雷立 任宏力 李惠民 高吉仁 何西珍

摘 要：采用HPLC法測定了商洛五縣區(qū)14個(gè)樣方點(diǎn)的連翹藥材中連翹苷、連翹酯苷A含量，采用理化分析法進(jìn)行土壤因子的測定，并研究了連翹有效成分含量與土壤因子的關(guān)系。結(jié)果顯示：有機(jī)質(zhì)、速效鉀與連翹苷的含量呈極顯著正相關(guān)，速效鉀與連翹酯苷A的含量呈顯著正相關(guān)。土壤中豐富的有機(jī)質(zhì)、速效鉀供應(yīng)會(huì)促進(jìn)連翹藥材體內(nèi)連翹苷的形成和積累，但過多的有機(jī)質(zhì)和堿解氮不利于連翹酯苷A的積累。近堿性（平均pH值為7.236）土壤條件會(huì)促進(jìn)連翹藥材中連翹苷的積累而抑制連翹酯苷A的積累。因此，無論是選擇適宜產(chǎn)地或是實(shí)施科學(xué)施肥，都應(yīng)重視和考慮有機(jī)質(zhì)、速效鉀、堿解氮及土壤pH值對(duì)連翹藥材質(zhì)量的影響。

關(guān)鍵詞：連翹苷；連翹酯苷A；HPLC；土壤因子；相關(guān)分析

中圖分類號(hào)：S567.1+9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2016）05-0055-04

Abstract The contents of forsythin and forsythiaside A in Fructus Forsythiae from 14 sampling points of five counties in Shangluo were tested using HPLC， additionally， the edaphic factors were analyzed by physical and chemical analysis method to get the relationship between the active ingredient contents of Fructus Forsythiae and edaphic factors. The results indicated that the content of forsythin showed highly significant correlations with organic matter and available potassium， and the content of forsythiaside A was significantly correlated with available potassium. The abundant organic matter and available potassium contents in the soil could promote the formation and accumulation of forsythin in Fructus Forsythiae， while redundant organic matter and available nitrogen contents were not good for the accumulation of forsythiaside A. The nearly alkaline soil condition with the average pH value of 7.236 could promote the accumulation of forsythin but prevent that of forsythiaside A. Therefore， whether selecting suitable habitat or scientific fertilization， we all should pay attentions to the effects of organic matter， available potassium， available nitrogen and soil pH value on the quality of Fructus Forsythiae.

Key words Forsythin； Forsythoside A； HPLC； Soil factors； Correlation analysis

連翹為木犀科連翹屬植物連翹[Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl]的干燥果實(shí)，因其采收季節(jié)不同分為青翹和老翹。青翹為秋季果實(shí)初熟呈綠色時(shí)采收所得，老翹為秋季果實(shí)完全成熟后采收而得。連翹為中醫(yī)最常用的中藥材之一，歷來被視為瘡家要藥[1]，性味苦，微寒，歸心、肺、脾[2]，具有清熱解毒、散結(jié)消腫之功效，用于風(fēng)熱感冒、溫病初起、溫?zé)崛霠I、熱淋尿閉[3]、丹毒、斑疹等的治療[4，5]。連翹有效成分包括：連翹酚、黃酮類、三萜類、連翹酯苷、連翹苷、揮發(fā)油類、熊果酸等[6，7]。已有研究發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地連翹中有效成分含量存在較為明顯的差異，這與不同產(chǎn)地所特有的生態(tài)條件密切相關(guān)[8～10]。

植物生長發(fā)育所需營養(yǎng)物質(zhì)和水分大多是從根系土壤中獲得，植物生長與土壤因子關(guān)系密切，土壤理化性狀可直接影響或決定植物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的種類及數(shù)量，進(jìn)而影響植物的生長發(fā)育、生物量、經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量及次生代謝物的種類、數(shù)量等，所以研究藥用植物的有效成分含量時(shí)有必要研究它們賴以生存的土壤理化性狀[11]。目前，關(guān)于不同產(chǎn)地連翹有效成分含量比較的研究報(bào)道較多，但未涉及土壤理化性狀方面的研究。因此，筆者通過研究商洛五縣區(qū)不同樣方點(diǎn)的連翹主要有效成分與土壤因子的關(guān)系，以便有效地選擇土壤類型來控制連翹質(zhì)量，為實(shí)施連翹藥材的質(zhì)量控制和規(guī)范化種植提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料分別采自商洛市連翹五個(gè)主產(chǎn)區(qū)（商州區(qū)、洛南縣、丹鳳縣、商南縣、山陽縣）的14個(gè)樣方點(diǎn)。2012年7月采集藥材樣品，經(jīng)西北農(nóng)林科技大學(xué)生科院梁宗鎖教授鑒定為正品連翹。將所采連翹果實(shí)蒸熟、曬干，得“青翹”備用。

土壤樣品采用混合土樣采集法，隨機(jī)多點(diǎn)采集連翹樣方地0～20 cm土壤，各點(diǎn)取1 kg土壤樣品，帶回實(shí)驗(yàn)室風(fēng)干、磨細(xì)，供速效養(yǎng)分測定的過18目篩子（<1.00 mm），供有機(jī)質(zhì)、堿解氮測定的過60目篩子（<0.25 mm），備用。

1.2 主要儀器與試劑

VAP-45全自動(dòng)凱式定氮蒸餾儀（德國Gerhaedf公司）；250 mL硬質(zhì)凱式管；數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市科析儀器有限公司，HH-4型）；電熱恒溫鼓風(fēng)真空干燥箱（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司，DGG-9203AD型）；LC-10AT島津高效液相色譜儀，SPD-10A紫外-可見檢測器，浙江大學(xué)N2000色譜工作站；高速中藥粉碎機(jī)（青州市精誠機(jī)械有限公司，WK-1000A型）；萬分之一電子天平（SARTOO-RIUS公司，AUW220型）；超聲波清洗儀器（昆山市超聲儀器有限公司，KQ5200B型）；連翹苷、連翹酯苷A標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品生物制品鑒定所），甲醇、乙腈等化學(xué)試劑均為色譜純；純凈水。

1.3 方法

1.3.1 測定樣品溶液制備 精密稱取采自不同樣方地的連翹果實(shí)干燥粉末（過五號(hào)篩）各1.0000 g至50 mL錐形瓶中，加70%甲醇20 mL，浸泡過夜，超聲波提取30 min，搖勻，0.45 μm微孔膜濾過，靜置，取上清液移入10 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，待測。

1.3.2 土壤理化性狀分析 土壤樣品理化性狀分析方法采用鮑士旦[12]的方法；土壤pH值測定采用電位測定法。所有項(xiàng)目均測定3次，取其平均值作為測定結(jié)果。

1.3.3 連翹有效成分含量測定 連翹有效成分含量測定采用參考文獻(xiàn)[3]的方法并進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。色譜條件：C18色譜柱（10 μm，250 mm×46 mm）；流動(dòng)相：乙腈∶水=30∶70；檢測波長：277 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：室溫；進(jìn)樣量20 μL。

1.4 數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用Microsoft Excel 2007和SPSS Statistics 18.0軟件，采用雙變量相關(guān)性分析中的Pearson法，對(duì)每個(gè)樣方點(diǎn)土壤中有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效鉀與藥材中主要成分連翹酯苷A、連翹苷含量進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 連翹有效成分含量

由表1可見，連翹苷的含量以山陽石頭梁陽坡的連翹藥材為最高（0.895%），山陽趙川陽坡樣品次之（0.856%），洛南靈口陽坡樣品最低（0.173%）；連翹酯苷A的含量以丹鳳巒莊陰坡樣品含量最高（10.687%），其次是洛南靈口陰坡樣品（10.180%），山陽石頭梁陰坡樣品連翹酯苷A含量最低（0.624%）。

2.2 土壤理化性狀與連翹有效成分含量的相關(guān)性分析

由表2、表3可知，土壤中有機(jī)質(zhì)與速效鉀之間存在極顯著相關(guān)性，這是野生連翹生境土壤的一個(gè)重要特征。有機(jī)質(zhì)、速效鉀與連翹苷含量呈極顯著正相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)分別為0.934、0.772），有利于促進(jìn)連翹藥材體內(nèi)連翹苷的積累；有機(jī)質(zhì)與連翹酯苷A含量呈不顯著負(fù)相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)為-0.469），速效鉀與連翹酯苷A含量呈顯著正相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)為0.501）；堿解氮與連翹苷的積累呈一定的正相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)為0.446），與連翹酯苷A的積累則呈不顯著的負(fù)相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)為-0.301）。土壤pH值顯示近堿性（pH平均為7.236），與連翹苷的積累呈不顯著正相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)為0.492），與連翹酯苷A呈極顯著負(fù)相關(guān)（Pearson 相關(guān)系數(shù)為-0.630）。說明近堿性土壤條件會(huì)促進(jìn)連翹藥材中連翹苷的積累而抑制連翹酯苷A的積累。土壤中有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效鉀含量增高會(huì)促進(jìn)連翹藥材中連翹苷的形成和積累，速效鉀含量增高會(huì)促進(jìn)連翹藥材中連翹酯苷A的形成和積累，而有機(jī)質(zhì)、堿解氮含量增高反而會(huì)抑制連翹藥材中連翹酯苷A的形成與積累。

3 結(jié)論與討論

中藥材的有效成分含量與藥材品種、遺傳因素等多種因素有關(guān)，而且受生態(tài)環(huán)境、氣候、土壤等外界因子的影響較大[13]。本研究結(jié)果表明，不同土壤肥力條件對(duì)連翹苷、連翹酯苷A的積累有一定影響。有機(jī)質(zhì)、速效鉀有利于促進(jìn)連翹苷的積累，速效鉀也有利于促進(jìn)連翹酯苷A的積累，而過多的有機(jī)質(zhì)和堿解氮反而不利于連翹酯苷A的積累。近堿性土壤條件會(huì)促進(jìn)連翹藥材中連翹苷的積累而抑制連翹酯苷A的積累。

中藥材有效成分大多為植物次生代謝產(chǎn)物，在植物的生長發(fā)育過程和抵御外界不良環(huán)境因素如干旱、鹽脅迫等方面發(fā)揮重要作用[14]。連翹藥材有效成分種類很多，其它有效成分與土壤因子之間的相關(guān)性及多種有效化學(xué)成分之間的比例關(guān)系尚待進(jìn)一步研究。

參 考 文 獻(xiàn)：

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