摘 要：黃曲霉毒素是在濕熱環(huán)境中出現(xiàn)的一種曲霉次代謝產(chǎn)物，由于毒性較大，因此對于人體產(chǎn)生的危害也比其他毒素要顯著。隨著20世紀(jì)微生物學(xué)的發(fā)展，對于黃曲霉毒素的研究也日益加深。由于黃曲霉毒素極易產(chǎn)生在一些食品中，因此國際上對于食品中黃曲霉毒素的含量有一個嚴(yán)格的限制。而該文就著重對于黃曲霉毒素的檢測方法以及研究進(jìn)行分析討論，分析高效液相色譜法以及快速檢測方法，并對競爭性酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行重點分析。

關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素 檢測方法 研究

中圖分類號：R284 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2016）08（a）-0054-02

黃曲霉毒素是一類物質(zhì)，這類物質(zhì)有相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其主要是黃曲霉與寄生曲霉產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物。由于其在土壤中以及植物中廣泛存在，因此很容易對人類所攝食的各種農(nóng)作物進(jìn)行感染，進(jìn)而危害人們的身體健康。一旦溫度與濕度達(dá)到一定的范圍內(nèi)，就會增加食物感染黃曲霉毒素的幾率，這種毒素可急可慢，急性毒素可使人猝死，而慢性毒素會導(dǎo)致人體患癌癥的幾率大大增加。正是這種巨大的危害性使得諸多國家對黃曲霉毒素的檢測方法進(jìn)行深刻研究，該文就高效液相色譜法與快速檢測方法進(jìn)行探討分析，并對競爭性酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行著重介紹。

1 高效液相色譜法

1.1 柱后溴衍生化熒光檢測

由鄧恩等人在食用調(diào)味品進(jìn)行柱后溴衍操作，然后采用熒光檢測儀器對其進(jìn)行檢測，可以有效地檢測出被檢測樣品中的黃曲霉毒素的量，這種定量的檢測分析操作即是柱后溴衍生化熒光檢測。在鄧恩團(tuán)隊得出這一檢測方法之后，歐洲諸多國家的研究人員也針對這一檢測方法展開了研究工作。斯特卡與其他的實驗研究人員將一些農(nóng)作物制備的醬類和其他的調(diào)味品作為實驗的研究原料，在這種具備流動性質(zhì)的實驗原料添加檢測所需的溴化物，利用相應(yīng)的熒光檢測儀器進(jìn)行檢測，得出基本的數(shù)據(jù)量，然后，向原料中添加兩個水平的黃曲霉毒素，再用柱后溴衍生化熒光法進(jìn)行檢測，最終檢測的實驗數(shù)據(jù)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黃曲霉毒素的檢測增加量為實際添加量的73%～91%，進(jìn)一步證明了柱后溴衍生化熒光法檢測黃曲霉毒素的有效性。柱后溴衍生化熒光檢測由于其準(zhǔn)確性較高，靈敏度較強，要求較低等優(yōu)點曾在一段時間內(nèi)成為黃曲霉毒素檢測的關(guān)鍵手段。

1.2 柱后碘衍生化熒光檢測

柱后碘衍生化熒光檢測與柱后溴衍生化熒光檢測相似，但在柱后碘衍生化熒光檢測當(dāng)中由碘作為熒光追蹤標(biāo)記。這種方法是由歐美以及南非等24個實驗室聯(lián)合實驗確認(rèn)的。他們在進(jìn)行實驗的過程中，依次采用了柱后碘衍生化熒光檢測以及柱后溴衍生化熒光檢測，其單獨檢測方式與上述的柱后溴衍生化熒光檢測方式相同，然后對檢測出的黃曲霉毒素進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。最終數(shù)據(jù)顯示兩者的檢測精確度相近，但柱后溴衍生化熒光檢測相比較于柱后碘衍生化熒光檢測要更加接近。且通過他們的實驗，最終這種黃曲霉毒素的檢測方法得到了確立以及廣泛的應(yīng)用，被納入了諸多國家的國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法當(dāng)中，同樣也列入了我國的國家標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)中。

1.3 柱前衍生化熒光檢測

柱前衍生化熒光檢測是由我國的李佐卿等人開發(fā)出來的方法，主要是運用親和柱以及三氟醋酸對待檢驗產(chǎn)品進(jìn)行柱前衍生化，然后利用熒光檢測儀器對待檢測產(chǎn)品中的熒光部位進(jìn)行追蹤與定量分析，進(jìn)而完成對黃曲霉毒素的檢測。在我國，主要被用來對進(jìn)出口茶葉中黃曲霉毒素的檢測以及蜂蜜和酒產(chǎn)品中的黃曲霉毒素定量。李佐卿等人的研究是對添加一定量黃曲霉毒素的產(chǎn)品進(jìn)行回收率的檢測，通過10次的平行試驗得出各組的平均回收率。其回收率大多控制在70%～90%左右。實驗人員在進(jìn)行柱前熒光檢測的同時，還進(jìn)行了柱后生化熒光檢測，然后將兩者的實驗數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行對比，最終發(fā)現(xiàn)，柱前衍生化熒光檢比柱后衍生化熒光檢測靈敏度提升了3個層次，因此，在進(jìn)行高效液相色譜法檢測黃曲霉毒素時，若對準(zhǔn)確度的要求極高，則需采用柱前衍生化熒光檢測。

2 快速檢測方法

2.1 TLC法

在黃曲霉毒素的快速檢測當(dāng)中，以3種方法為主，分別為競爭性酶聯(lián)免疫吸附法、薄層色譜法以及溴化熒光分光光度計法。TLC法便是薄層色譜法，其操作步驟是先將薄層鋪展，利用一定納米下的紫外燈光進(jìn)行照射，憑借不同的顯色來進(jìn)行黃曲霉毒素的檢測，這種方法操作簡單，價格低廉且對于干擾的抵抗能力較強。這種方法在對中草藥的污染殘留方面的檢測有較強的作用，我國的國家標(biāo)準(zhǔn)以及美國藥典都將這種方法納入藥物質(zhì)量安全檢測的評價指南當(dāng)中。

2.2 溴化熒光分光光度法

在溴化熒光分光光度法中，首先將需要檢測的樣品進(jìn)行處理，經(jīng)過有機溶液的提取后，對提取液進(jìn)行分離，然后用溴試劑進(jìn)行衍生化，利用專門的熒光檢測儀器進(jìn)行熒光追蹤與檢測。通過實驗結(jié)果的數(shù)值顯示可以得出黃曲霉毒素在樣品中的含量。其快速、簡便的優(yōu)點使得這種方法極其適用于大量樣品的黃曲霉毒素檢測。由于該方法所涉及的實驗用品及儀器相對較少，且價格較為低廉，使得許多公司企業(yè)與國家機關(guān)選用這種方法對產(chǎn)品進(jìn)行檢測把關(guān)。

2.3 競爭性酶聯(lián)免疫吸附法

競爭性酶聯(lián)免疫吸附法是快速檢測法當(dāng)中效果最明顯、靈敏度最高的檢測方法，同時也是我們探討分析的主要研究方法。競爭性酶聯(lián)免疫吸附法又稱ELISA法，這種方法在20世紀(jì)90年代就已經(jīng)成為美國分析化學(xué)家協(xié)會的官方指定的黃曲霉毒素檢測方法。更是被我國列為國標(biāo)的第二法。在李延生等研究人員的實驗工作中，利用競爭性酶聯(lián)免疫吸附法對中草藥中的黃曲霉毒素的含量進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在一些根類中草藥以及種子類中草藥當(dāng)中含有黃曲霉毒素的概率相比較其他部位的中草藥概率要大。但是，由于這種方法所采用的檢測試劑盒中的黃曲霉毒素的抗體不能夠有效地將黃曲霉毒素的幾種不同類別的毒素有效地分開，因此，競爭性酶聯(lián)免疫吸附法所測定的黃曲霉毒素的量同樣是毒素總量，這是我國研究人員對于競爭性酶聯(lián)免疫吸附法在中草藥中的運用。在一些糧油食品中的黃曲霉毒素的檢測上，競爭性酶聯(lián)免疫吸附法同樣能夠發(fā)現(xiàn)重要的功效。由蔡正森團(tuán)隊主持的糧油食品中的黃曲霉毒素的實驗當(dāng)中，他們采用競爭性酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測，同樣對糧油產(chǎn)品的黃曲霉毒素有了明確的了解與確定。競爭性酶聯(lián)免疫吸附法相比較薄層色譜法以及溴化熒光分光光度計法來說，具有更高的靈敏度、更強的選擇性、更快速的檢測速度以及更高效的檢測手段。但其對藥品與儀器的要求相比較另外兩種操作手段來說也相對較高，因此，其并未能夠在企業(yè)與檢測機關(guān)當(dāng)中得到廣泛的應(yīng)用。但是，它的諸多優(yōu)點又使得其成為不可忽視的一種重要的黃曲霉毒素的檢測方式。

3 結(jié)語

隨著社會的不斷進(jìn)步，人們生活水平的不斷提升，人們對于飲食的安全關(guān)注度也越來越高。黃曲霉毒素作為污染食品的毒素之一，對人體會產(chǎn)生極大的危害，若食品中的毒素含量較少隨著逐年的攝入會增加人體患癌的幾率，而食物中毒素含量較多在攝入后會引起人體的急劇中毒反應(yīng)，嚴(yán)重會直接導(dǎo)致死亡。因此，對食物中的黃曲霉毒素進(jìn)行檢測成為諸多國家的食品安全檢測的重點所在。該文通過對高效液相色譜法以及快速檢測法進(jìn)行分析探討，并就競爭性酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行著重討論，以求提升我國各企業(yè)與部門對于食物中黃曲霉毒素含量的重視，保證我國的食品安全。

參考文獻(xiàn)

[1]GB18979-2003，食品中黃曲霉毒素的測定免疫親合層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法[S].

[2]林海丹，林峰.免疫親和柱測定果仁中黃曲霉毒素[J].檢驗檢疫科學(xué)，2002，12（1）：241.