葉兆偉　李盡哲　殷東林　劉柱明　王德芝

(信陽農(nóng)林學院生物與制藥工程學院，河南　信陽　464000)

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紫外分光光度法測定實驗室培養(yǎng)的食用菌中鐵的含量

葉兆偉李盡哲殷東林劉柱明王德芝

(信陽農(nóng)林學院生物與制藥工程學院，河南信陽464000)

摘要：對香菇、杏鮑菇、平菇、蛹蟲草、茶薪菇、花菇、金針菇、白靈菇、黑木耳、雞腿菇中微量元素鐵的含量進行了測定，為進一步研究提供依據(jù)。食用菌粉碎、消化后配制成溶液，用鄰二氮菲作顯色劑，使用UV-1901型雙光束紫外可見分光光度計在510 nm 處測定各樣品的吸光度，進而計算出樣品中微量元素鐵的含量。結(jié)果顯示，黑木耳、香菇、白靈菇中鐵含量豐富，分別為(175.74±0.136 8)、(159.54±0.037 2)、(126.68±0.152 4) μg/g，10種食用菌中鐵含量有顯著性差異(P<0.05)。

關(guān)鍵詞：紫外可見分光光度法；食用菌；鐵

食用菌是能夠形成大型肉質(zhì)或膠質(zhì)的子實體或菌核類組織并能供人們食用或藥用的一類大型真菌，多種大型真菌既是營養(yǎng)豐富、味道鮮美的食品，又是對疾病具有一定療效或預防效果的藥用菌。食用菌細胞中最主要的有機物是蛋白質(zhì)、核酸、碳水化合物和脂類，特別是含有人體自身不能合成的氨基酸。除此以外，菇類還含有具生理活性的礦質(zhì)元素，以磷、鈉、鉀含量最高，其次為鈣和鐵。我國膳食構(gòu)成一般缺鐵，多食含鐵量高的香菇、木耳，對老齡人特別有益。

鐵作為人體必需的多種微量金屬元素中的一種，對人體的健康是十分重要的。鐵是血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素及其他酶系統(tǒng)的主要成分，幫助氧的運輸，還能促進脂肪的氧化。缺鐵可造成貧血并容易疲勞[1]。測定實驗室食用菌類中鐵的含量少見文獻報道。本文參照相關(guān)文獻[2-6]，測定了10種實驗室食用菌中鐵的含量。

1實驗部分

1.1儀器

UV-1901型雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);FA2004型電子天平(上海越平科學儀器有限公司)。

1.2試劑

硫酸亞鐵銨(天津市科密歐化學試劑有限公司);鹽酸羥胺(上海青析化工科技有限公司);鄰二氮菲(華東師范大學化工廠);濃硝酸(武漢市中天化工有限責任公司);濃鹽酸(開封開化(集團)有限公司試劑廠);高氯酸(天津市科密歐化學試劑有限公司);無水乙酸鈉(天津市巴斯夫化工有限公司);實驗用水均為二蒸水。實驗所用食用菌來自本校食用菌實驗室。

1.3溶液的配制

100 μg/mL Fe(Ⅱ)標準溶液：采用逐級稀釋法進行配制。準確稱取0.070 2 g硫酸亞鐵銨(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O，置于燒杯中，加入少量水溶解，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，備用。臨用時稀釋為含F(xiàn)e(Ⅱ)10 μg/mL的溶液。1 mol/L NaAc水溶液：準確稱取8.203 9 g無水NaAc置燒杯中，少量水溶解轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，用水定容，搖勻。10% 鹽酸羥胺水溶液(臨用時配制)。0.15% 鄰二氮菲水溶液：臨用時配制，準確稱取0.075 3 g鄰二氮菲置于燒杯中，少量水溶解后轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中。如果不溶，加1 mL濃HCl溶解，再用水稀釋至刻度。

1.4樣品及處理

1.4.1樣品香菇、杏鮑菇、平菇、黒蓋平菇、茶薪菇、花菇、金針菇、白靈菇、黑木耳、雞腿菇，均來自本校食用菌實驗室。

1.4.2濕法消化法處理樣品把以上樣品烘干，粉碎，每一種樣品稱取3份，每一份1 g于50 mL 小燒杯中，用移液器加10 mL濃HNO3，封口膜封口過夜。次日加入10 mL濃HNO3，5 mL HClO4于電爐上緩慢加熱，當剩下1 mL左右時再加入20 mL濃HNO3，5 mL HClO4，繼續(xù)消化至溶液呈無色透明近干，停止加熱，取下燒杯，用水洗滌燒杯內(nèi)壁多次，合并洗液和殘液，定容于50 mL容量瓶中。

1.5最佳波長的測定

吸取10 μg/mL鐵標準溶液：0.0、6.0 mL,分別加入到2個50 mL容量瓶中，再分別依次加入10 % 鹽酸羥胺1 mL，1 mol/L NaAc 5 mL 及0.15 %鄰二氮菲2 mL，每加入一種試劑后都要搖勻，用去離子水稀釋至刻度，靜置10 min 后，在756型分光光度計上用石英比色皿，以0.0 mL 為空白溶液，用不同波長430~590 nm，每隔10 nm測吸光度(峰值附近沒5 nm測一次吸光度)，并繪制波長與吸光度關(guān)系的曲線找出最佳波長區(qū)間。

1.6Fe(Ⅱ)標曲線的繪制

移液器準確吸取10 μg/mL Fe(Ⅱ)溶液0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5 mL，依次加入到50 mL 容量瓶中，再分別加入1 mL 10%鹽酸羥胺溶液、5 mL 1 mol/L NaAc溶液、2 mL 0.15% 鄰二氮菲溶液。每加入一種溶液都要充分搖勻，最后用水定容，靜置20 min后，以0.0 Fe(Ⅱ)標準溶液為空白，在510 nm波長下測量各種溶液吸光度(A)，繪制標準曲線。

1.7樣品含量測定

分別取處理后的樣品溶液5 mL于50 mL容量瓶中，依次加入1 mL 10% 鹽酸羥胺溶液、5 mL 1 mol/L NaAc溶液、2 mL 0.15% 鄰二氮菲溶液。每加入一種溶液都要充分搖勻。同法測量A。

2結(jié)果與討論

2.1最佳波長的確定

見圖1。 由圖1可看出在510 nm時有最大吸收值0.244，所以最佳波長選510 nm。

圖1　掃描波長

2.2標準曲線

見圖2。

圖2　Fe(Ⅱ)標準曲線

2.310種食用菌中Fe的含量

測量結(jié)果表明，不同食用菌中鐵的含量有顯著差異，香菇、白靈菇和黑木耳中鐵含量較高，蛹蟲草中鐵含量最低，這可能與食用菌生長用的栽培料不同有關(guān)。詳見表1。

表1 10種食用菌中Fe的質(zhì)量分數(shù)　單位：μg/g

3討論

鐵是人與動物身體組織和血液極重要的組成物，在人體所必需的10多種微量元素中，無論在重要性上還是在數(shù)量上鐵都屬首位。鐵是維持生命的主要物質(zhì)，是制造血紅素和肌血球素的主要物質(zhì)，是促進維生素B族代謝的必要物質(zhì)。鐵和鈣是中國人特別是女性飲食中最缺乏的兩大營養(yǎng)素。人體所攝取的鐵中實際上只有大約8%被吸收而進入血液之中。體內(nèi)的鐵大部分用于制造血紅素。人體中鐵主要有以下功效：促進發(fā)育、增加對疾病的抵抗力、調(diào)節(jié)組織呼吸，防止疲勞、構(gòu)成血紅素，預防和治療因缺鐵而引起的貧血、使皮膚恢復良好的血色[7]。

鐵吸收、周轉(zhuǎn)、利用和代謝都受到生物體的嚴格控制，鐵缺乏固然對健康不利，但鐵過量對機體造成的危害往往更嚴重。因此，無論是在日常生活中，還是在醫(yī)學上，都應(yīng)科學地把握鐵的攝入量。

實驗中的10種食用菌含鐵量都在限度之內(nèi)，正常食用不會對機體造成損傷。實驗中選用的10種食用菌，香菇、杏鮑菇、平菇、黑木耳、金針菇是常見常食菌種，黑蓋平菇、茶薪菇、花菇、白靈菇、雞腿菇是稀有食用菌。

本實驗測定實驗室培養(yǎng)的食用菌中鐵的含量，方法簡單、快速、可靠，為食用菌的藥食兩用提供了依據(jù)。

參考文獻：

[1]張婧萱,羅燕,廖保寧,等.鄰二氮菲分光光度法測定食用菌中鐵的含量[J].微量元素與健康研究,2006,23(1):31-32.

[2]吳寧遠.蒙藥那如-中微量元素含量測定[J].微量元素與健康研究,1999,18(3):74.

[3]曹繼華,王正益,王勤.中藥微量元素與健康[J].廣東微量元素科學,1999,6(10):10.

[4]劉建華,韓麗琴,董順福.紫外分光光度法測定中草藥中鐵的含量[J].微量元素與健康研究,2007,24(3):27-29.

[5]穆衛(wèi)東,王虹,楊曉明，等.魚腥草等七種中草藥中鐵元素的測定分析[J].廣東微量元素科學,2006,13(12): 47-49.

[6]宣志紅.紫外分光光度法測定前胡藥材中總香豆素[J].中草藥,2008,39(11):1741-1742.

[7]趙慶華,韓麗琴,劉建華.紫外分光光度法測定中草藥中鐵的含量[J].廣東微量元素科學,2006,13(12):43-46.

Determination of Iron Content in Edible Fungus From Lab

YE Zhaowei, LI Jinzhe, YIN Donglin, LIU Zhuming, WANG Dezhi

(Xinyang Argricultural College,Xinyang 464000, China)

Abstract：To study the content of iron in Forest mushroom, pleurotus eryngii quel, oyster mushroom et al was determined. The sampies were smashed and digested，adding 1,10-phenanthroline for color agent to the soiution. The iron content of the sampie was calculated by measuring the absorbances of sampie at 510 nm by UV spectrophotometry. The resuits show that the content of iron in black fungus, forest mushroom and bailing is higher than that in the others，the content of iron in oyster mushroom is the lowest.There is marked content difference in 10 kinds of edible fungus.

Key words:UV spectrophotometry；edible fungus；iro

中圖分類號：O 657.31

文獻標識碼：A

作者簡介：葉兆偉(1982—)，男，河南信陽人，碩士研究生，講師，中藥有效成分提取及藥理作用研究。

基金項目：河南省二○一五年科技發(fā)展計劃項目，項目編號：152102210222

收稿日期：2015 - 10 - 15

文章編號：1006-446X(2016)02-0020-04