive group, the complete formula with Glycyrrhiza uralensis Fisch. group, the complete formula with Glycyrrhiza inflata Bat.group, the complete formula with Glycyrrhiza glabra L. group, the Glycyrrhiza uralensis Fisch. without kansui group, the Glycyrrhiza inflata Bat.without kansui group, the Glycyrrhiza glabra L. without kansui group, Gansui Banxia decoction without glycyrrhiza group, Gansui Banxia decoction without glycyrrhiza and kansui group, except the blank group and model group, other groups were intragastric administration for 10 days, the blood simple was collected to detect relevant indicators. The single factor ANOVA and Dunnet T3 analytical method was used for statistics. ResultsThe effect of TP and ALB synthesis in the complete formula with Glycyrrhiza inflata Bat. group was better than that in the complete formula with Glycyrrhiza glabra L. group and Glycyrrhiza uralensis group, and the whole prescription was better than modified prescription. There had no obvious effect on AST, ALT, AST/ALT and ALP in the Gansui Banxia decoction with varieties glycyrrhiza. ConclusionThere had no obvious effect on AST, ALT, AST/ALT and ALP in the Gansui Banxia decoction with varieties glycyrrhiza, but the improvement action of Glycyrrhiza inflata Bat. in protein synthesis was better than Glycyrrhiza glabra L. and Licorice.

【Key words】Eighteen incompatible medicaments;Combination of incompatible herb of kansui and glycyrrhiza；Glycyrrhiza uralensis Fisch.；Glycyrrhiza glabra L.;Glycyrrhiza inflata Bat.

(收稿日期：2016-01-05)

【中圖分類號(hào)】R285.5

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

doi：10.3969/j.issn.1674-1749.2016.05.003

作者簡(jiǎn)介：郭巖松(1987- )，2013級(jí)在讀碩士研究生。研究方向：中藥藥性理論研究。E-mail：gys_381878118@sina.com通訊作者： 鐘贛生(1961- )，碩士，教授，博士生導(dǎo)師。研究方向：中藥藥性理論研究。E-mail：zhonggansheng@sohu.com

基金項(xiàng)目：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)(2011CB505306)；北京中醫(yī)藥大學(xué)2016年度基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目(中青年教師類)(2016-JYB-JSMS-005)