周新人，王方，云升皓，寇俊峰，蔡國芳，楊興坤，馮淑賢

臍帶血干細胞治療失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化療效觀察

周新人，王方，云升皓，寇俊峰，蔡國芳，楊興坤，馮淑賢

目的觀察臍帶血干細胞治療失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化患者的安全性及對肝功能的改善作用。方法選擇失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化患者60例，隨機分為治療組30例和對照組30例。對照組行護肝治療，治療組在此基礎上經(jīng)股動脈插管至肝固有動脈，注入臍帶血干細胞治療。結(jié)果治療后8 w，治療組和對照組血清ALB水平分別為（33.1±8.3）g/L和（25.6±7.6）g/L，PTA分別為（43.0±11.4）%和（38.2±12.5）%，差異有顯著性（P<0.05）；GGT水平分別為（250.3±17.5）U/L和（360.3± 16.5）U/L，ALP水平分別為（380.3±16.5）U/L和（510.3±17.5）U/L，IgM水平分別為（21.3±16.5）g/L和（32.5±18.5）g/L，具有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)論臍帶血干細胞治療失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化可以改善肝臟的合成、代謝功能，調(diào)節(jié)免疫功能，安全性好。

原發(fā)性膽汁性肝硬化；臍帶血干細胞；治療

失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化是肝病的終末期病變之一，臨床上最根本的治療措施是肝移植。有研究表明，通過干細胞肝臟移植治療可以補充一定數(shù)量的正常肝細胞，修復受損的肝組織，是目前治療肝病的一種新方法[1,2]。常用的干細胞包括自體骨髓干細胞、臍帶血干細胞、外周造血干細胞等，在臨床上均取得了一定的效果[3～11]，而臍帶血中的干細胞數(shù)量及質(zhì)量均高于成人骨髓和外周血，且其具有繁殖速度快的特點[12]。我們將臍帶血干細胞應用于治療失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化，有一定的療效，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月～2015年1月我科診治的失代償期原發(fā)性膽汁性肝硬化患者60例，男性16例，女性44例；年齡為35～71歲，平均年齡為（45.3±3）歲。診斷均符合人民衛(wèi)生出版社第8版《內(nèi)科學》中關于原發(fā)性膽汁性肝硬化的診斷標準。肝功能分級屬Child-Pugh B/C級的分別為22/38例，無感染和原發(fā)性肝癌等并發(fā)癥。將患者隨機分為治療組30例和對照組30例，兩組患者基線特征無顯著性差異（表1、表2）。

表1兩組患者基線資料（s）

表1兩組患者基線資料（s）

例數(shù)年齡（歲）ALB（g/L）PTA（%）ALT（U/L）AST（U/L）TBIL（μmol/L）治療組30 45±26 24.9±7.8 37.5±14.5 69.5±17.8 72.6±16.9 50.3±16.5對照組30 46±25 25.5±8.0 38.1±13.6 71.3±18.2 73.8±17.4 48.8±17.8

表2 兩組患者基線資料±s）

表2 兩組患者基線資料±s）

與對照組比，①P<0.05治療組

例數(shù)GGT（U/L）ALP（U/L）IgM（g/L）治療組30 450.3±16.5 620.3±16.5 40.3±16.5對照組30 440.8±17.5 630.3±15.5 41.3±15.3

1.2治療方法給予對照組患者肝水解肽（湖南五洲通制藥廠）100 mg加入5%葡萄糖注射液250 ml中靜脈滴注，1次/ d，還原性谷光甘肽（古拉定，意大利斯德大藥廠）1.2 g加入5%葡萄糖注射液100 ml中靜脈滴注，1次/d，門冬氨酸鉀鎂注射液30 ml、維生素C 3.0加入10%葡萄糖注射液250 ml中靜脈滴注，1次/d。同時限鈉限水，適量使用利尿劑；治療組在上述治療的基礎上行臍帶血干細胞治療。術前1 d給予患者行碘過敏試驗，雙側(cè)腹股溝備皮。簽署臍帶血干細胞治療知情同意書。在婦產(chǎn)科醫(yī)生的協(xié)助下，選擇無血液傳播疾病（HBsAg陰性、抗HIV陰性、抗HCV陰性）的健康產(chǎn)婦，分娩后馬上取臍帶血約100 ml，配血型合適后，應用寧夏中聯(lián)達生物有限公司生產(chǎn)的細胞分離試劑盒，分離獲得臍帶血單個核細胞在1～5×107之間。在放射介入條件下經(jīng)股動脈穿刺插管，造影排除肝癌后，將含臍帶血細胞的氯化鈉溶液約5 ml按脈沖式方法從肝固有動脈緩慢注入肝內(nèi)。穿刺點加壓包扎，行肝動脈插管治療后常規(guī)護理[1]。術后插管側(cè)髖關節(jié)制動8 h。

1.3檢測方法常規(guī)檢測血生化指標（寧波美康生物試劑股份有限公司）；采用免疫比濁法檢測血清免疫球蛋白（北京北方生物試劑研究所）。

1.4統(tǒng)計學分析應用SPSS 11.0統(tǒng)計學軟件進行分析，計量資料以（±s）表示，組間比較采用成對資料的t檢驗。P< 0.05為統(tǒng)計學上有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1肝功能和IgM改善情況如表3、表4所示，在治療后8 w，兩組間存在顯著性差異（P<0.05）。

表3 兩組肝功能指標（s）的比較

表3 兩組肝功能指標（s）的比較

與對照組比，①P<0.05

例數(shù)ALB（g/L）PTA（%）ALT（U/L）AST（U/L）TBIL（μmol/L）治療組30 33.1±8.3①43.0±11.4①36.3±13.5 33.6±14.5 38.3±12.2對照組30 25.6±7.6 38.2±12.5 39.2±13.3 38.6±13.8 40.6±13.3

表4兩組血清GGT、ALP和IgM（s）的比較

表4兩組血清GGT、ALP和IgM（s）的比較

與對照組比，①P<0.05

例數(shù)GGT（U/L）ALP（U/L）IgM（g/L）治療組30 250.3±17.5①380.3±16.5①21.3±16.5①對照組30 360.3±16.5 510.3±17.5 32.5±18.5

2.2不良反應兩組均未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應及并發(fā)癥。

3 討論

原發(fā)性膽汁性肝硬化是一種臨床常見的疾病，當其進入失代償期時肝功能明顯減退，嚴重時可導致肝功能衰竭，危及生命[13]。近年來，干細胞的臨床應用為疾病的治療提供了嶄新的思路。干細胞是一類具有多向分化、高度增殖以及自我更新的細胞群，在特定的微環(huán)境下可以分化為多種組織細胞。人臍帶血干細胞是臍帶以及胎盤近胎兒側(cè)血管內(nèi)的血液，包括間充質(zhì)干細胞以及造血干細胞。其中間充質(zhì)細胞是一種具有多向分化潛能以及高度自我更新能力的干細胞。臍帶血干細胞取材方便，來源廣泛，增殖分化能力強，免疫原性弱，移植物抗宿主病發(fā)生率低，越來越多地被應用于臨床治療各種類型的疾病。許多臨床研究證明了臍血干細胞移植治療失代償期肝硬化的有效性。1995年Tang報道，把臍帶血輸注入慢性活動性肝炎患者體內(nèi)，對改善血液系統(tǒng)、肝臟和免疫系統(tǒng)功能的效果及安全性等方面均優(yōu)于輸入新鮮血所產(chǎn)生的效果，并于2003年再次報道通過多年臨床治療的對照分析，認為臍帶血干細胞在肝損傷的情況下能分化為成熟的肝細胞和膽管細胞，證明了臍帶血移植能改善患者肝功能和免疫功能，修復肝損傷，促進肝細胞再生。另有研究提示存在于臍帶血中的CD34+CD38-細胞群可以再動員SCID小鼠的免疫細胞，使之部分恢復細胞免疫功能。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在移植臍帶血干細胞后，患者肝功能明顯改善，尤其是白蛋白水平顯著升高，同時TBil、ALT、ALP、GGT、ALP和IgM水平逐漸下降。我們認為干細胞一方面可分化為成熟的肝細胞和膽管細胞，另一方面，通過調(diào)節(jié)免疫功能，從而修復膽管損傷，降低膽紅素，最終肝功能得以有效改善。通過研究，我們發(fā)現(xiàn)臍帶血干細胞移植治療原發(fā)性膽汁性肝硬化患者有較好的療效，可以有效地改善患者的臨床癥狀、肝功能及免疫功能，可以應用于臨床治療。

[1] Aijo T，Edelman SM，Lonnberg T，et al. An integrative computational systems biology approach identifies differentially regulated dynamic transcriptome signatures which drive the initiation of human T helper cell differentiation.Bmc Genomics，2012，13:572.

[2] Cahill AG，Roehl KA，Odibo AO，et al. Association of atypical decelerations with acidem ia.Obstet Gynecol，2012，120（6）: 1387-1393.

[3] 王方，張靜，周新人，等. 經(jīng)門靜脈自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化18 例療效觀察.實用肝臟病雜志，2011，14（3）：200-201.

[4] Terai S，I shi k awa T，Omori K，et al. I mproved liver function in patients with liver cirrhosis after autologous bone marrow cell infusion therapy.Stem Cells，2006，24（10）: 2292-2298.

[5] 王方，寇俊峰，云升皓，等. 兩種途徑移植自體骨髓干細胞治療肝硬化患者療效比較.臨床肝膽病雜志，2013，29（11）:844-847.

[6] Khan AA，P arveen N，Mahaboob V S，et al. Safety and efficacy of autologous bone marrow stem cell transplantation through hepatic artery for the treatment of chronic liver failure:a preliminary study.Transplant Proc，2008，40（4）:1140-1144.

[7] 高遠征，賈素華，劉玉英，等. 異基因臍血干細胞移植治療失代償期肝硬化的療效觀察. 臨床肝膽病雜志，2010，26（6）：613-617.

[8] 陳海鷗，胡小宜，劉洪娟，等. 臍血干細胞移植治療肝硬化的療效觀察.肝臟，2010，15（2）：81-83.

[9] 楊華強，王云甫，杜玲，等. 臍血干細胞移植治療失代償期肝硬化的臨床療效. 現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2010，10（23）：4497-4499.

[10] 范婭涵，蔣天倫，黎儒青，等. 治療用臍血干細胞的制備與初步臨床應用. 中國輸血雜志，2010，23（3）：179-182.

[11] 王方，張靜，楓淑賢，等.經(jīng)肝動脈注入臍帶血干細胞治療失代償期肝硬化患者25 例療效觀察.實用肝臟病雜志，2012，15（6）：535-537.

[12] 周漢超，劉黎，周健，等. 骨髓、臍血干細胞中淋巴細胞和單核細胞與C D34、C D38 亞型細胞百分比在治療肝硬化中的比較. 中華臨床醫(yī)師雜志（電子版），2011，5（6）：1731-1733.

[13] N i k eghbalian S，P ournasr B，Aghdami N，et al. Autologous transplantationof bone marrow-derived mononuclear and CD133（+）cells in patients with decompen sated cirrhosis.Arch Iran med，2011，14（1）:12-17.

（收稿：2015-08-10）

（本文編輯：陳宗炳）

Intrahepatic transplantation of umbilical cord blood stem cells in treatment of patients with decompensated primary biliary cirrhosis

Zhou Xinren，Wang Fang，Yun Shenghao，et al.
Department of Infectious Diseases，Anning Branch of General Hospital，Lanzhou Military Area Command，Lanzhou 730070，Gansu Province，China

Primary biliary cirrhosis；Human umbilical cord blood stem cell；Transplantation

甘肅省自然科學基金資助項目（編號：6ZS026-A05-081）

730070 蘭州市蘭州軍區(qū)蘭州總院安寧分院感染病科

周新人，男，38歲，碩士研究生，主治醫(yī)師。主要從事內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病與肝病診治研究。E-mail：grkzxr@163.com

10.3969/j.issn.1672-5069.2016.02.026