張穎慧，平　洋，江　欣，繆月英，楊春榮

(佳木斯大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

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長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體制備及制劑學(xué)性質(zhì)研究①

張穎慧，平洋，江欣，繆月英，楊春榮

(佳木斯大學(xué)藥學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

摘要：目的:制備長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體并考察其制劑學(xué)性質(zhì)。方法:采用熔融-超聲法進(jìn)行制備長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體，采用透射電鏡和動(dòng)態(tài)光散射法觀察納米粒的外觀和粒徑，DSC分析長(zhǎng)春西汀在載體中的物理狀態(tài)。結(jié)果:制備的長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體形態(tài)為球形或類球形，粒徑(89.33±3.05)nm、Zeta電位(-30.1±0.48)mV、包封率(94.16±3.35)%，DSC實(shí)驗(yàn)顯示長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體凍干樣品中長(zhǎng)春西汀的特征吸收峰已消失。結(jié)論:熔融-超聲法制備的長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體粒徑均一，包封率高。

關(guān)鍵詞：長(zhǎng)春西?。患{米脂質(zhì)載體；熔融-超聲法；制劑學(xué)性質(zhì)

長(zhǎng)春西汀(Vinpocetine, VIN)是從夾竹桃科小蔓長(zhǎng)春花(Vinca minor L.)發(fā)現(xiàn)的吲哚類生物堿，作為腦循環(huán)代謝改善劑[1]，主要用于治療循環(huán)障礙性腦血管疾病如腦梗塞、腦出血后遺癥及腦動(dòng)脈硬化癥等，治療效果顯著。但由于長(zhǎng)春西汀存在肝臟首過效應(yīng)，口服生物利用度極低，使其臨床應(yīng)用受到了限制。納米脂質(zhì)載體(Nanostructure lipid carrier, NLC)是從固體脂質(zhì)納米粒(Solid lipid nanoparticles, SLN)基礎(chǔ)上發(fā)展而來的[2~4]，在固體脂質(zhì)中加入了一定比例的液體脂質(zhì)作為混合脂質(zhì)，與SLN的單一固體脂質(zhì)相比，NLC保留了SLN生理相容性好、毒性低、可控釋藥物等的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)，也解決了SLN單一固態(tài)脂質(zhì)形成有序的結(jié)晶結(jié)構(gòu)，致使藥物貯存過程中造成載藥量低的缺陷。而NLC就是通過加液體脂質(zhì)的加入，打破了原有的晶格結(jié)構(gòu)，從而提高了載藥量，增加了藥物物理穩(wěn)定性[5~7]。鑒于長(zhǎng)春西汀口服生物利用度低的缺點(diǎn)，將其制備成制備長(zhǎng)春西汀納米脂質(zhì)載體(VIN-NLC)注射劑，考察其形態(tài)、粒徑分布、Zeta電位、包封率及DSC分析，力求為VIN-NLC的體外釋放[8]與體內(nèi)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1儀器及材料

UV-2550型紫外分光光度計(jì)(日本島津株式會(huì)社)，F(xiàn)A2004N電子天平(上?；钙娇茖W(xué)儀器有限公司)，JY92-2D 型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(寧波新芝科器研究所)，SALD-2201型激光粒度分布測(cè)定儀(日本島津株式會(huì)社)，Delsa 440SX Zeta Potential Analyzer(美國(guó)貝克曼公司)，DSC-5差熱分析儀(德國(guó)耐馳公司) ，JEM-1200EX型透射電鏡(日本電子公司)。

長(zhǎng)春西汀( 東北制藥總廠)，單硬脂酸甘油酯(GMS，天津市博迪化工有限公司 )，豆磷脂(上海太偉藥業(yè))，聚氧乙烯660-12羥基硬脂酸酯(Solutol HS15?，德國(guó)BASF)，辛酸/癸酸甘油酯(Miglyol?812，德國(guó)SASOL)，其它試劑均為分析純。

2方法

2.1VIN-NLC制備

取混合脂質(zhì)水浴加熱至熔融，加入長(zhǎng)春西汀混勻作為油相。取適量乳化劑加入注射用水中，超聲分散作為水相。將同溫度水相慢慢滴加入油相中分散成初乳，恒溫?cái)嚢韬筮M(jìn)行超聲，室溫水冷卻固化，過濾。

2.2VIN-NLC 制劑學(xué)性質(zhì)考察

2.2.1形態(tài)觀察

在噴碳銅網(wǎng)表面滴滿VIN-NLC混懸液，以2.0%磷鎢酸負(fù)染3min后，于透射電鏡下觀察形態(tài)。

2.2.2粒徑測(cè)定

取VIN-NLC稀釋到適當(dāng)?shù)臐舛燃尤氲綐悠烦刂?，用SALD-2201型激光粒度儀測(cè)定VIN-NLC的粒度分布。

2.2.3Zeta電位測(cè)定

取VIN-NLC稀釋到適當(dāng)?shù)臐舛燃尤氡壬刂?，用Delsa 440SX型Zeta電位儀測(cè)定VIN-NLC的Zeta電位。

2.2.4包封率與載藥量的測(cè)定

取0.5mL VIN-NLC置于超濾離心管(Microncon YM-10)上端，5000rpm離心10min，濾液用甲醇超聲定容；另取0.5mL VIN-NLC用甲醇定容超聲破乳，靜置，取上清液在274nm處進(jìn)行紫外掃描，按下式計(jì)算包封率和載藥量：

式中Cfree為游離藥物濃度，Ctotal為混懸液中藥物總濃度；Wdrug為NLC中包封的藥物量，Wlipid為處方中混合脂質(zhì)的質(zhì)量。

2.2.5DSC分析

分別取VIN、GMS、物理混合物(VIN和混合脂質(zhì))、空白NLC和VIN-NLC的凍干樣品適量，空鋁坩鍋?zhàn)鲄⒈?，升溫速?0 ℃/min，進(jìn)行DSC分析。

3結(jié)果與結(jié)論

3.1VIN-NLC的制備

取混合脂質(zhì)(GMS+20% Miglyol?812)適量，75℃水浴加熱至熔融，將VIN加入混勻作為油相。取豆磷脂和Solutol HS15?適量加入20mL注射用水中作為水相。磁力攪拌下把同溫的水相滴加入油相中分散成初乳，滴加完畢后，攪拌5min。初乳600w下超聲8min，室溫水冷卻固化，過0.45μm微孔濾膜，即得VIN-NLC。

3.2VIN-NLC制劑學(xué)性質(zhì)考察結(jié)果

3.2.1形態(tài)觀察

透射電子顯微鏡觀察VIN-NLC粒子呈球形或類球形，大小均勻，表面圓整，見圖1。

圖1　VIN-NLC透射電鏡掃描照片(×1500)

3.2.2粒徑測(cè)定

用激光粒度儀測(cè)定VIN-NLC的粒度分布，VIN-NLC呈單峰分布，粒徑為(89.33±3.05) nm，見圖2。

圖2　VIN-NLC粒徑分布

3.2.3Zeta電位測(cè)定

用Zeta電位測(cè)定儀測(cè)定了VIN-NLC的Zeta電位為(-30.1±0.48)mV，見圖3，結(jié)果表明粒子間不會(huì)發(fā)生聚集現(xiàn)象，初步判斷VIN-NLC穩(wěn)定性良好。

圖3　VIN-NLC的Zeta電位

3.2.4包封率與載藥量的測(cè)定

由“2.2.4”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)方法操作測(cè)得三批VIN-NLC的包封率和載藥量分別為(94.16±3.35)%和(3.30±0.12)%。

3.2.5DSC分析

分別對(duì)VIN、GMS、物理混合物、空白NLC和VIN-NLC進(jìn)行DSC分析，由圖4可知， VIN特征吸收峰是155.3℃(curve a)，GMS特征吸收峰是60.6℃(curve b)，物理混合物中VIN吸熱峰減弱移至151.5℃(curve c)，圖中d是空白NLC，圖中e VIN-NLC凍干樣品中VIN的吸熱峰已消失，說明VIN被NLC成功包載。

圖4(a)VIN; (b)GMS; (c)物理混合物; (d)空白NLC; (e)VIN-NLC的DSC曲線

4討論

本實(shí)驗(yàn)考察了離心超濾法、低溫超速離心法測(cè)定VIN-NLC包封率。結(jié)果顯示，使用低溫超速離心法分散液混濁不分層，不能將游離藥物與納米粒分離，故不采用低溫超速離心法。而離心超濾法測(cè)定VIN-NLC包封率的重現(xiàn)性良好，且超濾膜對(duì)VIN無吸附，最終確定離心超濾法測(cè)定VIN-NLC包封率。差示掃描量熱法(DSC)具有測(cè)試樣品用量少、方法靈敏、快速，廣泛應(yīng)用于藥物物理狀態(tài)的分析。DSC實(shí)驗(yàn)表明，VIN-NLC體系中液體脂質(zhì)Miglyol812在納米粒骨架中破壞了規(guī)則的晶格結(jié)構(gòu)，VIN進(jìn)入混合脂質(zhì)的缺陷晶格中以不規(guī)則結(jié)晶態(tài)或無定形存在，提高了NLC的載藥穩(wěn)定性。

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(收稿日期：2015-10-28)

中圖分類號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1008-0104(2016)01-0138-02

作者簡(jiǎn)介：張穎慧(1988~)女，黑龍江克山人，在讀碩士研究生通訊作者：楊春榮(1972~)女，黑龍江安達(dá)人，博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師。 E-mail：yangchunrong98@163.com。