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        急性腦血栓形成與磷脂酰絲氨酸外翻、微粒釋放相關(guān)性的研究①

        2016-04-14 09:42:57王東升王復(fù)新王明華劉瑩瑩
        黑龍江醫(yī)藥科學(xué) 2016年1期
        關(guān)鍵詞:研究

        王東升,王復(fù)新,段 偉,王明華,劉瑩瑩

        (1.大慶市人民醫(yī)院,黑龍江 大慶 163316;2.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 佳木斯154003)

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        急性腦血栓形成與磷脂酰絲氨酸外翻、微粒釋放相關(guān)性的研究①

        王東升1,2,王復(fù)新2,段偉1,王明華1,劉瑩瑩1

        (1.大慶市人民醫(yī)院,黑龍江 大慶 163316;2.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 佳木斯154003)

        摘要:目的:通過對(duì)急性腦血栓患者血漿磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻、微粒(microparticle, MP)釋放的動(dòng)態(tài)變化的觀察,探討其與急性腦血栓的關(guān)系,為臨床早期治療提供依據(jù)。方法: 將符合條件的急性腦血栓患者20例作為試驗(yàn)組(排除標(biāo)準(zhǔn):糖尿病、惡性高血壓、尿毒癥、惡性腫瘤、近6個(gè)月輸血史),同時(shí)收集20例正常體檢人員,無心腦血管疾病,檢測前無使用抗凝劑等干擾血凝系統(tǒng)的藥物,作為對(duì)照組。通過流式細(xì)胞儀、共聚焦顯微鏡檢測PS暴露,比較正常人與腦血栓患者的結(jié)果差異是否有顯著性,得出結(jié)論。結(jié)果:試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,差異有顯著性(P<0.05),試驗(yàn)組微球總數(shù)明顯高于對(duì)照組。結(jié)論: 磷脂酰絲氨酸外翻、微粒釋放可以促進(jìn)凝血因子復(fù)合物及凝血酶的生成,最終促進(jìn)凝血的發(fā)生,在急性腦血栓形成中起到非常重要的作用。

        關(guān)鍵詞:急性腦血栓;磷脂酰絲氨酸外翻;微粒釋放;研究

        急性腦血栓形成(cerebral thr ombosis)是腦梗死最常見類型,約占全部腦梗死發(fā)病率的60%。血管壁結(jié)構(gòu)完整性破壞,止血、凝血、纖溶系統(tǒng)的失平衡和血流狀態(tài)的改變,共同構(gòu)成血栓形成的基本條件。有報(bào)導(dǎo)指出缺血性卒中與凝血機(jī)制異常、栓子阻塞腦血管關(guān)系密切[1]。本文主要是研究急性腦血栓患者止血、凝血、纖溶系統(tǒng)中血漿磷脂酰絲氨酸外翻、微粒釋放與血栓形成的關(guān)系。

        1資料與方法

        1.1一般資料

        搜集2013-01~2014-01來我科住院確診的急性腦血栓患者20例,男16例,女4例 ,平均年齡(55.6±16.2)歲;所選患者具有下列請(qǐng)予以排除:(2型糖尿病、2級(jí)以上高血壓、尿毒癥腎功失代償期、明確診斷的惡性腫瘤、近6個(gè)月輸血史、各種明確診斷的急慢性感染);正常對(duì)照組20例,來自正常體檢人員,需無心腦血管疾病,檢測前無使用抗凝劑等干擾血凝系統(tǒng)的藥物 ,男15例 ,女 5例 ,平均年齡(54.8±17.4)歲。

        1.2標(biāo)本采集

        兩組人員均應(yīng)清晨空腹肘部靜脈采血5mL,取1.8mL置于含0.2mL 0.109mol/L枸櫞酸鈉抗凝液的試管中,采血?jiǎng)幼饕炀?,同時(shí)血液必須混合充分以減少誤差(采血后,將抗凝管至少輕輕顛倒8~10次),管中不能出現(xiàn)凝塊。使用離心機(jī)3000r/min離心10min,將血漿分離,并在2h內(nèi)使用Beckman Coulter公司全自動(dòng)生化分析儀對(duì)血漿進(jìn)行檢測。

        1.3PS外翻、MP釋放水平檢測及來源分析

        用megamix標(biāo)準(zhǔn)微球試劑盒調(diào)整流式細(xì)胞儀所需要的條件,并設(shè)定微粒(microparticle, MPs)的檢測范圍;定義1Μm以下并表達(dá)PS的門內(nèi)物質(zhì)為MPs,1μm以上不列入計(jì)算范圍內(nèi),通過Truecount beads定量檢測MPs總數(shù)。

        1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用軟件為SPSS13.0,使用ANOVA方法分析結(jié)果,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

        2結(jié)果

        在分析的標(biāo)本中,只有小于1μm的門內(nèi)物質(zhì)有90%以上的顯示為膜聯(lián)蛋白v陽性,我們將這部分物質(zhì)稱為微球。通過對(duì)已知數(shù)量的TrueCount beads做為標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)參,計(jì)數(shù)微球的絕對(duì)數(shù),每個(gè)分析的標(biāo)本中,小于1μm的門內(nèi)有90%以上為膜聯(lián)蛋白v陽性,我們定義為微球。急性腦血栓患者膜聯(lián)蛋白v陽性的微球總數(shù)平均為(4191±485)μL,而對(duì)照組正常人平均為(1629±252)μL。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析,急性腦血栓患者微球總數(shù)明顯高于正常人(P<0.05)。見表1。

        表1 急性腦血栓患者和正常人每微升血漿中微粒數(shù)目±s)

        注:與對(duì)照組比較*P<0.05,差異有顯著性。

        3討論

        PS是細(xì)胞膜上主要的陰性磷脂,是凝血啟動(dòng)和吞噬識(shí)別途徑上重要的信號(hào)分子。細(xì)胞膜PS外翻加速了凝血過程的兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié),即凝血因子FX激活和凝血酶生成[2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)MP也是獨(dú)立于細(xì)胞因子、激素等分子外的一種新型細(xì)胞間信息傳遞方式,參與機(jī)體幾乎所有的生理,病理生理學(xué)行為(如血栓形成、動(dòng)脈粥樣硬化、風(fēng)濕性疾病及惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展等)[3,4]。我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)急性腦血栓患者血漿PS暴露及微粒釋放明顯高于正常人,這些暴露PS的細(xì)胞又為凝血復(fù)合物的生成提供了催化表面,進(jìn)一步的增加了凝血酶原酶的生成。增加的凝血酶又進(jìn)一步促進(jìn)纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,導(dǎo)致患者血栓的發(fā)生[5,6]。微粒不但攜帶細(xì)胞的表面標(biāo)志物和表達(dá)PS,而且其攜帶的細(xì)胞表面受體能夠調(diào)控細(xì)胞間的信息傳遞,從而參與疾病的發(fā)生發(fā)展。MPs表達(dá)PS使其促凝活性提高了50~100倍[7],在血栓的形成中發(fā)揮著重要的生物學(xué)作用[8]。做為診斷血栓金標(biāo)準(zhǔn)的血管造影,常伴有肺栓塞、下腔靜脈穿孔及急性腎衰竭等并發(fā)癥限制了其早期診斷[9]。急性腦卒中現(xiàn)在無論是在發(fā)病率和致死率都處于老年患者發(fā)病的第一位,對(duì)人們的生活質(zhì)量造成的很大影響,因此對(duì)該病發(fā)病機(jī)理的研究就更加至關(guān)重要[10]。我們認(rèn)為通過檢測循環(huán)微粒水平對(duì)急性腦血栓患者可以早期發(fā)現(xiàn),積極給予溶栓和抗凝治療,會(huì)明顯提高治療療效,改善預(yù)后。同時(shí),已有研究表明已有研究表明腦血栓患者血流動(dòng)力學(xué)改變造成紅細(xì)變形性降低,聚集增加并伴有機(jī)械損傷,血小板活化、聚集性增強(qiáng),內(nèi)皮細(xì)胞損傷[11]。 我們認(rèn)為損傷或活化的細(xì)胞PS暴露增多,同時(shí)釋放微粒,為凝血因子提供催化表面,進(jìn)而大大促進(jìn)了凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng),引起血液高凝狀態(tài),從而導(dǎo)致腦血栓形成。

        參考文獻(xiàn):

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        (收稿日期:2015-03-23)

        中圖分類號(hào):R743.32

        文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

        文章編號(hào):1008-0104(2016)01-0148-02

        作者簡介:王東升(1976~)男,黑龍江大慶人,在讀碩士研究生,副主任醫(yī)師。通訊作者:王復(fù)新(1959~)男,黑龍江佳木斯人,碩士,主任醫(yī)師,教授,碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:wdsok 19770208@163.com。

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