劉海鵬 王鵬 楊華 鄭瑞娟 陳建霞

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半乳糖凝集素-1對(duì)結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用及其臨床價(jià)值

劉海鵬 王鵬 楊華 鄭瑞娟 陳建霞

目的 分析半乳糖凝集素-1(galectin-1，Gal-1)對(duì)結(jié)核分枝桿菌(MTB)感染巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用，并探討其血清含量與結(jié)核病的臨床相關(guān)性。方法 選取2014年6—12月于同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院門診就診的活動(dòng)性結(jié)核病患者40例作為病例組；選取同時(shí)期結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(tuberculin skin test，TST)陽(yáng)性潛伏感染者20例作為觀察組；參照觀察組患者的年齡和性別構(gòu)成，按照1∶1的比例，選擇同期體檢TST陰性健康者20名作為對(duì)照組。研究對(duì)象各采集外周血5 ml，采用ELISA檢測(cè)其血清Gal-1含量；分別采用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)和ELISA檢測(cè)MTB感染人單核巨噬細(xì)胞(THP-1)后，Gal-1的表達(dá)及分泌情況；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外源性Gal-1(設(shè)置添加10、50 ng/ml的Gal-1組和空白對(duì)照組)對(duì)人單核巨噬細(xì)胞(THP-1)吞噬表達(dá)綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的MTB(MTB-GFP)的影響；應(yīng)用胞內(nèi)存活實(shí)驗(yàn)檢測(cè)外源性Gal-1對(duì)巨噬細(xì)胞清除MTB能力的作用。結(jié)果 血清Gal-1含量病例組為(28.30±1.17) ng/ml，高于對(duì)照組的(21.28±1.74) ng/ml和觀察組的(22.06±1.25) ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5.50，P=0.006)。MTB感染THP-1細(xì)胞2 h后，Gal-1表達(dá)量增加。感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection，MOI)值為1和5時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中Gal-1含量分別為(391.27±34.45) pg/ml和(751.54±148.93) pg/ml。添加10、50 ng/ml Gal-1組與空白對(duì)照組MTB-GFP陽(yáng)性THP-1細(xì)胞的比率分別為(6.77±0.58) %、(6.93±0.62) %和(7.64±0.74) %，三組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.53，P=0.291)；MTB-GFP陽(yáng)性THP-1細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度分別為321.67±5.03、318.00±13.89、342.67±13.65，三組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.94，P=0.081)。感染24 h后，添加10 ng/ml和50 ng/ml Gal-1組胞內(nèi)克隆形成單位數(shù)[M(Q1～Q3)]分別為3250 (2825～6225)、3250 (1850～4950)，與空白對(duì)照組[9250(8525～111 550)]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=0.00，P=0.029；U=0.00，P=0.028)；感染72 h后，分別為19 500(17 500～21 500)、12 000(11 250～15 750)，與空白對(duì)照組[38 500(31 750～44 500)]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=0.00，P=0.029；U=0.00，P=0.029)。結(jié)論 活動(dòng)性結(jié)核病患者血清中Gal-1表達(dá)水平異常升高，胞外Gal-1可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對(duì)MTB的殺傷功能。因此，Gal-1具有一定的結(jié)核病輔助診斷價(jià)值，并可能通過影響巨噬細(xì)胞功能參與結(jié)核病發(fā)病過程。

結(jié)核； 分枝桿菌，結(jié)核； 半乳糖凝集素1； 巨噬細(xì)胞

肺結(jié)核是由結(jié)核分枝桿菌(MTB)感染肺部引起的慢性傳染性疾病。固有免疫系統(tǒng)是機(jī)體抵抗外來(lái)病原體侵襲的第一道防線，模式識(shí)別受體(pattern recognition receptor，PRR)識(shí)別并結(jié)合病原體的病原相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular pattern，PAMP)后，激活固有免疫應(yīng)答反應(yīng)，進(jìn)而抵御病原體感染。半乳糖凝集素-1(galectin-1，Gal-1)可作為模式識(shí)別受體參與病原體識(shí)別，在機(jī)體抵抗病原微生物感染過程中發(fā)揮重要作用[1-5]，然而其在MTB感染過程中的作用未見報(bào)道。為此，本研究就Gal-1對(duì)MTB感染巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用及其血清含量與結(jié)核病的臨床相關(guān)性進(jìn)行了探討。

對(duì)象和方法

一、 對(duì)象選擇

1.對(duì)象：選取2014年6—12月于同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院門診就診的活動(dòng)性結(jié)核病患者40例作為病例組，包括男20例(50%)，女20例(50%)；平均年齡(31.90±6.18)歲。選取同時(shí)期結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(tuberculin skin test，TST)陽(yáng)性潛伏感染者20例作為觀察組，男10例(50%)，女10例(50%)；平均年齡(31.15±5.89)歲。參照觀察組患者的年齡和性別構(gòu)成，按照1∶1的比例，選擇同期于本院體檢TST陰性健康對(duì)照者20名作為對(duì)照組，包括男10例(50%)，女10例(50%)，平均年齡(30.30±5.09)歲。

病例組和觀察組患者于確診當(dāng)日促凝管采集外周血5 ml，對(duì)照組于體檢當(dāng)天采集外周血5 ml。外周血樣本應(yīng)用促凝管促凝后靜置15 min，3000×g離心10 min，收集上清，用于檢測(cè)Gal-1含量。本研究經(jīng)同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均知情同意。

2.活動(dòng)性結(jié)核病患者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)制定的《肺結(jié)核診斷和治療指南》[6]；(2)具有咯痰、咯血、發(fā)熱等臨床癥狀；(3)痰標(biāo)本抗酸染色陽(yáng)性、MTB培養(yǎng)陽(yáng)性；(4)結(jié)合胸部X線攝片檢查確診為肺結(jié)核；(5)未經(jīng)抗結(jié)核治療的初治結(jié)核病患者；(6)排除并發(fā)HIV感染、糖尿病、風(fēng)濕病等疾病及妊娠者。

3.TST陽(yáng)性潛伏感染者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)有活動(dòng)性結(jié)核病患者接觸史；(2)無(wú)咯血、咯痰、低熱盜汗等臨床癥狀；(3)痰標(biāo)本抗酸染色陰性、MTB培養(yǎng)陰性；(4)胸部X線攝片檢查正常；(5)TST陽(yáng)性。

4.對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)接受健康體檢；(2)身體健康，肝腎功能各項(xiàng)指標(biāo)均正常；(3)無(wú)慢性阻塞性肺疾病、慢性支氣管炎等慢性氣道疾??；(4)TST陰性。

二、儀器和試劑

流式細(xì)胞儀(BD Accuri C6)；Gal-1 ELISA檢測(cè)試劑盒(DGAL10，美國(guó)R&D公司)；重組Gal-1(1152-GA/CF，美國(guó)R&D公司)；Gal-1抗體(英國(guó)Abcam公司)；β-肌動(dòng)蛋白抗體和辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)標(biāo)記的抗兔IgG(均來(lái)自Cell Signaling Technology，美國(guó))；RPMI 1640 細(xì)胞培養(yǎng)液(美國(guó)Gibco公司)。

三、方法

1.人單核巨噬細(xì)胞(THP-1)的培養(yǎng)及分化：THP-1細(xì)胞經(jīng)50 ng/ml佛波酯(phorbol-12-myristate 13-acetate，PMA)分化24 h后，更換新鮮RPMI 1640完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)2 d后用于后續(xù)MTB感染實(shí)驗(yàn)。

2.Gal-1含量檢測(cè)：應(yīng)用ELISA方法進(jìn)行檢測(cè)。將THP-1細(xì)胞接種于96孔板，經(jīng)PMA分化后，按感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection，MOI)值1和5感染MTB，24 h后收集培養(yǎng)上清液，直接用于后續(xù)測(cè)定。血清按照1∶10稀釋后測(cè)定。具體測(cè)定按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。每次測(cè)定分別設(shè)置陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照，每個(gè)樣本設(shè)置2個(gè)復(fù)孔，取其均值作為測(cè)定值。繪制以吸光度值(A值)為橫坐標(biāo)、標(biāo)準(zhǔn)品蛋白濃度為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，代入待測(cè)樣品的A值求出濃度。

3.巨噬細(xì)胞內(nèi)Gal-1表達(dá)檢測(cè)：應(yīng)用蛋白免疫印跡(Western blot)檢測(cè)。將THP-1細(xì)胞接種于6孔板，經(jīng)PMA分化后，按MOI值5感染MTB不同時(shí)間后，應(yīng)用細(xì)胞裂解液收集細(xì)胞。細(xì)胞裂解液經(jīng)12 000×g離心15 min，收集上清，加入4×蛋白質(zhì)上樣緩沖液，95 ℃煮樣8 min。蛋白質(zhì)樣品經(jīng)分離膠分離，Western blot轉(zhuǎn)印至膜上，經(jīng)脫脂牛奶封閉后，4 ℃孵育一抗過夜。其中Gal-1抗體1∶2000稀釋，β-肌動(dòng)蛋白抗體1∶1000稀釋。洗滌、室溫孵育二抗(1∶1000)1 h、顯影、攝片。

4.巨噬細(xì)胞吞噬作用檢測(cè)：應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)巨噬細(xì)胞對(duì)表達(dá)綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的MTB(MTB-GFP)的吞噬作用。將THP-1細(xì)胞接種于24孔板并經(jīng)PMA分化。為同步化細(xì)胞吞噬過程，將分化的THP-1細(xì)胞置于冰上預(yù)孵育10 min，按MOI值5加入MTB-GFP，4 ℃ 1000×g離心10 min，分別添加不同濃度的Gal-1(分別為10、50 ng/ml)，并設(shè)置空白對(duì)照組，37 ℃ 孵育1 h，洗滌去除胞外菌，收集細(xì)胞后應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)MTB-GFP陽(yáng)性細(xì)胞比例及平均熒光強(qiáng)度(mean fluorescence intensity，MFI)。

5.胞內(nèi)存活試驗(yàn)：將THP-1接種于24孔板并經(jīng)PMA分化，按MOI值5感染MTB 1 h，洗滌去除胞外菌，分別添加不同濃度的Gal-1(分別為10、50 ng/ml)并設(shè)置空白對(duì)照組，并分別感染后4、24、72 h用裂解液(PBS+0.1% TritonX-100)收集細(xì)胞，按10倍梯度稀釋后培養(yǎng)于7H11瓊脂糖板，37 ℃孵育3周后進(jìn)行克隆計(jì)數(shù)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用Prism v5.04軟件(美國(guó)GraphPad軟件公司)進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布數(shù)據(jù)計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組間差異的比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料采用率值表示，各組間差異的比較采用卡方檢驗(yàn)。MTB感染細(xì)胞內(nèi)克隆形成單位(CFU)采用中位數(shù)[四分位數(shù)間距，M(Q1～Q3)]表示，各組間差異的比較采用曼-惠特尼U檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、血清Gal-1含量

血清Gal-1含量病例組為(28.30±1.17) ng/ml，對(duì)照組為(21.28±1.74) ng/ml，觀察組為(22.06±1.25) ng/ml，三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5.50，P=0.006)。進(jìn)一步的組內(nèi)兩兩比較顯示：病例組Gal-1含量高于對(duì)照組及觀察組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.006和0.004)；對(duì)照組和觀察組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.718)。

二、MTB感染誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞表達(dá)和分泌Gal-1

Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，人單核巨噬細(xì)胞THP-1表達(dá)Gal-1，MTB感染2 h后，細(xì)胞內(nèi)Gal-1表達(dá)量明顯增加(圖1)。ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，MTB感染THP-1細(xì)胞24 h后，Gal-1分泌到細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中，當(dāng)MOI=1和5時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中Gal-1表達(dá)量分別為(391.27±34.45) pg/ml和(751.54±148.93) pg/ml。

圖1 MTB感染誘導(dǎo)人單核巨噬細(xì)胞THP-1表達(dá)Gal-1情況

三、外源添加Gal-1對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬MTB的影響

細(xì)胞培養(yǎng)基中添加不同濃度的重組Gal-1蛋白，流式細(xì)胞儀檢測(cè)MTB-GFP陽(yáng)性THP-1細(xì)胞的比率及平均熒光強(qiáng)度。不添加重組Gal-1蛋白、添加10 ng/ml和50 ng/ml重組Gal-1蛋白，MTB-GFP陽(yáng)性THP-1細(xì)胞的比率分別為(6.77±0.58) %、(6.93±0.62) %和(7.64±0.74) %，三組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.53，P=0.291)。MTB-GFP陽(yáng)性THP-1細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度分別為321.67±5.03、318.00±13.89、342.67±13.65，三組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.94，P=0.081)。

四、外源添加Gal-1對(duì)MTB細(xì)胞內(nèi)存活的影響

感染4 h后，Gal-1添加組與空白對(duì)照組之間MTB胞內(nèi)存活差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而感染24 h和72 h后，添加Gal-1(10 ng/ml)組和Gal-1(50 ng/ml)組與未處理組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。因此，外源添加Gal-1可明顯抑制MTB在THP-1內(nèi)的增殖，提示胞外Gal-1可促進(jìn)巨噬細(xì)胞清除MTB。

討 論

凝集素是一種能與細(xì)胞表面特殊糖蛋白、糖脂的寡糖結(jié)構(gòu)結(jié)合的天然蛋白。動(dòng)物凝集素按分子結(jié)構(gòu)可分為C型凝集素、S型凝集素、P型凝集素、I型凝集素和正五聚蛋白。Gal為S型凝集素，可特異性識(shí)別β-半乳糖苷鍵，是固有免疫中重要的模式識(shí)別受體。它通過結(jié)合病毒、細(xì)菌、真菌和原生動(dòng)物表面的寡糖，參與識(shí)別微生物，有效調(diào)節(jié)機(jī)體固有免疫及適應(yīng)性免疫[7]。

Gal-1是最早發(fā)現(xiàn)的Gal家族分子，其相對(duì)分子質(zhì)量為14.5×103。人類Gal-1分子由定位于染色體22q13.1的單基因編碼。Gal-1是典型的胞漿蛋白，但在細(xì)胞表面、細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞核內(nèi)也有表達(dá)。

Gal-1與固有免疫關(guān)系密切。Gal-1可通過調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞遷移，抑制中性粒細(xì)胞的外滲[8]。Gal-1可以通過調(diào)節(jié)免疫球蛋白G的Fc段受體Ⅰ(FcγRI)和Ⅱ型主要組織相容性復(fù)合體(MHCⅡ)分子的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的吞噬作用與抗原提呈功能，也可以通過胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶1/2 (ERK1/2)依賴的信號(hào)通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的活性[9]。Gal-1還可抑制寄生蟲感染后巨噬細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-12(IL-12)，促進(jìn)IL-10的產(chǎn)生，抑制免疫反應(yīng)[10]。

已有報(bào)道顯示，在不同病原體感染過程中，Gal-1發(fā)揮多樣性作用。在流感病毒感染時(shí)，Gal-1可以和流感病毒結(jié)合，降低病毒對(duì)宿主細(xì)胞的侵入[5]。相反，在HIV病毒感染時(shí)，Gal-1可穩(wěn)定病毒與宿主巨噬細(xì)胞的吸附，從而增強(qiáng)HIV對(duì)宿主巨噬細(xì)胞的感染[11]。

Gal-1在MTB感染過程中發(fā)揮的作用尚不清楚。本研究檢測(cè)了活動(dòng)性結(jié)核病患者、結(jié)核潛伏感染者和健康對(duì)照者血清中Gal-1的含量，結(jié)果顯示，活動(dòng)性結(jié)核病患者血清Gal-1含量高于健康對(duì)照者和潛伏感染者，潛伏感染組與健康對(duì)照組無(wú)明顯差異，提示Gal-1可能參與結(jié)核病發(fā)病過程。

隨后體外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，MTB感染巨噬細(xì)胞后，Gal-1的胞內(nèi)表達(dá)及及胞外含量均明顯增高。這一結(jié)果提示，在MTB感染過程中，巨噬細(xì)胞是Gal-1的來(lái)源細(xì)胞之一，且其表達(dá)水平受MTB感染調(diào)控。MTB感染能上調(diào)Gal-1的表達(dá)，這與Gal-1在寄生蟲及病毒感染中的研究結(jié)果相似[12-14]，提示Gal-1參與調(diào)控感染過程中MTB和宿主巨噬細(xì)胞的相互作用。

MTB感染巨噬細(xì)胞后，Gal-1可分泌到胞外，且活動(dòng)性結(jié)核病患者血清Gal-1量明顯升高。為進(jìn)一步探討胞外Gal-1對(duì)MTB感染巨噬細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用，本研究采用添加外源重組Gal-1蛋白的方法，了解Gal-1對(duì)巨噬細(xì)胞的吞噬及殺菌功能影響。添加外源Gal-1不影響MTB-GFP陽(yáng)性THP-1細(xì)胞的比率及平均熒光強(qiáng)度，提示胞外Gal-1不影響巨噬細(xì)胞吞噬MTB的功能。然而，添加外源Gal-1后， MTB在THP-1內(nèi)的存活被明顯抑制，提示胞外Gal-1可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對(duì)MTB感染的清除能力。巨噬細(xì)胞識(shí)別MTB后可通過多種機(jī)制抑制MTB增殖。已有報(bào)道顯示，Gal-1可促進(jìn)肝細(xì)胞線粒體自噬[15]，而自噬可促進(jìn)巨噬細(xì)胞清除MTB[16]。因此，胞外Gal-1是否通過促進(jìn)自噬進(jìn)而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對(duì)MTB的清除，值得進(jìn)一步研究。

表1 外源添加半乳糖凝集素-1后MTB感染各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)克隆形成單位(CFU)情況

注 表中括號(hào)外數(shù)值為“中位數(shù)(M)”，括號(hào)內(nèi)數(shù)值為“第25百分位數(shù)(Q1)～第75百分位數(shù)(Q3)”；a：空白對(duì)照組與添加10 ng/ml組比較；b：空白對(duì)照組與添加50 ng/ml組比較

血清Gal-1表達(dá)水平在活動(dòng)性結(jié)核病患者中異常升高，而在潛伏性感染組與健康對(duì)照組間相比無(wú)明顯差異，這不僅提示Gal-1可能參與結(jié)核病發(fā)病過程，而且提示其具有輔助診斷結(jié)核病的價(jià)值。后續(xù)可進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，以分析Gal-1是否可作為一種生物標(biāo)志物用于活動(dòng)性結(jié)核病患者的輔助診斷。另一方面，Gal-1具體通過何種機(jī)制增強(qiáng)巨噬細(xì)胞對(duì)MTB的清除能力也有待進(jìn)一步研究。

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(本文編輯：李敬文)

Regulation and clinical value of galectin-1 on macrophages infected withMycobacteriumtuberculosis

LIUHai-peng,WANGPeng,YANGHua,ZHENGRui-juan,CHENJian-xia.

ClinicalTranslationalResearchCenter,ShanghaiPulmonaryHospital,TongjiUniversity,Shanghai200433,China

LIUHai-peng,Email：haipengliu2013@163.com

Objective To analyze the regulatory role of galectin-1 (Gal-1) in the process of macrophages infected withMycobacteriumtuberculosis(MTB) and to evaluate the correlation of its serum abundance with pulmonary tuberculosis. Methods From Shanghai Pulmonary Hospital affiliated to Tongji University between June 2014 and December 2014, 40 outpatients with active pulmonary tuberculosis were enrolled as patient group, 20 latent infection individuals with positive tuberculin skin test (TST) were in experimental group, and 20 healthy individuals were selected as control group; 5 ml peripheral blood were collected from each person and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to test Gal-1 in serum. The expression and secretion of Gal-1 after THP-1 infected with MTB were detected by Western blot and ELISA. Furthermore, the effects of exogenous Gal-1 (divided into Gal-1-treated group (10 ng/ml and 50 ng/ml) and untreated group) on the uptake of MTB stably transfected with green fluorescent protein (MTB-GFP) in THP-1 and the clearance of MTB in macrophages were detected by flow cytometry and intracellular survival test, respectively. Results The abundance of Gal-1 in serum was (28.30±1.17) ng/ml in patient group, which was higher than those of experimental group ((21.28±1.74) ng/ml) and control group ((22.06±1.25) ng/ml), and the difference was statistically significant (F=5.50,P=0.006). The expression of Gal-1 increased 2 hours after THP-1 being infected with MTB. Gal-1 in supernatant of cell culture medium were (391.27±34.45) pg/ml and (751.54±148.93) pg/ml when multiplicity of infection (MOI) at 1 and 5, respectively. In Gal-1-treated group (10 and 50 ng/ml) and untreated group, the percentages of THP-1 cells with MTB-GFP positive were (6.77±0.58) %, (6.93±0.62) % and (7.64±0.74) %, respectively, differences among these groups were not statistically significant (F=1.53,P=0.291), and neither was the mean fluorescent intensity (MFI) (F=3.94,P=0.081), which were 321.67±5.03, 318.00±13.89 and 342.67±13.65, respectively. The colony-forming unit (CFU,M(Q1-Q3)) 24 hours post-infection of Gal-1-treated group (10 ng/ml: 3250 (2825-6225), 50 ng/ml: 3250 (1850-4950)) were statistically significant from that of untreated group (9250 (8525-111 550)) (U=0.00,P=0.029;U=0.00,P=0.028), as well as the CFU 72 hours post-infection (the CFU were 38 500 (31 750-44 500), 19 500 (17 500-21 500) and 12 000 (11 250-15 750) in untreated and Gal-1-treated (10 and 50 ng/ml) groups, respectively (U=0.00,P=0.029;U=0.00,P=0.029)). Conclusion Gal-1 abberantly increases in serum of active TB patients, and extracellular Gal-1 enhances the killing activity of macrophages against MTB. Therefore, Gal-1 could serve as a potential biomarker for the diagnosis of TB. It may be involved in the pathogenesis of TB by modulating the function of macrophages.

Tuberculosis；Mycobacteriumtuberculosis； Galectin 1; Macrophages

10.3969/j.issn.1000-6621.2016.06.011

國(guó)家自然科學(xué)基金(81200003、81370108)；上海市浦江人才計(jì)劃(16PJ408600)

200433同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化中心(劉海鵬、陳建霞)，結(jié)核病臨床中心(王鵬)；上海市結(jié)核病(肺)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(劉海鵬、楊華、鄭瑞娟、陳建霞)

劉海鵬，Email：haipengliu2013@163.com

2016-02-29)