李曉艷　劉　杰　劉義偉　嚴(yán)　銳　許義紅　李　香

貴州省黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，貴州　都勻　558000

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藥物研究

不同產(chǎn)地八月瓜總黃酮的含量比較

李曉艷劉杰劉義偉嚴(yán)銳許義紅李香*

貴州省黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，貴州都勻558000

【摘要】目的：紫外分光光度法測定不同產(chǎn)地八月瓜中總黃酮的含量。方法：以70%乙醇、80℃水浴回流1h，料液比1∶25，測定波長510nm。結(jié)果：總黃酮回歸方程為C=9.452×10(-2)A-4.362×10(-3)(R=0.9992)，在0.0154～0.0769mg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，平均加樣回收率為98.90%(RSD為1.91%)。結(jié)論：不同產(chǎn)地八月瓜總黃酮含量存在一定差異。

【關(guān)鍵詞】八月瓜；不同產(chǎn)地；總黃酮；紫外分光光度法

八月瓜為三葉木通Akebiatrifoliate(Thunb.)Koidz的果實，具有消腫、鎮(zhèn)痛、通乳、抗癌的作用。其主要化學(xué)成分為齊墩果酸、黃酮、多糖等成分[1-2]。實驗采用紫外分光光度法測定5個不同產(chǎn)地八月瓜中總黃酮含量，為不同產(chǎn)地八月瓜的質(zhì)量研究提供依據(jù)。

1儀器與材料

1.1儀器紫外可見分光光度計(GBC cintra 20 澳大利亞)；WS205十萬分之一電子天平(瑞士梅特公司)；DZG-6000電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海森信實驗儀器有限公司)；HA-4恒溫水浴鍋(常州澳華儀器有限公司)；HS10260D超聲波清洗機。1.2材料葡萄糖(批號：20141110，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心)；蘆丁對照品(批號：0080-9705，中國藥品生物制品檢定所);所用試劑均為分析純。八月瓜藥材采于貴州云頂、大定、云霧、王司、都勻，由黔南民族醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校李香副教授鑒定為木通科木通屬落葉木質(zhì)藤本植物Akebiatrifoliate(Thunb.)Koidz的果實。

2方法與結(jié)果

2.1波長的確定取蘆丁對照品及八月瓜樣品的鋁配合物測定液，以相應(yīng)試劑為空白對照，在波長200～600nm掃描，掃描結(jié)果顯示兩者在510nm處有最大吸收，故實驗選取510nm作為測定波長。

2.2對照品溶液的制備精密稱量蘆丁對照品25.64mg，置50ml容量瓶中，加入60%的乙醇定容至刻度，搖勻，即配制成濃度為0.5128mg/ml的對照品溶液。

2.3供試液的制備[3]稱取干燥至恒重、過四號篩的八月瓜藥材約0.1 g，加入2.5ml的70%的乙醇80℃回流1h。過濾，水浴濃縮揮干溶劑。加入60%乙醇微熱溶解轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中，定容至刻度即得供試液。取0.5ml的各樣品溶液至10ml的試管中，加入1ml的5%NaNO2溶液，搖勻，放置5min，加入1ml的10%Al(N03)3溶液，搖勻，放置5min，加入5ml的6%NaOH溶液，用60%乙醇定容至刻度，搖勻，放置5min，作為待測液。

2.4方法學(xué)考察[4]

2.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品母液0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5ml置10ml試管中。加5% NaNO21.0ml，搖勻放置5min；加10% Al(N03)31.0ml，搖勻放置5min；加6%NaOH溶液5.0ml，加60%乙醇至刻度，搖勻放置5min，得濃度為0.0154、0.0256、0.0359、0.0462、0.0564、0.0667、0.0769mg/ml的對照品溶液。以相應(yīng)試劑作空白對照，于510nm處測定吸光值。得回歸方程為：C=9.452×10-2A-4.362×10-3(R=0.9992)(C為濃度，A為吸光度)其。表明吸光度與濃度在0.0154～0.0769mg范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

2.4.2精密度實驗精密稱取八月瓜藥材粉末約0.1 g，按“2.3”項制備供試液及顯色。以相應(yīng)試劑作空白對照，在510nm波長處測定吸光值，重復(fù)測定6次，記錄吸光值，總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD為0.71%。

2.4.3穩(wěn)定性實驗精密稱取八月瓜粉末約0.1g，同“2.3”項操作，以相應(yīng)試劑作空白對照，在510nm波長處測定吸光度，每0.5h測定一次吸光值，共測定7次。記錄吸光度，總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD為1.78%，表明在3h內(nèi)樣品溶液基本無變化。

2.4.4重復(fù)性實驗按“2.3”項操作，制備供試液6份。進行顯色。以相應(yīng)試劑作空白對照，于510nm處測定吸光值，記錄吸光度，總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD為1.54%，結(jié)果表明本方法重復(fù)性良好。

2.4.5回收率實驗精密稱取八月瓜粉末9份,每份約為0.1g，按80%、100%、120%比例量加入已配制好蘆丁對照品溶液。按“2.3”項制備供試液并顯色。以相應(yīng)試劑作空白對照，于510nm處測定吸光值，記錄吸光度,平均回收率為98.90%，總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD為1.91%，表明試驗方法可行。見表1。

表1　回收率實驗(n=9)

注：回收率%=(測得總量-樣品含量)/加樣量×100%。

2.5樣品含量測定取5種不同產(chǎn)地八月瓜，每個產(chǎn)地采集不同3個區(qū)域，各1.0g，據(jù)“2.3”項制備供試液，測定吸光度，計算各產(chǎn)地總黃酮含量。結(jié)果見表2。

表2　樣品總黃酮含量測定(n=5)

3討論

八月瓜作為藥食兩用的一種野生中藥，具有抗菌、抗腫瘤作用,實驗以黃酮成分作為測定指標(biāo)，采用分光光度法測定貴州不同產(chǎn)地八月瓜總黃酮含量，為八月瓜更好的開發(fā)研究提供一定依據(jù)。

實驗中，云頂與王司兩個產(chǎn)地的總黃酮含量相對高，不同產(chǎn)地的含量存在一定差異。

參考文獻

[1]劉桂艷，王曄.木通屬植物木通化學(xué)成分及藥理活性研究概況[J].中國藥學(xué)雜志，2004，39(5)：330-332.

[2]李金光，孿嘉瑞．三葉術(shù)通果實生物學(xué)特征盈營養(yǎng)成分的研究[J].廣西植物，1991,11(2):189-192.

[3]李香，孫濟平，彭小冰.三葉木通中總黃酮的提取工藝研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2008，10(12)：152-153.

[4]趙虹橋，唐克華.小血藤總黃酮的提取研究[J].食品科學(xué)，2007，27(7)：158-161.

the Total Flavonoids Content Comparisonof Holboellia latifolia in Different Regions

LI XiaoyanLIU JieLIU YiweiYAN RuiXU YihongLI Xiang*

Qiannan Medical College for Nationalities,Duyun 558000，China

Abstract:Objective To establish a method of determining the total flavonoids content of Holboellia latifolia in different regions by Uv-spectrophotometry.Methods With 70% ethanol, water circumfluence for an hour in 80℃,ratio of solid to liquid 1∶25,and detection wavelength 510nm.Result The total flavonoids has a good linear relationship in 0.0154-0.0769mg.The regression equation is C=9.452×10(-2)A-4.362×10(-3)(R=0.9992). And the average sample recovery rate is 98.90%(RSD=1.91%).Conclusion The total flavonoids content of Holboellia latifolia has some differences in different regions.

Key words:Holboellia latifolia;different regions; total flavonoids;Uv- spectrophotometry

(收稿日期：2016.01.22)

【中圖分類號】R284.1

【文獻標(biāo)志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)07-0013-02

通信作者：李香，女，碩士，副教授，主要從事中藥質(zhì)量控制及成分研究。

作者簡介：李曉艷，女，本科，助教，主要從事藥物質(zhì)量控制及藥理作用研究。E-mail:179268883@qq.com