王曉華，王恩波，李興華

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微柱凝膠法交叉配血次側(cè)不合的原因分析及對策

王曉華，王恩波，李興華

[摘要]目的：探討微柱凝膠法(MGT)交叉配血次側(cè)不合的原因及對策。方法：回顧2015年1-7月1 221例輸注紅細胞成分患者MGT交叉配血情況，分析MGT交叉配血次側(cè)不合的原因并探討臨床輸血策略。結(jié)果：1 221例輸注紅細胞成分的患者中，MGT交叉配血次側(cè)不合69例。其中直接抗人球蛋白實驗(DAT)陽性57例，假凝集5例，獻血者不規(guī)則抗體陽性2例，加樣錯誤3例，微柱凝膠干涸2例。結(jié)論：由DAT陽性導(dǎo)致的次側(cè)配血不合，在排除自身免疫性溶貧情況后，可以考慮給患者輸注懸浮紅細胞。假凝集、凝膠孔干涸、加樣錯誤等原因?qū)е碌拇蝹?cè)配血不合，可在加強配血各環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制中減少或杜絕發(fā)生。

[關(guān)鍵詞]微柱凝膠法; 交叉配血； 次側(cè)不合; 直接抗人球蛋白實驗

微柱凝膠法(MGT)交叉配血,與傳統(tǒng)的試管法抗人球蛋白技術(shù)及凝聚胺試驗技術(shù)相比，具有操作簡單、靈敏度高、結(jié)果易于觀察等優(yōu)點，在全國各大醫(yī)院輸血科被廣泛推廣和使用[1],因而大大降低了溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生。但因其靈敏度高等特點也導(dǎo)致了其配血不合率遠遠高于其他兩種方法[2]。本院對備血患者已常規(guī)性做不規(guī)則抗體篩查，所以日常交叉配血工作中遇到的次側(cè)出現(xiàn)凝集反應(yīng)較多見，現(xiàn)將次側(cè)出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原因總結(jié)分析如下。

1資料與方法

1.1資料本院2015年1月-2015年7月輸注紅細胞成分的患者1 221例，其中出現(xiàn)側(cè)凝集反應(yīng)69例。患者年齡17～96歲．女19例，男50例，輸血次數(shù)為1～21次，均為血液同型輸注，不規(guī)則抗體篩查陰性。包括輸注懸浮紅細胞、新鮮冰凍血漿、機采血小板和冷沉淀凝血因子。

1.2方法試劑及儀器：抗人球蛋白微柱凝膠卡，ABO、RhD血型定型檢測卡(長春博訊生物技術(shù)責任公司)、TD-3A型微柱孵育器、FTQ型離心機(長春博研科學儀器有限責任公司)、低離子強度鹽溶液(長春博訊生物技術(shù)責任公司)、氯化鈉注射液(石家莊四藥有限公司)、不規(guī)則抗體篩檢細胞、人ABO血型反定型用紅細胞均為上海市血液生物醫(yī)藥有限公司。操作方法：標本經(jīng)2 000 r/min離心5 min，分離血漿和血細胞，用低離子液制備0.8%的紅細胞懸液，主側(cè)加受血者血漿50 μL和供血者紅細胞懸液50 μL，次側(cè)加供血者血漿50 μL和受血者紅細胞懸液50 μL，37℃孵育15 min，離心(900 r/min 2min，1 500 r/min 3 min)判讀結(jié)果。紅細胞在凝膠柱的上端或中間，判定為陽性；紅細胞到達微柱的底部判定為陰性。

若配血出現(xiàn)次側(cè)凝集反應(yīng)，仔細核對標本有無錯誤、觀察配血卡有無異常、血樣有無異常。若無則加做患者抗人球蛋白試驗和獻血員不規(guī)則抗體篩查實驗。直接抗人球方法：將患者紅細胞用生理鹽水制備0.8%的紅細胞懸液，在標記好的檢測卡中加入50 μL，離心判讀結(jié)果。抗不規(guī)則抗體篩查方法：在標記好的檢測卡中加入50 μL獻血員血漿，再分別加入Ⅰ～Ⅲ抗體篩查細胞及自身細胞50 μL，將檢測卡放入37℃孵育器中孵育15 min，離心，判讀結(jié)果。

2結(jié)果

2.1次側(cè)配血不合的原因及處置69例出現(xiàn)主側(cè)相合、次側(cè)配血不合情況的患者中，抗人球蛋白實驗陽性57例，假凝集5例， 獻血者抗體篩查陽性2例，加樣錯誤3例，微柱凝膠干涸2例。DAT陽性患者配血次側(cè)凝集強度(+～++)均等于或弱于DAT(+～+++)的強度?；颊吆凸┭逜BO正、反定型和Rh(D)定型相符。供者血液標本不規(guī)則抗體篩查均為陰性結(jié)果。見表1。

表1　69例患者配血次側(cè)不合原因構(gòu)成

2.2直接抗人球陽性科室分布見表2。

表2　各科室直接抗人球陽性病例構(gòu)成

3討論

從本資料結(jié)果中可以看出，應(yīng)用微柱凝集技術(shù)進行交叉配血，導(dǎo)致主側(cè)相合、次側(cè)不合的主要原因是患者DAT(82.61%)陽性。微柱凝集技術(shù)用于交叉配血，提高了交叉配血的準確性，同時對紅細胞上結(jié)合的lgG或補體檢出率也明顯提高[3]，使得患者DAT陽性所致的次側(cè)配血不合率也大幅升高。

直接抗人球蛋白試驗(DAT)是檢測紅細胞表面是否存在相應(yīng)的免疫球蛋白和(或)補體的一種方法。導(dǎo)致紅細胞直抗陽性的原因很多，免疫、藥物、感染等都能引起DAT陽性。從科室分布來看，重癥監(jiān)護病房、老年科、血液科分布最多，感染科、放化療科、呼吸科、腎內(nèi)科等其他科室也各有分布。隨著抗生素的使用越來越廣，藥物引起的DAT陽性也為較常見。青霉素類、頭孢菌素類及β內(nèi)酰胺類藥物均可能干擾抗球蛋白試驗。紅細胞膜受頭孢菌素類等藥物的影響而改變，導(dǎo)致蛋白(包括免疫球蛋白)非特異性地吸附到紅細胞膜上，造成DAT陽性[4]。重癥監(jiān)護病房(ICU)及呼吸科等患者大多數(shù)屬于此種情況，ICU患者病情較重，基礎(chǔ)疾病合并感染較多，都不同程度的應(yīng)用抗生素，導(dǎo)致DAT陽性。反復(fù)輸血的患者，血漿中的蛋白質(zhì)(包括免疫球蛋白、補體)非特異性地吸附到紅細胞表面,使得患者的紅細胞被致敏,而MGT法的微柱中試劑內(nèi)含有抗IgG,C3d的溶液，它可以與人紅細胞上的IgG及補體結(jié)合,在體外發(fā)生凝集[5]。本院老年科患者DAT陽性多為此種情況，多次輸血，開始時配血次側(cè)無凝集，幾次之后次側(cè)不同程度凝集、DAT陽性。血液科、腫瘤科患者，血型特異性物質(zhì)過高，如卵巢癌、肝癌，或長期使用化療藥物后紅細胞被吸附致敏[6]均可致DAT陽性。

DAT陽性的患者，為保證輸血安全，避免溶血性輸血反應(yīng)發(fā)生，各醫(yī)院往往為患者提供洗滌紅細胞。王顯榮等[7]報道非自身免疫性貧血性溶血DAT陽性患者輸注洗滌紅細胞除提升血紅蛋白外,還加速了紅細胞的破壞,增加肝臟的負擔。有調(diào)查顯示，配血次側(cè)不合與配血主次側(cè)均相合的患者輸注紅細胞輸血反應(yīng)發(fā)生率、輸血有效率差異均無統(tǒng)計學意義[8]。本次直抗陽性的57例輸血患者中，配血均為主側(cè)陰性，次側(cè)弱陽性(+～++)低于患者本身DAT的凝集強度。患者紅細胞與供者血漿混合后，紅細胞凝集強度并未加強，同時加做自身對

照、在復(fù)檢血型確定無誤，給予輸注紅細胞懸液后無遲發(fā)型溶血反應(yīng)的發(fā)生。所以，我們認為由DAT陽性導(dǎo)致的次側(cè)配血不合，在排除自身免疫性溶貧情況后，可以考慮給患者輸注懸浮紅細胞。

配血次側(cè)不合的其他原因相對DAT陽性來說要少得多。標本抗凝不充分，纖維蛋白析出并網(wǎng)絡(luò)游離紅細胞，可出現(xiàn)假凝集。陳舊標本配血，因紅細胞在體外被致敏也會造成假凝集[9]。加樣時吸到白膜層會造成微柱凝膠孔堵塞造成假凝集。另外標本錯誤，凝膠干涸均會影響判斷。以上各因素均可在加強配血各環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制中減少或杜絕發(fā)生。由于血站對供者血液不常規(guī)做抗體篩查，獻血員抗體篩查陽性的血液偶爾遇到，我們通常是退回血站報廢處理。

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Analysis and solution of minor incompatibility in cross matching with microcolum gel test

WANGXiao-hua,WANGEn-bo,LIXing-hua．

(DepartmentofBloodTransfusion,TheFirstPeople'sHospitalofLianyungang,Jiangsu222002,China)

【Abstract】Objective：To analyze the reasons and solutions of minor incompatibility in cross matching with microcolum gel test.Methods:1221 cross matching cases who were infused with red blood between January and July 2015 were retrospectively analyzed to figure-out the reasons and solutions of minor incompatibility in cross matching.Results:Of the the1221 cases, minor incompatibility occurred in 69 cases in cross matching with microcolum gel test,including 57 cases positive in red blood cell direct anti-human globulin test,5 cases of false agglutination,2 cases positive in blood donors' irregular antibody scanning,3 cases mistaken with adding samples, and 2 cases for dried up microcolumn gel.Conclusion:Patients suffer from minor incompatibility caused by DAT positive could be infused with suspended red blood cells when autoimmune hemolytic anemia is excluded.Cases of minor incompatibility caused by false agglutination,dried up microcolumn gel,or mistakes with adding samples could be reduced or eliminated when quality control of each section of transfusion is improved.

【Key words】Microcolumn gel test; Cross matching; Minor incompatibility; Direct antiglobulin test

(收稿日期：2015-12-30)

[中圖分類號]R 457.1

[文獻標識碼]A

[文章編號]1008-7044(2016)03-0267-03

DOI：10.14126/j.cnki.1008-7044.2016.03.006

[作者簡介]王曉華(1981-)，女，主管檢驗師，研究生。

[作者單位] 江蘇省連云港市第一人民醫(yī)院 輸血科，222002

·論著·