高婷 付玉華 李曉玲 伏建峰

830000烏魯木齊，蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院檢驗科（高婷、李曉玲、伏建峰）；830000烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院北院檢驗科（付玉華）

類風濕性關節(jié)炎患者的血清脂蛋白a水平與炎癥指標相關性分析

高婷 付玉華 李曉玲 伏建峰

830000烏魯木齊，蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院檢驗科（高婷、李曉玲、伏建峰）；830000烏魯木齊，新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院北院檢驗科（付玉華）

目的 通過對類風濕性關節(jié)炎（RA）患者組與對照組（正常健康者）脂蛋白a（Lp-a）與脂代謝水平的比較，分析RA患者血清中的Lp-a水平與系統(tǒng)性炎癥進展的風險相關性。 方法 選取30例RA患者（血清類風濕因子陽性）與30例正常健康者，年齡為25～80歲，性別分布相同，采集血樣并檢測其脂代謝水平（Lp-a、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和極低密度脂蛋白膽固醇（VLDL-C））與炎癥反應指標（腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素 6（IL-6）和C反應蛋白（CRP）），對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。 結果 與對照組比較，RA患者組的血清 Lp-a水平顯著增高（P＜0.001），HDL-C水平顯著降低（P＜0.05），而TC、TG、LDL-C與VLDL-C水平則無明顯變化，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。同時，RA患者組的TNF-α、IL-6及CRP水平較對照組均顯著增高（P＜0.05），且TNF-α與Lp-a水平的升高有相關性（r=0.753，P＜0.001）。 結論 RA患者常伴有高水平的Lp-a，且Lp-a水平的升高與RA患者的全身性炎癥反應增強具有相關性，Lp-a水平可作為RA患者的風險評價指標。

類風濕性關節(jié)炎； 脂蛋白a； 系統(tǒng)性炎癥反應； 動脈硬化

0 引 言

類風濕性關節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA）是慢性系統(tǒng)性炎癥性疾病，常累及關節(jié)內滑液，癥狀主要表現(xiàn)為對稱性多發(fā)關節(jié)炎，包括大小關節(jié)與關節(jié)外癥狀?；颊呖砂橛袆用}粥樣硬化與斑塊形成，而心血管疾病（cardiovascular disease，CVD）如心肌缺血、急性心肌梗死、中風及冠心病等是RA的常見并發(fā)癥[1]，且CVD因素占RA患者致死率的35%～51%[2]。RA患者常伴有脂蛋白a（lipoprotein(a),Lp-a）水平升高[3]，Lp-a與低密度脂蛋白（low-density lipoprotein, LDL）結構類似，具有膽固醇酯類與載脂蛋白B（apolipoprotein B,ApoB）的核心結構域，載脂蛋白A（ApoA）再以二硫鍵連接于ApoB?；贏poA的片段大小不同，Lp-a已知共有34種亞型。Lp-a的表達水平和促動脈硬化作用均與ApoA的表型多樣性息息相關。其中，小分子Lp-a與動脈硬化的發(fā)生更為密切，類似于易被氧化并降低相關受體黏附作用的小LDL顆粒[4]。此外，因ApoA與纖溶蛋白高度同源，可與纖維蛋白結合抑制纖溶作用，故易導致斑塊形成從而促進動脈硬化[5]。

除運送膽固醇外，Lp-a還參與炎癥反應與血栓形成。有報道稱促炎因子與急性時相反應蛋白可導致動脈硬化[6]，Lp-a與急性時相反應蛋白可促進血管平滑肌細胞增殖與單核細胞的趨化作用。RA患者的系統(tǒng)性炎癥反應常與炎癥因子腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白細胞介素 6（interleukin-6，IL-6）及C反應蛋白（C-reactive protein,CRP）等升高有關[7]。高Lp-a是動脈硬化的獨立風險因子，同時Lp-a也與炎癥反應的發(fā)生過程相關。因此，本研究將對活動期RA患者與正常健康者的血清Lp-a水平進行比較，并探討其與RA患者炎癥反應指標TNF-α、IL-6及CRP的相關性，以評估Lp-a水平作為RA患者CVD風險評價指標的可行性。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年3月至2015年9月在新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院住院并明確診斷為RA的患者30例（RA患者組），納入對象患者均符合1987年美國風濕學會的RA診斷標準，年齡為25～80歲，平均年齡為（52.4±8.3）歲；其中男性14例，女性16例。對照組納入對象為與RA患者組性別與年齡分布相一致的無RA人群，男性14例，女性16例，平均年齡為（51.9±10.1）歲。兩組人群的排除標準均包括糖尿病、高血壓、妊娠及哺乳期婦女、其他自身免疫病、腫瘤、腎衰竭、肝衰竭與遺傳學家族性高脂血癥患者，服用降脂藥物人群，吸煙者以及酗酒者。所有實驗流程均經新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院倫理委員會批準實行，納入研究對象均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 脂代謝指標檢測

對RA患者組和對照組人群進行快速血樣采集后，血樣標本均在4 h內完成離心處理并檢測脂代謝指標。其中，Lp-a的測定采用熒光免疫透射比濁法，儀器為雅培1600自動生化分析儀（美國雅培公司）；總膽固醇（total cholestrol,TC）的測定采用膽固醇氧化酶法，甘油三酯（triglyceride,TG）的測定采用甘油磷酸鹽氧化酶法，高密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）與極低密度脂蛋白膽固醇（verylow-densitylipoprotein cholosterol,VLDL-C）的測定采用沉淀分析法，均通過西門子2400自動分析儀（德國西門子公司）完成。所有操作均按儀器及試劑操作說明書進行，并采用標準酶試劑盒比對。

1.2.2 炎癥指標檢測

CRP的測定采用免疫透射比濁法，所用儀器及試劑為西門子BNII特種蛋白分析儀及配套試劑（德國西門子公司）；炎癥因子TNF-α及IL-6的測定均采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）法檢測，對應的ELISA試劑盒購自深圳晶美公司，所有步驟均嚴格按照操作說明書進行，最后按標準曲線計算得出TNF-α及IL-6的含量。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，數(shù)據(jù)均以均值±標準差（x±s）表示，RA患者組與對照組比較采用非配對性t檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。Lp-a與炎癥指標相關性分析采用Pearson's回歸分析。

2 結果

2.1 RA患者組與對照組脂代謝特征比較

對RA患者組與對照組血清Lp-a與脂代謝指標水平進行檢測并比較，結果如表1所示?？梢奟A患者組的血清Lp-a水平顯著高于對照組（P＜0.001），而HDL水平則顯著低于對照組（P＜0.05），差異具有統(tǒng)計學意義。其他指標如TC、TG、LDL-C及VLDL-C水平則無明顯變化，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。相關性分析結果表明，Lp-a水平與HDL-C水平無相關性（r=0.053，P＞0.05）。

表1 RA患者組與對照組間脂蛋白a水平與脂代謝指標的比較（mg/dl）

2.2 RA患者組與對照組炎癥指標比較

對RA患者組與對照組血清中炎癥指標TNF-α、IL-6及CRP進行檢測并比較，結果表明，RA患者組TNF-α、IL-6及CRP水平分別為（97.1±12.3）pg/ml、（28.6±3.8）pg/ml、（32.0±6.3）mg/L，而對照組TNF-α、IL-6及CRP水平分別為（17.1±10.2）pg/ml、（2.4± 0.8）pg/ml、（4.3±1.8）mg/L，RA患者組均顯著高于對照組（P＜0.05），提示這幾個指標均為RA活動期時炎癥反應的重要因素。鑒于前文已證實Lp-a水平在RA活動期時顯著升高，故可考慮對Lp-a與炎癥指標進行相關性分析。

2.3 Lp-a與RA患者炎癥指標相關性分析

對RA患者血清中炎癥相關指標（TNF-α、IL-6、及CRP）與Lp-a水平變動的相關性進行分析，線性回歸分析結果如圖1所示，可見TNF-α與Lp-a升高在RA患者中相關性更為顯著（r=0.753，P＜0.001），IL-6也與Lp-a升高具有相關性（r=0.364，P＜0.05），而CRP與Lp-a則無相關性（r=0.049，P＞0.05）。

3 討論與結論

本研究證實RA患者的血清Lp-a水平升高，由于高水平Lp-a與CVD的風險已被證實，可見RA患者的Lp-a水平與其CVD發(fā)病風險密切相關。既往報道認為RA患者的Lp-a水平高于對照組，這與本研究結果相一致。有學者認為Lp-a的合成增加或消耗減少及血管內外分布異常均可導致RA患者的脂蛋白水平異常[8]。Lp-a與LDL-C的脂質部分類似，其致動脈硬化的機制也可能類似，由于RA發(fā)病時網狀內皮細胞系統(tǒng)被過度激活，巨噬細胞吸附脂質作用增強，故高Lp-a水平可能是動脈硬化的原因之一。RA患者的脂蛋白異常與動脈硬化有關，包括低HDL-C、高Lp-a及TG水平[9]。本研究結果也表明RA患者脂代謝特征為低HDL-C、高Lp-a及TG水平。有報道稱服用抗脂蛋白抗體可導致RA患者HDL-C降低，而本研究中RA患者無抗脂蛋白藥物服用史，HDL-C水平顯著低于對照組可能與RA患者急性時相反應蛋白升高，導致HDL-C生理功能被抑制有關。

圖1 脂蛋白a與炎癥指標的相關性回歸分析

RA患者主要表現(xiàn)為全身性系統(tǒng)性炎癥反應，但高水平Lp-a在RA炎癥反應中的作用機制尚未完全明了。Lp-a可結合并攜帶具有促炎作用的氧化磷脂[10]，其ApoA亞基抑制纖溶蛋白調控的谷氨酸纖維蛋白原向賴氨酸纖維蛋白原轉化的正反饋過程[11]，從而抑制纖溶作用、增進凝塊、促進血栓形成，同時也通過阻斷組織因子抑制劑來促進凝血[12]。低HDL-C水平意味著心臟保護作用減弱，而LDL-C水平升高，意味著RA患者CVD風險增加[13]。本研究中RA患者的血清HLD-C水平降低，但未見TC、TG、LDL-C與VLDL-C水平發(fā)生變化，這可能與樣本數(shù)較少有關，后續(xù)可擴大統(tǒng)計樣本量，以增加結果可靠性。

RA患者的全身性炎癥反應導致了CVD相關的心血管損傷[14]。TNF-α是炎癥反應的主要調控因子，IL-6也是炎癥反應時的重要效應因子[15]。本研究首次分別分析了Lp-a與TNF-α及IL-6在RA發(fā)病時的相關性，表明Lp-a水平升高與RA患者的系統(tǒng)性炎癥反應有關。此外，CRP是急性炎癥反應的敏感指標之一，但本研究未見其與Lp-a具有直接相關性。這可能與影響CRP升高的因素較多有關，后續(xù)還需對多種影響因素進行排查。已經證實伴有低HDL-C水平時，CVD風險顯著增加[16]。因RA患者動脈硬化可經超聲檢查進行早期診斷[17]，故后續(xù)研究可結合影像學檢查對Lp-a及炎癥指標與RA患者的發(fā)病影響進行分析。高水平的LDL-C與RA患者的急性時相反應有關，可導致代謝綜合征發(fā)生[18]。此外，急性時相反應還與動脈硬化時內皮細胞激活及促凝因子有關[19]。故還需對RA患者的炎癥指標變化繼續(xù)進行深入研究。RA患者動脈硬化及CVD的發(fā)生意味著心衰風險增加，這主要因心臟舒張功能不全引起射血功能下降所致[20-21]。本研究發(fā)現(xiàn)的Lp-a與炎癥指標的協(xié)同變化，對RA患者的CVD預后具有較顯著的參考意義。

RA患者的炎癥反應可導致心血管功能損傷，因此，對RA進行早期診斷可盡早控制CVD相關風險因素。本研究結果表明，Lp-a水平在RA活動期時顯著升高，且與炎癥因子的變化密切相關，故Lp-a可作為RA患者CVD風險的篩查工具。

利益沖突 無

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Correlation between lipoprotein(a)and inflammation markers in rheumatoid arthritis patients

Gao Ting,Fu Yuhua,Li Xiaoling,Fu Jianfeng
Department of laboratory,Urumqi General Hospital of Lanzhou Military Region,Urumqi 830000,China(Gao T,Li XL, Fu JF);Department of laboratory,the North Yard of Xinjiang People's Hospital,Urumqi 830000,China(Fu YH) Corresponding author:Fu Jianfeng,Email:13319805828@qq.com

Objective To compare the lipoprotein(a)(Lp-a)and lipid metabolism level in rheumatoid arthritis(RA)patients and control group(healthy subjects),and evaluate the correlation between Lp-a levels and systemic inflammation in patients with RA.Methods Blood samples from 30 RA patients with positive rheumatoid factor and 30 healthy controls were collected,with same distribution of gender and age in both groups.Lipid metabolism level such as Lp-a,triglyceride(TG),total cholesterol(TC),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C), low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C),very low-density lipoprotein cholesterol(VLDL-C)and inflammation markers such as tumor necrosis factor α(TNF-α),interleukin 6(IL-6)and C reactive protein(CRP)were detected and analyzed statistically.Results LP-a levels were higher in RA patients than that of control group(P＜0.001),HDL-C levels were lower in RA group(P＜0.05),while TC,TG,LDL-C and VLDL-C levels showed no difference(P＞0.05).The TNF-α、IL-6 and CRP levels of RA patients were higher than that of control group(P＜0.05),and the association between higher Lp-a level and TNF-α were confirmed(r=0.753,P＜0.001).Conclusions High levels of Lp-a are often observed in RA patients,and a rising Lp-a level are associated with systematic inflammation reaction.Lp-a may be a risk factor for RA progress.

Rheumatoid arthritis;Lipoprotein(a);Systematic inflammation reaction;Atherosclerosis

伏建峰，Email:13319805828@qq.com

10．3760/cma．j．issn．1673-4181．2016．02．010

2015-12-12）