程曉娜 胡陽(yáng)黔

·論著·

不同菌型幽門螺桿菌感染消化性潰瘍患者IL-10、TNF-α的表達(dá)情況觀察

程曉娜 胡陽(yáng)黔

目的 觀察不同菌型幽門螺桿菌(H.pylori)感染消化性潰瘍患者白介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)情況。方法 選擇2012年3月至2014年11月接受治療的100例H.pylori感染消化性潰瘍患者作為研究病例，分別測(cè)定患者血清中IL-10、TNF-α水平。記錄患者血清中IL-10、TNF-α水平含量，并比較H.pylori感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍血清中IL-10、TNF-α水平含量。結(jié)果 IL-10的表達(dá)水平Ⅰ型H.pylori感染檢測(cè)值顯著高于H.pylori陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Ⅰ型H.pylori感染組檢測(cè)值僅稍高于Ⅱ型H.pylori感染組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。TNF-α的表達(dá)水平Ⅰ型H.pylori感染檢測(cè)值均顯著高于H.pylori陰性組及Ⅱ型H.pylori感染組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。IL-10的表達(dá)水平在Ⅰ型H.pylori感染及Ⅱ型H.pylori感染十二指腸球部潰瘍均與胃潰瘍基本相符，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；TNF-α的表達(dá)水平在Ⅰ型H.pylori感染十二指腸球部潰瘍顯著高于胃潰瘍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；TNF-α的表達(dá)水平在Ⅱ型H.pylori感染十二指腸球部潰瘍僅稍高于胃潰瘍，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍患者血清中的IL-10、TNF-α水平差異較大，可以為臨床上消化性潰瘍的診斷提供有利價(jià)值。

幽門螺桿菌感染;消化性潰瘍；白介素-10；腫瘤壞死因子-α

消化性潰瘍是臨床上較為常見(jiàn)的疾病之一，多發(fā)生于中年群體中。其主要致病菌為幽門螺桿菌(H.pylori)，占所有致病菌的80%以上。臨床上治療消化性潰瘍的關(guān)鍵在于根除H.pylori[1]。近年來(lái)，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。因此盡早地檢查并預(yù)防治療是臨床上的關(guān)鍵問(wèn)題。有研究表明，不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍患者血清中的白介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平含量顯著升高，可以作為消化性潰瘍的重要診斷指標(biāo)[2]。我院就不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍患者IL-10、TNF-α的表達(dá)情況進(jìn)行了本次試驗(yàn)，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年3月至2014年11月于我院接受治療的100例H.pylori感染消化性潰瘍患者作為研究病例。所有患者均經(jīng)胃鏡檢查被確診為消化性潰瘍。其中男52例，女48例；年齡41～69歲，平均年齡(53.6±4.7)歲；潰瘍直徑0.4～1.8 cm，平均潰瘍直徑(1.1±0.4)cm。經(jīng)胃黏膜活檢快速尿素酶試驗(yàn)檢測(cè)為H.pylori陽(yáng)性86例(H.pylori Ⅰ型62例，H.pylori Ⅱ型25例)，其中十二指腸球部潰瘍57例，胃潰瘍29例，H.pylori陰性14例。陽(yáng)性與陰性患者的性別比、年齡、潰瘍直徑等一般資料差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。整個(gè)試驗(yàn)均在患者及其家屬的同意簽署下完成。

1.2 方法

1.2.1 H.pylori基因抗體檢測(cè)具體方案措施為：于H.pylori陽(yáng)性患者中抽取空腹靜脈血4 ml，并將其置入存有抗凝劑的試管中，采用高速離心機(jī)進(jìn)行離心分離血清，轉(zhuǎn)速為3 000 r/min，15 min。采用免疫印跡法(BenchPro4100蛋白質(zhì)印跡處理系統(tǒng)，普瑞麥迪(北京)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司)測(cè)定血清中基因抗體。

1.2.2 血清中IL-10、TNF-α含量水平的測(cè)定：分別抽取所有患者的靜脈血4 ml，將其置于試管中，試管中保證無(wú)任何添加劑，最后將其置于-20℃的環(huán)境中進(jìn)行冷凍。實(shí)驗(yàn)時(shí)將其血清取出，然后再置于37℃溫浴箱中進(jìn)行孵化，同時(shí)將5℃的IL-10試劑盒及TNF-α試劑盒分別取出來(lái)，等到其溫度升到28℃為止，進(jìn)行配制標(biāo)準(zhǔn)品液，接著加洗滌液，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并加樣，將反應(yīng)板利用透明膠密封保存，然后洗板4～7次，將50 μl第一抗體工作液置于37℃反應(yīng)板上60 min，再次洗板后，將100 μl酶標(biāo)抗體工作液置于37℃反應(yīng)板上60 min，接著再洗板，再將100 μl底物液置于37℃溫浴箱中反應(yīng)10 min，同時(shí)在反應(yīng)板上再次加50 μl終止液，最后將反應(yīng)板置于酶標(biāo)儀(SP-Max 2300A光吸收型全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，上海閃譜生物科技有限公司)里，分別測(cè)定其吸光值。

2 結(jié)果

2.1 患者血清中IL-10水平比較 IL-10的表達(dá)水平在H.pylori Ⅰ型感染組檢測(cè)值顯著高于H.pylori陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；H.pylori Ⅰ型感染組檢測(cè)值僅稍高于H.pylori Ⅱ型感染組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 患者血清中IL-10水平比較

類別IL-10H.pyloriⅠ型(n=62)31.6±11.8*H.pyloriⅡ型(n=24)20.3±13.8 H.pylori陰性(n=14)19.2±6.2

注：與H.pylori陰性比較，*P<0.05

2.2 患者血清中TNF-α水平比較 TNF-α的表達(dá)水平在H.pylori Ⅰ型感染組檢測(cè)值顯著高于H.pylori陰性組及Ⅱ型H.pylori感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 3組患者血清中TNF-α水平比較

類別TNF-αH.pyloriⅠ型(n=62)43.6±11.7*H.pyloriⅡ型(n=24)29.5±8.4*#H.pylori陰性(n=14)11.6±4.5

注：與H.pylori陰性比較，*P<0.05；與H.pylori Ⅰ型比較，#P<0.05

2.3 H.pylori感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍血清中IL-10水平比較 IL-10的表達(dá)水平在H.pylori Ⅰ型感染及H.pylori Ⅱ型感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍基本相符，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表3 H.pylori感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍

血清中IL-10水平比較

類別H.pyloriⅠ型H.pyloriⅡ型十二指腸球部潰瘍(n=57)32.4±19.619.3±8.6胃潰瘍(n=29)30.6±15.921.4±8.5 t值0.42771.0747 P值0.66990.2856

2.4 H.pylori感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍血清中TNF-α水平比較 TNF-α的表達(dá)水平在H.pylori Ⅰ型感染十二指腸球部潰瘍顯著高于胃潰瘍，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；TNF-α的表達(dá)水平在H.pylori Ⅱ型感染十二指腸球部潰瘍僅稍高于胃潰瘍，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表4。

表4 H.pylori感染十二指腸球部潰瘍與胃潰瘍

血清中TNF-α水平比較

類別H.pyloriⅠ型H.pyloriⅡ型十二指腸球部潰瘍(n=57)48.2±10.628.9±11.6胃潰瘍(n=29)31.7±7.428.3±3.6 t值7.49470.2713 P值0.00000.7868

3 討論

消化性潰瘍是臨床上的常見(jiàn)病和易發(fā)病，臨床上常表現(xiàn)為腹部疼痛、燒心、噯氣、嘔吐及惡心等癥狀。近年來(lái)，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重制約著患者的身心健康，其形成主要有H.pylori感染、胃黏膜保護(hù)作用減弱、胃酸分泌過(guò)多等因素[3]。其中H.pylori感染的機(jī)制為：H.pylori可以通過(guò)增加胃酸的分泌，使得十二指腸發(fā)生生化反應(yīng)，從而導(dǎo)致胃黏膜產(chǎn)生炎性代謝物，最終改變了胃黏膜的屏障，引發(fā)了消化性潰瘍[4]。因此，采取何種指標(biāo)可以準(zhǔn)確有效的診斷消化性潰瘍是臨床上的關(guān)鍵性問(wèn)題[5]。

研究表明，IL-10、TNF-α水平顯著升高可以作為診斷不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍的重要診斷指標(biāo)，效果良好[6]。IL-10作為一種重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，其分泌合成主要是來(lái)自于TH2淋巴細(xì)胞，通過(guò)旁分泌方式或自分泌方式進(jìn)行發(fā)揮作用，從而降低免疫細(xì)胞的活性，可以抑制TH1淋巴細(xì)胞因子的活性，并阻止其合成路徑，發(fā)揮抗炎作用；同時(shí)還可以通過(guò)抑制T細(xì)胞來(lái)保持機(jī)體處于免疫反應(yīng)狀態(tài)[7-9]。一般情況下，TH1與TH2細(xì)胞亞群分泌的因子負(fù)反饋可以制約著TH1與TH2細(xì)胞的平衡。而H.pylori感染者可以促進(jìn)TH1免疫應(yīng)答抑制和TH2免疫應(yīng)答的增強(qiáng)，從而導(dǎo)致血清中IL-10的水平含量增加[10]。

本試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，Ⅰ型H.pylori感染者血清中IL-10的水平含量高達(dá)(31.6±11.8)pg/ml，顯著高于H.pylori 陰性患者(19.2±6.2)pg/ml。說(shuō)明IL-10的水平含量升高可以作為不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍的重要診斷指標(biāo)。長(zhǎng)期持續(xù)的H.pylori感染者可以加重TH1的免疫應(yīng)答，使得TNF-α水平含量增加[11-13]。TNF-α作為一種重要的促炎因子，可以引起炎性細(xì)胞移動(dòng)，同時(shí)使得胃黏膜局部微血管處于內(nèi)凝血狀態(tài)，從而造成胃黏膜的損傷[14]。本研究顯示，H.pylori 感染者血清中TNF-α水平含量高達(dá)(43.6±11.7)pg/ml，顯著高于H.pylori陰性患者(11.6±4.5)pg/ml，說(shuō)明TNF-α水平含量升高也可以作為不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍的重要診斷指標(biāo)，與相關(guān)文獻(xiàn)[15,16]一致。此外，本研究提示，十二指腸球部潰瘍患者血清中IL-10水平含量與胃潰瘍患者的基本相符，說(shuō)明血清中IL-10水平含量與潰瘍部位無(wú)關(guān)，與相關(guān)文獻(xiàn)[17]一致。但Ⅰ型H.pylori感染十二指腸球部潰瘍患者血清中TNF-α水平含量高達(dá)(48.2±10.6)pg/ml，顯著高于Ⅰ型H.pylori感染胃潰瘍患者(31.7±7.4)pg/ml，說(shuō)明血清中TNF-α水平含量與Ⅰ型H.pylori感染密切相關(guān)。

綜上所述，IL-10、TNF-α水平顯著升高可以作為診斷不同菌型H.pylori感染消化性潰瘍的重要診斷指標(biāo)，可以為臨床提供有效證據(jù)，值得臨床長(zhǎng)期推廣應(yīng)用。

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The investigation of expression levels of IL-10, TNF-α of different types of bacteria Helicobacter pylori infection in patients with peptic ulcer

CHENGXiaona,HUYangqian.

DongfengGeneralHospitalAffiliatedtoHubeiMedicineCollege,Hubei,Shiyan442000,China

Objective To investigate the expression levels of IL-10, TNF-α of different types of bacteria Helicobacter pylori (H.pylori)infection in patients with peptic ulcer.Methods The expression levels of IL-10,TNF-α in serum of 100 patients with H.pylori infection peptic ulcer who were treated in our hospital from March 2012 to November 2014,were detected and compared among different types of H.pylori infection groups.Moreover the expression levels of IL-10,TNF-α were compared between H.pylori infection duodenal bulb ulcer group and H.pylori infection gastric ulcer group.Results The expression levels of IL-10 in typeⅠH.pylori infection group were significantly higher than those in H.pylori negative group (P<0.05).However the expression levels of IL-10 in type ⅡH.pylori infection group were slightly higher than those in typeⅠH.pylori infection group,there were no significant differences between two groups (P>0.05). The expression levels of TNF-α in typeⅠH.pylori infection group were significantly higher than those in H.pylori negative group and type Ⅱ H.pylori infection group (P<0.05). There were no significant differences in the expression levels of IL-10 between typeⅠas well as type Ⅱ H.pylori infection duodenal ulcer group and gastric ulcer group (P>0.05). The expression levels of TNF-α in typeⅠH.pylori infection duodenal bulb ulcer group were significantly higher than those in gastric ulcer group (P<0.05),however, there were no significant differences in the expression levels of TNF-α between type Ⅱ H.pylori infection duodenal ulcer group and gastric ulcer group (P>0.05).Conclusion There are significant differences in the expression levels of IL-10,TNF-α among patients with different types of H.pylori infection peptic ulcer,thus,which are valuable in the diagnosis of peptic ulcer in clinic.

Helicobacter pylori infection;peptic ulcer;IL-10;TNF-α

10.3969/j.issn.1002-7386.2016.08.005

項(xiàng)目來(lái)源：湖北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào)：2011CDB00704)

442000 湖北省十堰市，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)總醫(yī)院

胡陽(yáng)黔，442000 湖北省十堰市，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)總醫(yī)院；

E-mail：chengxiaona1977@163.com

R 573.1

A

1002-7386(2016)08-1140-03

2015-08-06)