王宏雷 王福平 韋明利 姚久祥

摘 要 主要研究利用廣西北部灣產(chǎn)野生巖蟲（Marphysa sanguinea）成蟲作為親本進行人工育苗試驗，通過親本繁育、作為基礎餌料的單細胞藻的大量生產(chǎn)技術研究、受精卵至幼蟲發(fā)育過程的研究與觀察，幼蟲的培育技術，包括培育底質的設定、培育密度、餌料的選擇和投喂等技術的研究，首次對廣西巖蟲進行人工繁育進行研究和嘗試。

關鍵詞 巖蟲；親本；餌料；人工繁育；幼蟲

中圖分類號：S963.2 文獻標志碼：A 文章編號：1673-890X（2016）15-00-02

巖蟲（Marphysa sanguinea）是一種多毛綱磯沙蠶科海生環(huán)節(jié)動物。海生多毛綱許多動物都是主要的海釣餌料例如沙蠶，而巖蟲因其個體大，腥味較重，且富含血液和脂肪更是海釣中最好的珍貴餌料之一，因此價值很高，每年都大量被出口到歐美、日韓等地區(qū)[1-3]。此外，巖蟲還是蝦蟹類育種中親本催熟過程中主要的活餌種類之一。而目前，關于巖蟲提取物作為海洋藥物等的研究也是方興未艾[4]。巖蟲主要分布于潮間帶、潮下帶多泥沙、富含有機質的地方，因其底棲生活及以有機碎屑為食的特點能夠有效的降低其棲息環(huán)境的有機質污染以及底質的通透性等[1]。目前，巖蟲的獲取主要靠人工捕采野生資源，因其需求量有增無減，加上海洋環(huán)境的污染，巖蟲野生資源面臨枯竭的境況。因此，研究巖蟲的人工繁育技術，為其人工養(yǎng)殖提供技術支持具有非常重要的意義。而因為環(huán)境的適應性，選擇本地品種進行養(yǎng)殖馴化，可以更好地適應養(yǎng)殖環(huán)境，從而為實現(xiàn)大規(guī)模人工養(yǎng)殖提供技術上的支持。

1 材料與方法

人工養(yǎng)殖及育苗試驗是在廣西北海竹林鹽場中科蝦苗場進行的。

1.1 親本選擇

巖蟲親本采自北海竹林鹽場潮間帶，選取肥碩飽滿、無斷節(jié)和無傷損肢體飽滿的個體作為親本，經(jīng)消毒后放入消毒曝氣過的親本養(yǎng)殖池進行暫養(yǎng)。

1.2 親本養(yǎng)殖池基底設計

親本養(yǎng)殖池選擇1.5 m×2 m×1 m的蝦苗池，經(jīng)石灰消毒、清洗曝曬后表面鋪一層空心磚，并覆蓋200目紗網(wǎng)2層用于通氣及防止沙子泄漏。第一層基底加入較粗的沙礫[直徑1 mm×（2～3） mm為宜]，厚度約10 cm；第二層加入細沙及塘泥混合物，以10～15 cm為宜；第三層為采自巖蟲棲息地的泥沙，厚度約10 cm。先用0.15%高錳酸鉀水進行消毒，然后用0.2%草酸溶液去除高錳酸鉀殘余，經(jīng)曝氣海水反復沖洗干凈后方可使用。并且保持每平方米水面放置一個充氣頭用于增加水中溶氧。

1.3 親本飼喂

親本的水溫保持在20 ℃上下，鹽度保持在31左右。每日投喂適量的魚粉，及培育的單胞藻（總量不超過其體質量的5%為宜）。每日換水2次，每次換水為水體總量的1/2，換水時間模仿本地的潮汐變化。換水后立即投喂飼料，均勻地灑落在巖蟲洞口的周圍，投喂時，保持水體剛剛漫過基底?？梢杂^察到蟲體從洞中伸出體長的1/2，進行攝食，稍有驚擾，蟲體會立即縮回洞內(nèi)，蟲體糞便為黑色，顆粒狀，大小約為0.5 mm×1 mm。

1.4 親本繁育的研究

巖蟲親本在水溫達到25 ℃，親本會進入產(chǎn)卵期，未發(fā)育成熟的巖重親體難以辨別其性別，進入成熟期后，由于蟲體內(nèi)飽含精子，雄蟲腹部會呈現(xiàn)白色略發(fā)黃；而雌體會呈現(xiàn)茶褐色，腹部輕輕擠壓會有紅褐色的卵子排出[5]。我們可以通過人工的調控水溫，來實現(xiàn)巖蟲親本成熟及交配產(chǎn)卵的調控。

1.5 單胞藻類的培養(yǎng)

單胞藻類如金藻、鹽藻、扁藻和小硅藻等都是海生多毛綱重要的食物來源，為其大量提供身體發(fā)育及性腺成熟中多種激素來源或前提的多種不飽和脂肪酸。我們選擇金藻作為巖蟲親本的餌料，而小球藻和硅藻作為巖蟲幼體的餌料。藻種取自廣西水產(chǎn)科學研究院海水養(yǎng)殖實驗室。3種藻類的培養(yǎng)均采用三級培養(yǎng)法[6]，于無菌操作臺將藻種小心的培植于三角瓶中的液體培養(yǎng)集中，于適溫、合適的光照條件下經(jīng)指數(shù)培養(yǎng)期后；再移植于消過毒的培養(yǎng)箱中進行二級培養(yǎng)，經(jīng)光鏡觀察到液體內(nèi)充滿藻類單胞體即可均勻地移植到加滿水肥并且經(jīng)過消毒的藻類培養(yǎng)池中進行規(guī)?；囵B(yǎng)。雖然最終藻類培養(yǎng)池中可能混有其他藻種，但應以培養(yǎng)的目標藻種數(shù)量級最大。小球藻和硅藻可以混和培養(yǎng)，取藻時用400目紗網(wǎng)濾出藻體用來飼喂親蟲和幼蟲。

1.6 受精卵的發(fā)育狀況

巖蟲受精卵的發(fā)育過程可以通過光鏡觀察到。受精卵呈茶褐色卵球，直徑約300 mm，卵內(nèi)散亂的分布著大小不均的油球。巖蟲前期的細胞分裂與其他多毛剛動物例如雙齒圍沙蠶很類似，都經(jīng)過8細胞期，囊胚期及原腸胚期，只不過時間上有所不同。巖蟲由于其生長期較其他種類的多毛剛生物例如沙蠶科的雙齒圍沙蠶更長，因而有更長的幼蟲期。從受精卵到性成熟大約需要2 a的時間。

1.7 幼體的培育

幼體發(fā)育到擔輪幼體階段時（通過光鏡觀察蟲體前額出現(xiàn)眼點，身體表面有鞭毛分布用以運動，此時約在受精卵開始分裂后的24 h）。此時將幼蟲用目紗網(wǎng)虹吸至幼體培育池中，投喂小球藻和硅藻混合物。幼體培育池大小與成體培育池相似，只是池底基質層與成體池相比無粗沙層，細沙層厚度及原棲息地泥沙厚度皆為8～10 cm。巖蟲幼體經(jīng)過20～30 d的發(fā)育過程后外形特征將初步與成體接近，此時幼體長度為1～1.5 cm，此時由于蟲體的密度過大以及飼喂的需要，幼體培養(yǎng)池顯然無法滿足巖蟲幼體健康的生長。此時，需要將巖蟲幼體從幼體培養(yǎng)池中按一定密度轉移至和成體培養(yǎng)池相同的池中進行培養(yǎng)。為研究幼體合適的培養(yǎng)密度，我們將幼體數(shù)量按照1 000、2 000、4 000/m23個密度梯次進行幼蟲的最適宜培育密度的試驗。此時巖蟲的飼料的投喂與換水也與親蟲相同，只不過投喂量為幼蟲體質量的10%。

2 結果與分析

2.1 巖蟲親本繁育的研究

巖蟲親本進入成熟期后，能夠產(chǎn)生成熟的生殖細胞是在海水平均水溫達到20 ℃以上時，其中平均水溫達到25 ℃時，其產(chǎn)卵量達到峰值。此時，巖蟲親本通常在正午前后溫度較高時同步從靠近尾部的后腹節(jié)片出通過棲管（有巖蟲體表分泌的黏液包裹形成的管狀結構）同步的噴出發(fā)育成熟的卵子及精子。每對巖蟲親本每次排放的受精卵數(shù)量為3萬～5萬枚，受精卵呈茶褐色，平均直徑在300 μm。

2.2 幼體最適培養(yǎng)密度的研究

幼體合適的培養(yǎng)密度直接關系到能否將巖蟲的人工養(yǎng)殖進行規(guī)?；茝V。我們統(tǒng)一選擇30齡巖蟲幼蟲作為試驗的對象是因為此時的巖蟲幼體已經(jīng)初步具備了和成體類似的體形結構，能夠獨立的攝食粉狀餌料而不是像剛毛幼體階段那樣只能進行簡單的吞噬單胞藻類及一些小的有機碎屑。經(jīng)過3個月的養(yǎng)殖試驗發(fā)現(xiàn)，密度梯度為2 000尾/m2時最后得到的巖蟲總生物量值最大，因此我們可以推斷一月齡巖蟲幼體合適的養(yǎng)殖密度為2 000尾/m2。

3 討論

3.1 巖蟲親本繁育的研究

巖蟲屬于磯沙蠶科，相較于其他種類的多毛綱生物，尤其是沙蠶科的各種生物如雙齒圍沙蠶，其具有固有的生殖腺，不像沙蠶科生物那樣有明顯的生殖期變態(tài)現(xiàn)象，即繁殖季節(jié)沙蠶科生物會變態(tài)成異沙蠶體，身體發(fā)生明顯的變態(tài)現(xiàn)象：蟲體短縮，疣足退化，身體的結構一切都向著有益于保障生殖過程而變化。而巖蟲等磯沙蠶科生殖過程中身體不會發(fā)生明顯的變態(tài)現(xiàn)象，而是直接通過體壁棲管將配子排入水中進行交配過程，而不像沙蠶科動物那樣出現(xiàn)群舞現(xiàn)象[7]。沙蠶科生物生殖后親本會逐漸力竭死亡，而磯沙蠶科生物可以多年生育。因而巖蟲親本的選擇可以培育一次多年使用，這也是其大規(guī)模繁育的優(yōu)勢之處。不過目前還沒有關于巖蟲親本生產(chǎn)的幼體在幾年后會出現(xiàn)種質退化的報道，這也是將來待解決的問題之一。

3.2 幼體最適培養(yǎng)密度的研究

目前，關于巖蟲幼體最適培養(yǎng)密度的研究相對較少，而且主要集中于幼體前期培養(yǎng)密度的研究[3，8]，而罕有對未來大規(guī)模養(yǎng)殖具有建設性的大齡幼體（受精后1個月，可以獨立攝食小顆粒飼料的幼蟲）的報道。試驗發(fā)現(xiàn)，1月齡幼體的最適養(yǎng)殖密度為2 000尾/m2，雖然1 000尾/m2的個體均質量及成活率均達到最大水平，但是單位面積收獲的蟲體總質量要顯著的小于2 000尾/m2，而當養(yǎng)殖密度為4 000尾/m2時，不僅得到的蟲體大小之間差距明顯，而且死亡率要比前兩個試驗組高的多，平均單位面積蟲體質量介于兩組之間。因而我們可以推斷出目前適宜的巖蟲大齡幼體的培育量為2 000尾/m2。

參考文獻

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（責任編輯：趙中正）