吳佳寧

摘要：對鵝副黏病毒病的幾種實驗室診斷方法進行了對比分析。

關(guān)鍵詞：鵝副黏病毒病；實驗室診斷；分析

中圖分類號：S835 文獻標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2016）02-0037-01

鵝副黏病毒病是由鵝源禽Ⅰ型副黏病毒感染所引起的鵝的一種烈性傳染病。與雞新城疫病毒同屬于副黏病毒科副黏病毒亞科腮腺炎病毒屬。根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理剖檢變化可以作出初步診斷，確診需通過血凝和血凝抑制試驗、血清學(xué)診斷等，本文闡述了幾種實驗室診斷方法。

1 血凝-血凝抑制試驗（HA、HI試驗）

鵝副黏病毒囊膜表面纖突上的血凝素能與紅細胞表面的受體結(jié)合，引起紅細胞凝集，而且這種凝集可被抗血清特異性抑制，因此可以用HA、HI試驗進行診斷以及進行流行病學(xué)調(diào)查等研究。吳力力等[1]對兩株鵝源禽副黏病毒進行了血凝特性研究，并以雞新城疫病毒LaSota株作對照，經(jīng)研究表明鵝源禽副黏病毒和雞新城疫病毒二者的血凝效果相似，結(jié)果表明鵝源禽副黏病毒的血凝譜與雞新城疫病毒相近，但存在一定差異。專家通過進行HI試驗發(fā)現(xiàn)，GPMV/QY9721株與NDV都具有血凝素，可以致使紅細胞發(fā)生凝集，但病毒結(jié)構(gòu)或生物學(xué)活性存有差異。其分子生物學(xué)還需進一步的研究。吳虎等[2]研究發(fā)現(xiàn)，鵝副黏病毒GPMV/QY9721株經(jīng)雞胚、鵝胚傳代后的對雞、鴨、鵝、鴿、鵪鶉的紅細胞均有較強的凝集作用，血凝譜與雞新城疫病毒血凝普相似，血凝效價存有一定的差異性。在進行血凝-血凝抑制實驗的結(jié)果判定時，在PBS對照孔出現(xiàn)正確結(jié)果的情況下，需要將反應(yīng)板傾斜，從背側(cè)觀察紅細胞狀態(tài)，看紅細胞是否呈淚珠狀流下。滴度是判定試驗結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)，陽性血清與標(biāo)準(zhǔn)抗原對照的HI滴度與已知滴度相差在1個稀釋度范圍內(nèi)，并且所用陰、陽性血清都不發(fā)生自凝的情況下，HI試驗結(jié)果方判定有效。但是由于血凝普以及在實際操作過程中試驗的判定存在一定的誤差，故判定的可靠性稍差。

2 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA試驗）

酶聯(lián)免疫吸附試驗具有快速、敏感、簡便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點，是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用最廣的技術(shù)，隨著方法的不斷改進、材料的不斷更新，大大提高了ELISA的特異性，更適用于基層獸醫(yī)部門血清學(xué)診斷和流行病學(xué)調(diào)查。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。朱國強等[3]應(yīng)用間接ELISA檢測表明，鵝源APMV-1型單克隆抗體既能識別NDVF48E8和NDVN88標(biāo)準(zhǔn)株，也能識別新城疫SD20和AH20分離株。王永坤等[4]應(yīng)用一株鵝副黏病毒制備單克隆抗體建立了快速酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法，除了獲得具有鵝副黏病毒共同反應(yīng)的單克隆抗體外，還獲得僅對鵝源副黏病毒毒株和雞分離株呈陽性反應(yīng)，而對標(biāo)準(zhǔn)新城疫毒株不反應(yīng)的單克隆抗體。

3 單克隆抗體標(biāo)記技術(shù)（McAb）

單克隆抗體標(biāo)記技術(shù)具有能檢測抗原表位上單個氨基酸改變細微抗原性變異的特點，單一的或一組單克隆抗體標(biāo)記技術(shù)可用于病毒鑒定、分型、排譜和抗原性分析。目前單克隆抗體標(biāo)記技術(shù)已在鵝源鵝副黏病毒-1型的血清型區(qū)分、特異性快速鑒定和流行病學(xué)研究等領(lǐng)域得到有效利用。李玉峰等[5]通過SDS-PAGE發(fā)現(xiàn)鵝源副黏病毒與傳統(tǒng)NDV在F蛋白上具有一定的抗原性差異，其F蛋白約為60ku，應(yīng)用該GPMV制備針對這條特異性多肽的單抗僅對鵝源副黏病毒呈陽性反應(yīng)，而對經(jīng)典NDV不反應(yīng)，以此區(qū)分鵝源副黏病毒與傳統(tǒng)NDV。

參考文獻：

[1] 吳力力，萬洪全，許益民，等. 鵝副粘病毒血凝譜的初步研究[J].中國禽業(yè)導(dǎo)刊，1998，19 （1）：59-62.

[2] 吳 虎，趙太云.鵝副粘病毒的分離與鑒定[A].中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會傳染病學(xué)分會第五屆會員代表大會暨第九次學(xué)術(shù)研討會論文集[C].山東煙臺：中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會傳染病學(xué)分會，2001.

[3] 朱國強，何海蓉，王永坤，等.禽副粘病毒I型引起鵝副黏病毒病的診斷[J].中國獸醫(yī)科技 ，2000，30（11）：13-14.

[4] 王水坤，嚴維巍，周繼宏，等.鵝副粘病毒病病毒分類地位及其防制的研究[A].中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會暨第九次學(xué)術(shù)研討會論文集[C].山東煙臺：中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會，2001.

[5] 李玉峰，嚴維巍，周繼宏，等.禽副粘病毒I型抗原性差異初探[J].山東家禽，2000（6）：7-9.