劉武均

摘 要：目的：建立氣相色譜法（GC）測(cè)定芬維A胺產(chǎn)品中有機(jī)溶劑的殘留，并進(jìn)行分析方法驗(yàn)證。方法：采用DB-624（30m×0.53mm×3.0μm）為色譜柱，頂空自動(dòng)進(jìn)樣，程序升溫，采用惠普6850檢測(cè)器。結(jié)果：氣相色譜法（GC）測(cè)芬維A胺產(chǎn)品中殘留溶劑專屬性、專屬性、系統(tǒng)適應(yīng)性、系統(tǒng)精密度、方法精密度、檢測(cè)限和定量限、線性、方法準(zhǔn)確度和耐用性均符合ICH指南的要求。結(jié)論：氣相色譜法（GC）測(cè)定芬維A胺產(chǎn)品中殘留溶劑方法準(zhǔn)確、有效、靈敏度高。

關(guān)鍵詞：芬維A胺產(chǎn)品；殘留溶劑；氣相色譜法（GC）

中圖分類號(hào)：R917 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

1 材料

1.1 儀器

氣相色譜儀Agilent 6890N，包括自動(dòng)頂空進(jìn)樣器Agilent 7694，檢測(cè)器和Agilent色譜工作站XP205電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 藥品與試劑

芬維A胺樣品（重慶華邦制藥有限公司，批號(hào)：091001），N，N-二甲基乙酰胺（色譜純，批號(hào)：20090801），分析純的甲醇乙醚，異丙醇，乙腈，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，四氫呋喃和吡啶。

2 測(cè)定方法

2.1 氣相色譜系統(tǒng)條件

檢測(cè)器：惠普HP6850

色譜柱：DB-624（30m×0.53mm× 3.0μm）

柱溫程序：在30℃保持4min后以20℃/min的速度升溫到2000℃保持4.0min

進(jìn)樣口溫度：200℃

檢測(cè)器溫度：300℃

流速：5mL/min

分流比：10∶1

進(jìn)樣器：Agilent 7694自動(dòng)頂空進(jìn)樣

溫度：瓶溫60℃，環(huán)溫130℃，傳輸線溫度130℃。

2.2 溶液配制

甲醇儲(chǔ)備液：稱取甲醇1.0446g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

乙醚儲(chǔ)備液：稱取乙醚0.1143g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

異丙醇儲(chǔ)備液：稱取異丙醇1.0100g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

乙酸乙酯儲(chǔ)備液：稱取乙酸乙酯1.0095g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

乙腈儲(chǔ)備液：稱取乙腈0.4131g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

二氯甲烷儲(chǔ)備液：稱取二氯甲烷0.6154g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

正己烷儲(chǔ)備液：稱取正己烷0.0500g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

四氫呋喃儲(chǔ)備液：稱取四氫呋喃0.3699g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度，搖勻，備用。

吡啶儲(chǔ)備液：稱取吡啶0.2123g，精密稱定，置50mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺稀釋至刻度搖勻，備用。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：分別精密移取乙酸乙酯儲(chǔ)備液2.0mL及上述其他各儲(chǔ)備液1.0mL于100mL容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺定容至刻度，搖勻即可（甲醇208.92ppm、乙醚22.86ppm、異丙醇202ppm、乙腈82.62ppm、二氯甲烷121.06ppm、正己烷10ppm、乙酸乙酯403.8ppm、四氫呋喃73.98ppm、吡啶42.46ppm）。

樣品溶液配制：稱取樣品約1.0g，精密稱定，置20mL頂空瓶中，加5mLN，N-二甲基乙酰胺使溶解，壓蓋密封。

3 方法專屬性測(cè)定

取空白溶劑進(jìn)樣。分別吸取少許上述各溶液，用N，N二甲基乙酰胺稀釋至適當(dāng)濃度。進(jìn)樣，記錄色譜圖。將各溶液混合，進(jìn)樣，記錄色譜圖。結(jié)論：空白溶劑不干擾測(cè)定，各溶劑峰間分離度大于1.2。

4 系統(tǒng)適應(yīng)性

將標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣6針，記錄色譜圖，計(jì)算溶劑間的分離度，拖尾因子及理論塔板數(shù)及各溶劑峰面積RSD%。各溶劑峰拖尾因子均在0.8～1.5，理論塔板數(shù)均大于10000，重復(fù)進(jìn)樣各溶劑峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10.0%。各溶劑峰拖尾因子均在0.8～1.5，理論塔板數(shù)均大于10000，重復(fù)進(jìn)樣各溶劑峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10.0%。

5 檢測(cè)限及定量限

取標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣并記錄色譜圖，根據(jù)進(jìn)樣濃度與信噪比計(jì)算各溶劑的檢出限濃度（S/N=3∶1）及定量限濃度（S/N=10∶1），并據(jù)此計(jì)算各溶劑的檢出限及定量限。結(jié)論：檢出限：符合S/N=3∶1的標(biāo)準(zhǔn)要求。定量限：符合S/N=10∶1的標(biāo)準(zhǔn)要求。

結(jié)論

通過(guò)上述驗(yàn)證，該方法專屬性、檢出限、線性都較好，精密度RSD都小于10%，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，符合要求。證明該檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確可靠。

參考文獻(xiàn)

[1]吳小琴，楊輝，魏宜勝，等.活性氧在芬維A胺誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)制研究[J].胃腸病學(xué)，2014（07）：399-403.