呂　鑫，何其勇，王亞洲，陳玉強

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外一科，黑龍江 佳木斯 154003)

?

Ki67與MMP-9在胃腺癌中表達(dá)的意義①

呂鑫，何其勇，王亞洲，陳玉強

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外一科，黑龍江 佳木斯 154003)

摘要：目的：探討胃腺癌中基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9與Ki67表達(dá)的相關(guān)性及其臨床意義。方法：采用S-P免疫組化染色法，通過檢測100例胃腺癌組織中Ki67及MMP-9的表達(dá)情況，分析其表達(dá)水平與年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、分化程度的相關(guān)性。結(jié)果：100例胃腺癌中Ki67高表達(dá)為53例(53%)，而MMP-9高表達(dá)46例(46%)。且對于其腫瘤病灶直徑大小，不同年齡段之間，Ki67和MMP-9的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移的患者，TNM分期級別高的患者、病理分化程度低的患者其Ki67和MMP-9的表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者、TNM分期低的患者和病理分化高的患者(P<0.05)。Ki67和MMP-9的表達(dá)存在正相關(guān)(P<0.05，rs=0.405)。結(jié)論：Ki67和MMP-9表達(dá)在胃腺癌的侵襲中起協(xié)同作用。

關(guān)鍵詞：胃腺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶9；Ki-67抗原；免疫組織化學(xué)

胃癌是消化道最常見的惡性腫瘤,病死率高。研究[1]表明,胃癌的生物學(xué)行為與某些分子指標(biāo)有關(guān)。其中胃腺癌占胃癌中的絕大部分，死亡率也很高。在中國隨著近些年來人民飲食水平及社會生活習(xí)慣的提高，胃癌的發(fā)病率也隨之逐漸升高。MMP-9屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族(MMPs)，其可以降解腫瘤微環(huán)境的膠原組織，增強腫瘤的侵襲能力[2]。Ki67是與細(xì)胞增生有關(guān)的標(biāo)志物，Ki67在細(xì)胞周期在G0期缺失。在G1、S和G2期可以達(dá)到高峰，其指標(biāo)高表達(dá)在許多腫瘤中[3]。本研究探討胃腺癌中MMP-9與Ki67表達(dá)的相關(guān)性及其臨床意義。

1資料和方法

1.1一般資料

選擇我院普外科2013～2014年期間收治的胃癌患者100例。其全部接受手術(shù)治療，術(shù)前均未接受放，化療。標(biāo)本均由病理科確定病理診斷為胃腺癌組織。按胃癌的國際臨床分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行劃分。試劑及引物采用免疫組化S-P法染色，鼠抗人Ki67單克隆抗體，鼠抗人MMP-9單克隆抗體。DAB顯色試劑及免疫組化S-P法試劑盒。所有標(biāo)本均福爾馬林液固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，片厚約4μm。用ABC方法。結(jié)果判定用半定量積分法。

染色判定標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)陽性細(xì)胞百分比分5級：0分：無染色；1分：染色細(xì)胞1%～24%；2分：25%～49%；3分：50%～74%；4分：染色≥75%。根據(jù)染色強度分4級：3分深棕色，2分棕黃色，1分淺黃色，0分不著色。每份切片分?jǐn)?shù)為染色細(xì)胞數(shù)分?jǐn)?shù)+染色強度分?jǐn)?shù)。所得總分?jǐn)?shù)如小于5分為低表達(dá)，反之為高表達(dá)。

1.2統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包，采用χ2，秩和檢驗，等級相關(guān)分析等統(tǒng)計學(xué)方法。P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)差異。

2結(jié)果

2.1胃腺癌組織中Ki67定位于細(xì)胞核，MMP-9則定位于細(xì)胞漿。不同年齡間MMP-9和Ki67的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1　 MMP-9及Ki67在胃腺癌中高表達(dá)情況

2.2胃腺癌Ki67和MMP-9的表達(dá)存在正相關(guān)(P<0.05，rs=0.405)。

表2 MMP-9及Ki67蛋白在胃腺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性

Ki67陽性陰性合計PMMP-9陽性38846MMP-9陰性153954<0.05合計5347100

3討論

本研究通過運用S-P免疫組化方法,證實Ki67及MMP-9在胃腺癌組織中表達(dá)均較高，100例胃腺癌中Ki67高表達(dá)53例，而MMP-9高表達(dá)46例并且這兩種蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)。兩者蛋白的表達(dá)強度與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及腫瘤分化程度均有著相關(guān)聯(lián)系。基質(zhì)金屬蛋白酶家族屬于蛋白水解酶，是鋅離子依賴性的內(nèi)肽酶可以降解細(xì)胞外基質(zhì)的成分。研究發(fā)現(xiàn)其在惡性腫瘤周圍侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中有著重要作用?；|(zhì)金屬蛋白酶家族由11個成員組成，根據(jù)其結(jié)構(gòu)和底物特異性分成：基質(zhì)降解酶、膠原酶、白明膠酶和其他酶。MMP-9又稱為明膠酶B是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中分子量最大的酶。以酶原形式分泌，被激活后轉(zhuǎn)化成Ⅳ型膠原酶，Ⅳ型膠原酶可以破壞距離腫瘤表面近Ⅳ型和Ⅴ型膠原及明膠，使得腫瘤細(xì)胞容易向周圍浸潤，侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。MMP-9還可以通過新生血管生成和毛細(xì)血管內(nèi)生，使腫瘤細(xì)胞向周圍浸潤及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[4]。MMP-9在胃癌組織中的高表達(dá)隨著胃癌的分化程度,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及局部浸潤深度之間存在密切的聯(lián)系[5]。Ki67普遍表達(dá)于增生期細(xì)胞，在靜止細(xì)胞中表達(dá)缺失，其是一種細(xì)胞核非組蛋白，Ki67是一種與細(xì)胞增生有關(guān)的標(biāo)志物，Ki67對細(xì)胞分裂的確切功能還不十分清楚，其在細(xì)胞周期在G0期缺失。在G1、S和G2期可以達(dá)到高峰，其指標(biāo)高表達(dá)在許多腫瘤中[3]。Ki-67的表達(dá)與胃癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)[6]。Laird等[7]科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)：在腎癌細(xì)胞中Ki67明顯低于腎癌肝轉(zhuǎn)移中肝臟癌灶其指標(biāo)值的表達(dá)，證明了Ki67與腫瘤轉(zhuǎn)移有重要關(guān)聯(lián)。本研究結(jié)果顯示，MMP-9與Ki67表達(dá)在胃腺癌的侵襲中起協(xié)同作用。對未來的胃腺癌的分子生物學(xué)研究領(lǐng)域提供了幫助。

參考文獻(xiàn)：

[1]Svensson A,Backman U,Fach D, et al.Angiogenesis can be reduced without significant reduction of tumor growth [J].Anticancer Res, 2007,27(6):3883

[2]Zhang C, Li C, Zhu M, et al. Meta-analysis of mmp2, mmp3, andmmp9 promoter polymorphisms and head and neck cancer risk[J].PLoS One, 2013,8(4):62023

[3]Weigel MT, Dowsett M. Current and emerging biomarkers in breastcancer: Prognosis and prediction [J]. Endocr Relat Cancer, 2010,17(4):245-262

[4]Kuhlmann KF, van Till JW, Boermeester MA, et al. Evaluation ofmatrix metalloproteinase 7 in plasma and pancreatic juice as a bio marker for pancreatic cancer[J]. Cancer Epidemiol BiomarkersPrev, 2007,16(5):886-891

[5]胡明，劉振平，黃世杰，等. MMP-9在胃癌中的表達(dá)及與臨床病理因素的關(guān)系[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2013,36(5)：18-19

[6]王彩霞,王曉,吳慶田，等.MMP-26和Ki67在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2012, 35(4)：83-84

[7]Laird A, O'Mahony FC, Nanda J, et al. Differential expression ofprognostic proteomic markers in primary tumour, venous tumourthrombus and metastatic renal cell cancer tissue and correlationwith patient outcome[J]. PLoS One, 2013,8(4):60483

The significiance of Ki67 and MMP-9 expressions in gastric adenocarcinoma

LüXin，HEQi-yong，WANGYa-zhou,CHENYu-qiang

(Department of General Surgery, the First Affiliated Hospital, Jiamusi University, Jiamusi 154003, China)

Abstract:Objective: To explore the correlation between the expressions of matrix metalloproteinase MMP-9 and Ki67 in gastric carcinoma and its clinical significance. Methods: S-P immunohistochemical staining method was adopted to detect the expressions of Ki67 and MMP-9 in 100 cases of gastric carcinoma so as to analyse the correlation among expression, age, tumor size, lymph node metastasis, TNM staging, and differentiation. Results: In 100 cases of gastric adenocarcinoma, 53 cases were highly expressed in Ki67 reaching 53% of the total. 46 case were highly expressed in MMP-9 reaching 46% of the total. For the tumor diameter, there were no significant differences in the expressions of Ki67 and MMP-9 between different age. For patients with lymph node metastasis, high level TNM stage, low pathological differentiation, their expressions of Ki67 and MMP-9 were higher than those with no lymph node metastasis, low level TNM staging, and high pathologic differentiation(P<0.05). There existed positive correlationship between the expressions of Ki67 and MMP-9(P<0.05,rs=0.405). Conclusion: The expressions of Ki67 and MMP-9 play a synergistic role in the gastric cancer invasion.

Key words:gastric adenocarcinoma； matrix metalloproteinase-9; Ki-67 antigen; immunohistochemistry

(收稿日期：2014-11-26)

中圖分類號：R735.2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1008-0104(2016)01-0102-02

作者簡介：呂鑫(1985～)男，黑龍江佳木斯人，碩士，住院醫(yī)師通訊作者：何其勇(1966～)男，黑龍江佳木斯人，碩士，主任醫(yī)師，教授，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail：HQY3377@126.com。