梁家彬，孟躍進（鄭州大學第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450014）

轉錄因子SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌組織中的表達及臨床意義

梁家彬，孟躍進*
（鄭州大學第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450014）

目的 探討轉錄因子SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌組織中的表達及臨床意義。方法 采用免疫組化SP法檢測卵巢上皮性癌組織45例（惡性組）、良性卵巢上皮性腫瘤組織20例（良性組）、正常卵巢上皮組織15例（正常組）中SOX2、OCT4蛋白的表達，分析兩蛋白的表達與卵巢上皮性癌臨床病理參數(shù)的關系及二者表達的相關性。結果 SOX2、OCT4蛋白在惡性組中的陽性表達率分別為77.8%和66.7%，顯著高于良性組的45%和30%和正常組的0%和0%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05） 。SOX2、OCT4蛋白的表達與臨床分期、分化程度及淋巴結轉移有關，而與病理類型無關。SOX2、OCT4蛋白在卵巢上皮性癌組織中的表達呈正相關，差異有統(tǒng)計學意義（rp=0.468，P＜0.05）。結論 SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌組織中高表達，兩者可能協(xié)同參與卵巢上皮性癌的發(fā)生發(fā)展。

SOX2；OCT4；卵巢上皮性癌

卵巢上皮性癌（Epithelial ovarian cancer，EOC）是婦科常見的惡性腫瘤之一，雖然臨床上能夠采用手術、放化療等綜合治療方法進行治療，但其死亡率仍居婦科腫瘤首位，其發(fā)病率也呈逐年上升趨勢，因此，尋找新的診療方法勢在必行。腫瘤干細胞是一類具有自我更新、多向分化、高致瘤性等特點的特殊類型的細胞，與腫瘤侵襲、轉移、復發(fā)密切相關，近年來在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等惡性腫瘤中已成功分離出了腫瘤干細胞[1]。性別決定區(qū)Y框蛋白2（SOX2）是SOX家族的成員之一，研究表明該基因在維持干細胞的多能性方面起著重要作用[2]。八聚體結合轉錄因子4（OCT4）在胚胎細胞中表達，是細胞分化全能性的標記，表達OCT4的細胞可能是引起腫瘤發(fā)生的起始細胞[3]。本研究通過檢測SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌中的表達變化，分析二者的相關性，探討二者在EOC發(fā)生發(fā)展中的作用，為臨床治療尋找新的靶點。

1 材料與方法

1.1 一般材料

選取2011年8月～2015年7月我院患者的手術標本80例，患者年齡21～79歲，平均年齡53.5歲，所有患者術前均未行放化療或激素治療，經(jīng)病理證實正常卵巢上皮組織15例，良性卵巢腫瘤20例，卵巢上皮性癌45例，其中漿液性囊腺癌27例，黏液性囊腺癌11例，子宮內膜樣癌7例。按國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）分期：Ⅰ～Ⅱ期11例，Ⅲ～Ⅳ期34例；低分化25例，高、中分化20例；淋巴結轉移29例，無淋巴結轉移16例。

1.2 方法

1.2.1 試劑

兔抗人SOX2多克隆抗體、兔抗人OCT4多克隆抗體均購自北京博奧森生物技術有限公司。二抗及顯色劑購自北京中杉金橋生物有限公司。操作步驟按說明書進行，用已知的陽性切片作陽性對照，用PBS代替一抗作陰性對照。

1.2.2 結果判定

SOX2和OCT4蛋白均表達于細胞核，以細胞核呈棕黃色或 棕褐色顆粒為陽性。在400倍光鏡下隨機選擇5個高倍視野進行觀察，按染色強度計分：無色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；再按陽性細胞率計分，陽性細胞百分數(shù)＜10%為1分，10%～50%為2分，＞50%為3分；以上兩種方法結果的乘積，積分＜3分為陰性（-），≥3分為陽性（+）。結果判定在雙盲下進行，每張切片分別由3名病理科醫(yī)生計數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計數(shù)資料采用x2檢驗，相關性分析采用Spearman法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 SOX 2和OCT4蛋白在三組不同組織中的表達

SOX2和OCT4蛋白陽性染色均位于細胞核，SOX2蛋白在正常組、良性組、惡性組中的陽性表達率分別為0% （0/15）、45.0%（9/20）、77.8%（35/45），差異有統(tǒng)計學意義（x2=28.575，P＜0.05）；組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05)。OCT4蛋白在以上三組中的陽性表達率分別為0%（0/15）、30.0%（6/20）、66.7%（30/45），差異有統(tǒng)計學意義（x2=22.626，P＜0.05）；組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見圖1、表1。

圖1 SOX2和OCT4在不同卵巢上皮組織中的表達（SP×400）注：A：SOX2；B:OCT4；1：正常組； 2：良性組；3：惡性組

表1 SOX4和OCT4在不同卵巢上皮組織中的表達 [n（%）]

2.2 SOX2和OCT4蛋白的表達 與EOC臨床病理參數(shù)的關系

SOX2和OCT4蛋白的表達均與臨床分期、分化程度和淋巴結轉移有關（P＜0.05）；與病理類型無關（P＞0.05）。見表2。

表2 SOX2 和OCT4蛋白的表達與EOC臨床病理參數(shù)的關系 [n（%）]

2.3 SOX2、OCT4蛋白表達的相關性分析

45例EOC患者中SOX2和CyclinD1蛋白表達均陽性者28例，均陰性者8例，SOX2表達陽性、OCT4表達陰性者7例，SOX2表達陰性、OCT4表達陽性者2例，兩者呈正相關，差異有統(tǒng)計學意義（x2=10.045，P=0.002，rp=0.468）。

表3 在EOC組織中SOX2和OCT4蛋白表達的相關性

3 討 論

SOX2是SOX（SRY-related HMG-box）家族成員之一，是胚胎干細胞表面標志物之一，在調控胚胎及組織發(fā)育，干細胞分化、增殖和決定細胞命運等方面起著重要作用[2]。近年研究發(fā)現(xiàn)SOX2在乳腺癌、前列腺癌、肺癌等多種實體瘤中異常表達，并與腫瘤的侵襲、轉移密切相關[4]。Fang 等[5]的研究結果顯示，結腸癌組織中SOX2的表達明顯高于癌旁正常組織，且在結腸癌細胞系SW620中敲除SOX2基因不僅能夠抑制腫瘤細胞的生長，也能夠抑制小鼠異體移植模型中腫瘤的生長。Sanada Y等[6]發(fā)現(xiàn)，在胰腺癌的發(fā)展過程中Sox2的表達逐漸增強，尤其在分化差和浸潤轉移的癌組織中表達更加明顯。本研究結果顯示，SOX2蛋白在惡性組中的表達明顯高于良性組及正常組，進一步研究發(fā)現(xiàn)，SOX2蛋白的表達與FIGO分期、組織分化程度及淋巴結轉移有關，該結果與上述腫瘤中的研究結果相似，提示SOX2不僅參與了卵巢上皮性癌的發(fā)生，也與卵巢上皮性癌的侵襲轉移密切相關。

干細胞標志物的另一重要指標OCT4基因是POU轉錄因子家族中的一員，不僅能夠調控正常細胞的分化，也在維持胚胎干細胞的多潛能性和自我更新方面發(fā)揮極其重要的作用。目前，不僅在生殖細胞瘤中檢測到OCT4的表達，也在一些上皮性腫瘤如胃癌、口腔癌、乳腺癌等許多腫瘤中檢測到OCT4高表達，并與腫瘤的轉移、復發(fā)、預后密切相關。本研究結果顯示，OCT4蛋白在惡性組中明顯高表達，與正常組及良性組比較差異有統(tǒng)計學意義，說明OCT4參與了卵巢上皮性癌的發(fā)生，進一步研究顯示，OCT4蛋白的表達與FIGO分期、組織分化程度及淋巴結轉移有關，提示OCT4還參與了卵巢上皮性癌的侵襲轉移過程。

兩種轉錄因子并不是孤立發(fā)揮作用，兩者之間存在復雜的前饋調節(jié)、反饋調節(jié)和自身調節(jié)。據(jù)報道，SOX2可以同OCT4結合為異二聚體，調節(jié)Nanog、Utfl、Fbx15等轉錄因子的轉錄。本研究通過對兩者的相關性進行研究發(fā)現(xiàn)，卵巢上皮性癌組織中兩者的表達呈正相關，說明兩者可能是通過協(xié)同作用促進腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。

綜上所述，SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌中表達明顯

上調，兩者與卵巢上皮性癌的發(fā)生發(fā)展密切相關，可能是卵巢上皮性癌惡性程度高，呈侵襲性生長的原因之一，聯(lián)合監(jiān)測兩者在卵巢上皮性癌中的表達，可以為臨床判斷卵巢上皮性癌惡性程度提供有效參考，為卵巢癌的發(fā)病機制及靶向治療提供了新思路。

[1]Duarte S,Momier D,BaquéP,et al.Preventive cancer stem cell-based vaccination reduces liver metastasis development in a rat colon carcinoma syngeneic model[J].Stem Cells,2013,(3):423-432.

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[3]Van Den Berg DL,Snoek T,Mullin NP,et al.An Oct4-centered protein interaction network inembryonic stem cells[J].Cell stem cell,2010,6(4):369-381.

[4]張光杰.轉錄因子SOX2在常見腫瘤研究中的新進展[J].重慶醫(yī)學,2012,41(21):2221-2223.

[5]Fang X,Yu W,Li L,et al.ChIP-seq and functional analysis of the SOX2 gene in colorectal cancers[J].OMICS,2010,14(4):369-384.

[6]Sanada Y,Yoshida K,Ohara M,et al.Histopathologic evaluation of stepwise progression of pancreatic carcinoma with immunohistochemical analysis of gastric epithelial transcription factor SOX2: comparison of expression patterns between invasive components and cancerous or non-neoplastic intraductal components[J].Pancreas,2006,32(2):164-170.

R735.2

B

ISSN.2095-8803.2016.03.028.03

孟躍進，男，主任醫(yī)師，E-mail：13838001776@163.com

梁家彬（1978-），男，黑龍江哈爾濱人，本科，主治醫(yī)師，研究方向：婦產(chǎn)科臨床與科研工作

吳玲麗

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