宋國威 李立新 孫雪 梁翠娟 王春艷 王超

·論著·

糞便潛血檢測(cè)定量法在結(jié)直腸癌及其他下消化道出血性疾病中的應(yīng)用分析

宋國威 李立新 孫雪 梁翠娟 王春艷 王超

目的 比較與分析糞便潛血定量法與定性法在下消化道疾病檢測(cè)中的陽性檢出率以及定量法檢測(cè)值與結(jié)直腸癌Dukes分期的關(guān)系。方法 選擇2014年7月至2015年7月在內(nèi)鏡室接受腸鏡檢查的患者，所有患者在做腸鏡檢查前均留取了標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行便潛血定量與定性檢測(cè)，根據(jù)腸鏡和病理診斷結(jié)果，最終將1 002例納入本研究，并按診斷分為5組，其中結(jié)直腸癌組196例，潰瘍性結(jié)腸炎組247例，結(jié)直腸息肉組205例，其他炎性腸病組198例，正常組156例。分別比較兩種方法在各疾病組的陽性檢出率，觀察定量法檢測(cè)值在不同Dukes分期的分布。結(jié)果 定量法與定性法檢測(cè)在結(jié)直腸癌組、潰瘍性結(jié)腸炎組、結(jié)直腸息肉組陽性檢出率的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，在其他炎性腸病組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.423)。FOBT定量法陽性的結(jié)直腸癌病例主要集中在B期和C期，且隨著Dukes病理分期的進(jìn)展，檢測(cè)數(shù)值有增大趨勢(shì)。結(jié)論 糞便潛血定量法檢測(cè)在下消化道出血性疾病的篩查及結(jié)直腸癌的Dukes分期中有很好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

糞便潛血;定量法檢測(cè);下消化道疾病;Dukes分期

糞便潛血檢測(cè)過程簡單、操作方便，患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)小，依從性好，是下消化道出血性疾病篩查的有效手段。在中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)等專業(yè)組織達(dá)成的“中國早期結(jié)直腸癌及癌前病變篩查與診治共識(shí)”中，將糞便潛血(FOBT)檢測(cè)列為早期結(jié)直腸癌篩查的初篩實(shí)驗(yàn)[1]，推薦對(duì)糞便中潛血進(jìn)行數(shù)值檢測(cè)，可量化測(cè)定糞便中低濃度血紅蛋白。本研究使用便潛血全自動(dòng)定量分析儀，比較糞便潛血定量法與定性法檢測(cè)在各種下消化道出血性疾病中的陽性檢出率，并初步觀察了定量法檢測(cè)數(shù)值與結(jié)直腸癌Dukes分期的關(guān)系，旨在探討糞便潛血定量檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年7月至2015年7月在我院內(nèi)鏡室接受腸鏡檢查的患者，排除急性感染性腹瀉、膿血便、月經(jīng)、肛裂及痔瘡出血的病例。所有患者在做腸鏡檢查前均留取標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行便潛血定量與定性檢測(cè)。根據(jù)腸鏡和病理診斷結(jié)果，最終有1 002例納入本研究的比較分析，并按腸鏡和病理診斷分為5組，其中結(jié)直腸癌組196例，潰瘍性結(jié)腸炎組247例，結(jié)直腸息肉組205例，其他炎性腸病組198例，正常組156例。分別比較兩種方法的陽性檢出率，觀察定量法的檢測(cè)值在不同結(jié)直腸癌Dukes分期的分布。

1.2 儀器、試劑與實(shí)驗(yàn)流程

1.2.1 定量法檢測(cè)：日本榮研化學(xué)株式會(huì)社生產(chǎn)OC-SENSOR Micro自動(dòng)糞便隱血檢測(cè)儀及配套試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品，儀器工程師校準(zhǔn)儀器，檢驗(yàn)科工作人員收到標(biāo)本后24 h內(nèi)完成檢測(cè)。測(cè)試過程嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，更換試劑批號(hào)時(shí)重新做標(biāo)準(zhǔn)曲線，每批次標(biāo)本平行做質(zhì)控品，儀器自動(dòng)打印檢測(cè)結(jié)果，以血紅蛋白濃度≥100 ng/ml為陽性。

1.2.2 定性法檢測(cè)：杭州愛康生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)便潛血膠體金檢測(cè)卡，檢驗(yàn)科收到標(biāo)本后1 h內(nèi)完成檢測(cè)。嚴(yán)格按照試劑說明操作，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)判讀結(jié)果，陽性對(duì)照線和反應(yīng)線均顯紫紅色者為陽性。任何一條線缺失不能判斷為陽性。本實(shí)驗(yàn)將反應(yīng)線顯色但顏色較淺的測(cè)定結(jié)果仍視為陽性。該試劑說明書標(biāo)示檢測(cè)陽性閾值為血紅蛋白濃度>100 ng/ml。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)流程： 給所有做腸鏡檢查的患者發(fā)放定量檢測(cè)專用糞便采集管與普通采便管各1支，無需限制飲食，囑患者行腸鏡檢查前按采集說明書的要求從同一次大便中用2種采便管各留取1份標(biāo)本，檢驗(yàn)科收集后由2組人員分別進(jìn)行定量法與定性法雙盲檢測(cè)，記錄檢測(cè)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 陽性檢出率的比較 定量法與定性法的陽性檢出率在各疾病組比較，結(jié)直腸癌組的陽性率分別為93.4%和54.1%、潰瘍性結(jié)腸炎組分別為25.5%和8.5%、結(jié)直腸息肉組分別為12.2%和3.4%，3組陽性檢出率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。在其他炎性腸病組的陽性檢出率為27.8%和24.25%,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.423)。見表1。

表1 FOBT定量法與定性法在不同疾病組的陽性檢出率比較 例(%)

2.2 FOBT定量法檢測(cè)數(shù)值與結(jié)直腸癌Dukes病理分期的關(guān)系 196例結(jié)直腸癌中有156例明確了Dukes病理分期，F(xiàn)OBT定量陽性的結(jié)直腸癌病例主要集中在B期和C期，占分期病例的71.2%(111/156)，且隨著Dukes病理分期的進(jìn)展，檢測(cè)數(shù)值呈上升趨勢(shì)。見表2。

表2 FOBT定量法檢測(cè)數(shù)值在不同Dukes病理分期的分布 ng/ml

3 討論

隨著我國人民生活水平不斷提高，飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，高蛋白、高熱量、低纖維含量的食物更多的出現(xiàn)在餐桌上,結(jié)直腸癌的發(fā)病率已上升到全部惡性腫瘤的第3位，病死率占惡性腫瘤病死率的第5位[2]。早期結(jié)直腸癌沒有明顯的臨床癥狀，發(fā)現(xiàn)時(shí)往往已是中晚期，因此結(jié)直腸癌能獲得好的治療效果和提高生存率的關(guān)鍵在于早期發(fā)現(xiàn)，早期診斷，早期治療[3]。腸鏡加病理檢查是結(jié)直腸癌最具特異性和敏感性的檢測(cè)手段，但因?yàn)獒t(yī)療資源的相對(duì)有限，檢查過程對(duì)技術(shù)人員的操作水平要求高，患者痛苦大，且存在發(fā)生穿孔和出血等并發(fā)癥的危險(xiǎn)，患者依從性差，不適于作為初篩手段大規(guī)模開展[4]。隨著基因檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，越來越多的癌變基因及產(chǎn)物被發(fā)現(xiàn)并能檢測(cè)出來，有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)糞便脫落細(xì)胞的DNA檢測(cè)和癌基因檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌篩查的特異性高達(dá)98.93%，但因基因檢測(cè)技術(shù)的復(fù)雜性和昂貴的費(fèi)用，使此項(xiàng)技術(shù)尚處于臨床探索研究階段，無法普及推廣[5]。結(jié)直腸癌患者外周血中一些細(xì)胞因子異常表達(dá)，腫瘤標(biāo)志物水平升高，但均存在診斷特異性差的缺點(diǎn)[6]。

糞便潛血實(shí)驗(yàn)數(shù)十年前已在臨床應(yīng)用，檢測(cè)技術(shù)不斷進(jìn)步。目前臨床廣泛應(yīng)用的免疫法糞便潛血實(shí)驗(yàn)采用抗人Hb抗體與糞便中的人Hb結(jié)合的原理，避免了動(dòng)物蛋白對(duì)潛血實(shí)驗(yàn)的干擾，對(duì)下消化道出血性疾病特異性好，敏感性高，已基本替代了化學(xué)法。但目前大部分醫(yī)院使用免疫層析技術(shù)快速定性檢測(cè)卡，手工操作或通過全自動(dòng)大便分析儀實(shí)現(xiàn)了潛血卡的自動(dòng)加樣，兩種形式都需要肉眼通過顏色反應(yīng)判斷結(jié)果的陰陽性，雖然檢測(cè)快速方便，但不能客觀反映出血量的多少。而且定性法受影響因素較多，檢測(cè)線性范圍窄，當(dāng)標(biāo)本中存在大量血紅蛋白時(shí)易產(chǎn)生鉤狀效應(yīng)，出現(xiàn)假陰性結(jié)果[7]。定量法采用免疫比濁法，通過膠乳凝集光學(xué)檢測(cè)技術(shù)自動(dòng)檢測(cè)對(duì)糞便中血紅蛋白進(jìn)行數(shù)值化檢測(cè)，結(jié)果以數(shù)值形式報(bào)告，檢測(cè)精度高(1 ng/ml),線性范圍寬(8 000 ng/ml)，靈敏度明顯高于定性法[8]。

本研究以到醫(yī)院就診且臨床醫(yī)生認(rèn)為有必要做腸鏡檢查的患者為研究對(duì)象，在4種疾病分組中，結(jié)直腸癌的陽性檢出率最高，定量法與定性法分別為93.4%和54.1%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，定量法對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎和結(jié)直腸息肉的陽性檢出率低于結(jié)直腸癌的陽性率，3個(gè)疾病組的定量法陽性率均高于定性法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。其他炎性腸病組兩種方法的陽性檢出率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.423)。本次研究結(jié)果顯示，定量法與定性法相比，靈敏度更高，在下消化道出血性疾病檢測(cè)中有明顯優(yōu)勢(shì)，與張夢(mèng)文等[9,10]學(xué)者以整群抽樣方法進(jìn)行兩種檢測(cè)方法比較得出的結(jié)果較為一致。

定量法與定性法FOBT檢測(cè)均為免疫學(xué)方法，前者采用膠乳凝集光學(xué)檢測(cè)技術(shù)自動(dòng)檢測(cè)，后者采用免疫層析技術(shù)人工判讀結(jié)果。在兩者陽性閾值相同(100 ng/ml)的情況下，定量法的敏感性仍顯著高于定性法，筆者分析可能原因有：定量法在密閉環(huán)境下完成自動(dòng)化檢測(cè)，檢測(cè)條件標(biāo)準(zhǔn)化，減少了環(huán)境因素影響與人員操作誤差。定量法的采便方式更科學(xué)，通過采便器多部位刮取標(biāo)本，準(zhǔn)確定量，緩沖液可延長糞便中血紅蛋白的穩(wěn)定性[11]。而定性法檢測(cè)結(jié)果受患者采集糞便標(biāo)本的部位和方式，以及檢測(cè)者人工操作過程影響較大。定性法檢測(cè)存在明顯的鉤狀效應(yīng)，血紅蛋白濃度過高時(shí)出現(xiàn)假陰性結(jié)果[12,13]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隨著Dukes病理分期的進(jìn)展，檢測(cè)數(shù)值呈上升趨勢(shì)，結(jié)直腸癌組中FOBT定量陽性有71.2%(111/156)的病例已處于B期和C期，A期只占到16.0%(25/156)，說明因各種消化道癥狀到醫(yī)院就診的患者已錯(cuò)過了早期發(fā)現(xiàn)的時(shí)機(jī)。有研究顯示青年結(jié)直腸癌患者的誤診率達(dá)50%，且明確診斷時(shí)腫瘤分期在C期和D期多見[14]，因此，筆者認(rèn)為有必要在無癥狀人群中開展結(jié)直腸癌篩查的健康教育，尤其針對(duì)有高危因素存在的青年人群進(jìn)行糞便潛血初篩。

我國現(xiàn)行結(jié)直腸癌優(yōu)化序貫篩查方案為危險(xiǎn)因素(家族史、慢性腹瀉史、慢性便秘史)問卷調(diào)查及糞便潛血實(shí)驗(yàn)作為初篩，1次或1次以上潛血陽性者行腸鏡檢查[15]。方案中潛血實(shí)驗(yàn)為免疫層析膠體金定性檢測(cè)，筆者認(rèn)為如能用定量法替代，不僅能提高敏感性，還能提高精準(zhǔn)性，在追溯患者檢測(cè)結(jié)果時(shí)能從檢測(cè)數(shù)值的高低變化分析病情的變化。

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10.3969/j.issn.1002-7386.2016.08.025

項(xiàng)目來源：河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展支撐項(xiàng)目計(jì)劃(編號(hào):132777238)

050011 河北省石家莊市第一醫(yī)院

李立新，050011 河北省石家莊市第一醫(yī)院；

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R 446.1

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2015-11-23)