張　海孫建濤（.福建省龍巖市永定區(qū)農(nóng)業(yè)人才協(xié)會；.廣州市華南農(nóng)大生物藥品有限公司）

?

一例黃羽肉雞沙門氏菌病的診斷與治療

張海1孫建濤2
（1.福建省龍巖市永定區(qū)農(nóng)業(yè)人才協(xié)會；2.廣州市華南農(nóng)大生物藥品有限公司）

摘要筆者近日接到龍巖地區(qū)一飼養(yǎng)黃羽肉雞發(fā)病后持續(xù)控制不下來的發(fā)病案例，通過臨床表現(xiàn)、剖檢變化、實驗室檢查（細菌分離培養(yǎng)、病毒分離鑒定、生化試驗、藥敏試驗）等綜合診斷確認為沙門氏菌病，根據(jù)藥敏試驗結果采取在全群飲水中添加硫酸安普霉素可溶性粉，同時添加葡萄糖和口服補液鹽，連續(xù)飲用4 d，并緊急注射頭孢噻呋鈉的治療方案后疫情得到較好控制，減少了飼養(yǎng)戶的經(jīng)濟損失。

關鍵詞黃羽肉雞沙門氏菌病診斷藥敏試驗

伴隨家禽養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大、集約化程度越來越高的發(fā)展模式，家禽飼養(yǎng)的空間密度不斷在人為地加大，這樣環(huán)境中存在的大量條件性致病菌的危害就會越來越大，這些病菌的致病危害已經(jīng)成為當前養(yǎng)殖業(yè)不可忽視的重要部分。這些致病菌中尤以沙門氏菌為最，原因是沙門氏菌既可通過垂直傳播感染，也可通過污染的飼料、器具、飲水等進行水平傳播，其帶來的危害越來越嚴重[1-2]。筆者在臨床中遇到1例由沙門氏菌引發(fā)的黃羽肉雞60日齡感染病例，現(xiàn)報道如下。

2015年4月11日，福建省龍巖地區(qū)一養(yǎng)殖戶在林中飼養(yǎng)的8 000羽三黃雞發(fā)生以食欲急劇衰退、精神萎靡、嚴重腹瀉、消瘦和零星死亡為主要癥狀的疾病，至4月15日已死亡80余羽。該群肉雞1～3日齡用阿莫西林等開口藥飲水；5日齡免疫接種新支二聯(lián)弱毒苗和新支流滅活油乳苗；10日齡傳染性法氏囊病疫苗飲水；12日齡免疫H5（6+7）滅活油乳苗；25日齡免疫H5（5+7）滅活油乳苗和新流二聯(lián)滅活油乳苗；60日齡免疫H5（6+7）滅活油乳苗。雞群開始發(fā)病時采用硫酸新霉素+強力霉素進行治療，無明顯效果。至就診時，雞群發(fā)病時長約4 d，死亡80余羽。養(yǎng)殖戶在使用常見的幾種抗生素后不見效果。

1　臨床癥狀

患雞發(fā)病日齡60 d，精神沉郁，采食量減退，消瘦，胸骨彎曲，行動遲緩，癱瘓，雙翅下垂，縮頭閉目，羽毛松亂，嚴重腹瀉，起初排黃白色糊狀糞便，繼而排水樣稀糞，肛門周圍被糞便污染，呈綠色糊狀污穢，后期多因衰竭而死亡[3]。

2　剖檢變化

剖檢病死雞30羽，病死雞心冠有出血斑點、表面有大量白色結節(jié)，肝臟腫大、褪色，質脆易碎，偶見菜花樣大壞死灶區(qū)，少數(shù)病例肝臟破裂，腹腔積有血塊，脾臟腫大、表面有壞死結節(jié)呈斑駁狀，肌胃表面有白色結節(jié)，腎臟出血、瘀血，腸道黏膜出血潰瘍，有的腸黏膜脫落。

3　實驗室檢查

3.1細菌分離培養(yǎng)無菌條件下采集患雞肝臟，用接種環(huán)蘸取肝臟內液后劃線于SS瓊脂培養(yǎng)基表面，置37℃溫箱培養(yǎng)24 h，觀察發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面出現(xiàn)無色半透明，中心黑色或幾乎全部黑色的菌苔，這種特性與沙門氏菌的培養(yǎng)特性基本一致。然后再挑取單個菌落進一步純化培養(yǎng)，取純化培養(yǎng)菌進行革蘭氏染色，挑取少許菌落在玻片上用生理鹽水稀釋，將涂片在火焰上固定，滴加結晶紫染色液染1 min，水洗；滴加革蘭氏碘液作用1 min，水洗；滴加脫色酒精，約30 s，水洗；滴加沙黃復染液，復染1 min，水洗，干后鏡檢，革蘭氏陽性菌呈紫色；革蘭氏陰性菌呈紅色。

3.2生化特性試驗用無菌接種環(huán)鉤取純化后的單個菌落接種到微量發(fā)酵管內，將管倒置后放37℃溫箱中觀察2 d[4]。

3.3藥敏試驗選擇12種臨床常見抗菌藥物藥敏紙片，采用藥敏紙片擴散法在LB瓊脂平板上操作，37℃培養(yǎng)24 h觀察結果。判定標準為：藥物抑菌圈直徑＞20 mm為高敏，15～20 mm為中敏，10～15 mm為低敏，＜10 mm為不敏感[4]。

3.4病毒分離鑒定取發(fā)病雞肝臟、脾臟、胰腺進行研磨，加PBS液稀釋后制成懸液，反復凍融3次；7 000 r/min，離心15 min；加入1萬u過濾好的抗生素，置4℃作用1.5 h；7 000 r/min，離心15 min；每胚0.2 mL，接種10～11日齡SPF雞胚。收獲胚液進行HA檢測，對HA陽性樣品進行特異性檢測；HA陰性者，將胚液繼續(xù)接種雞胚盲傳，至少盲傳至F3代。接種后雞胚繼續(xù)放在溫箱中孵育，每隔24 h觀察一次雞胚情況[4]。

4　結　果

4.1細菌分離在SS瓊脂平板上分離所得的細菌菌落較純，可見菌落光滑、細小，在自然光下呈藍灰色或灰白色閃光，整齊均一。革蘭氏染色后鏡檢呈陰性、細長桿菌，無芽孢，有聚集，偶見兩個或多個連在一起。

4.2生化試驗分離菌能發(fā)酵葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、木糖、果糖以及甘露醇等物質并產(chǎn)酸，符合雞沙門氏菌的生化特性。

4.3藥敏試驗結果見表1。

表1　藥敏試驗結果

4.4病毒分離HA陰性，也未出現(xiàn)死胚及其他異?，F(xiàn)象，病料接種雞胚后144 h，雞胚仍全部存活，這樣便可排除病毒感染。

5　治　療

從藥敏試驗結果來看，該菌對頭孢類高度敏感，對氨基糖苷類藥物和多粘菌素B中度敏感，對頭孢曲松、四環(huán)素、諾氟沙星、左氟沙星、阿米卡星、復方新諾明、青霉素G、復方新諾明等不敏感或耐藥。因此建議該養(yǎng)殖戶馬上采取如下措施：全群飲水中添加硫酸安普霉素可溶性粉，同時添加葡萄糖和口服補液鹽，連續(xù)飲用4 d，并緊急注射頭孢噻呋鈉；用藥后第3 d，雞群采食量明顯上升，死亡逐漸停止，全群精神狀態(tài)逐漸恢復正常，疫情得到控制。

6　討　論

1）肉雞沙門氏菌病的發(fā)生，多與養(yǎng)殖環(huán)境差有關，南方黃羽雞多數(shù)都在林間飼養(yǎng)，受場地衛(wèi)生條件和氣候變化影響比較大，同時還與飼料、飲水不潔有關，因此要預防該病，必須加強雞場的飼養(yǎng)管理和環(huán)境衛(wèi)生工作，保持飼料和飲水的清潔衛(wèi)生[1]。沙門氏菌病要做好如下防控：（1）種源凈化：沙門氏菌病是垂直傳播性疾病，做好種禽的防疫工作尤為重要。種禽的健康直接關乎肉雞的健康，因此要做好源頭的防控工作。（2）流通環(huán)節(jié)：禽苗在運輸過程中也要注意器具、車輛的消毒衛(wèi)生，嚴防細菌滋生蔓延。（3）養(yǎng)殖環(huán)節(jié)：1日齡開口藥的預防工作也要做好，選用合適的抗生素進行預防，如頭孢類抗生素等的飲水、注射等；環(huán)境場地的衛(wèi)生消毒工作；定期的預防性用藥，掌握好疾病發(fā)生規(guī)律，定期選擇性投藥。

2）合理用藥，當前沙門氏菌病的治療由于其在臨床上用藥的不合理性造成菌株耐藥性的不斷增加，現(xiàn)有的廣譜抗生素和抗革蘭氏陰性菌等抗生素的效果越來越差。該病例在發(fā)病過程中，曾使用強力霉素、氟苯尼考、氧氟沙星和阿米卡星等多種臨床常用藥物，但治療效果均不理想。因此選擇藥物要合理，要選擇療效確切、毒副作用小、使用途徑方便及價格低廉并且配伍禁忌少的藥物，同時要注意聯(lián)合用藥，選擇協(xié)同作用強的藥物組合。要密切觀察用藥后群體的反應情況，做好記錄等。

參考文獻：

[1]陸承平.獸醫(yī)微生物學[M].3版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2001：214-223.

[2]李健強，李六金.獸醫(yī)微生物學實驗實習指導[M].西安:陜西科學技術出版社，1999：156-171.

[3]張永利，萬獻堯.細菌耐藥性研究進展[J].中國醫(yī)師雜志，2004（12）：1721-1722.

[4]汪毅.雞大腸埃希菌分離鑒定與藥敏試驗[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2001（4）：18-19.

文獻標識碼：B

文章編號：1003-4331（2016）01-0045-02