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        高遷移率族蛋白B1和增殖細(xì)胞核抗原在宮頸癌組織中的表達(dá)及其相關(guān)因素分析

        2016-04-07 20:32:56丁文清
        中國當(dāng)代醫(yī)藥 2016年5期
        關(guān)鍵詞:宮頸癌

        丁文清

        [摘要] 目的 探討高遷移率族蛋白B1(HMGB1)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)在宮頸癌組織中的表達(dá)及其相關(guān)因素。 方法 選取2008年9月~2014年10月我院收治的60例宮頸癌患者作為研究對象,手術(shù)留取宮頸癌組織標(biāo)本60份(宮頸癌組)、癌旁組織標(biāo)本60份(癌旁組)、正常組織標(biāo)本60份(正常組),采用免疫組織化學(xué)法檢測三組HMGB1和PCNA的表達(dá),并分析兩指標(biāo)與臨床病理特征的關(guān)系。 結(jié)果 宮頸癌組、癌旁組和正常組的HMGB1陽性表達(dá)率分別為96.7%、23.3%和6.7%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);宮頸癌組、癌旁組和正常組的PCNA陽性表達(dá)率分別為91.7%、66.7%和43.3%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HMGB1的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度相關(guān),PCNA的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度及腫瘤分化程度相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論 宮頸癌患者的宮頸癌組織中,HMGB1及PCNA表達(dá)水平均顯著增高,兩項(xiàng)指標(biāo)對宮頸癌的預(yù)后評估具有重要意義。

        [關(guān)鍵詞] 宮頸癌;高遷移率族蛋白B1;增殖細(xì)胞核抗原

        [中圖分類號] R711.74 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721(2016)02(b)-0050-03

        Expression of high mobility group protein B1 and proliferating cell nuclear antigen in cervical cancer tissues and and the analysis of related factors

        DING Wen-qing

        Department of Gynaecology,Maternal and Child Health Hospital of Longgang District in Shenzhen City,Shenzhen 518172,China

        [Abstract] Objective To investigate the expression of high mobility group protein B1 (HMGB1) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in cervical cancer tissues and its related factors. Methods 60 cases of cervical cancer treated in our hospital from September 2008 to October 2014 were selected as the research objects,and 60 cases of cervical cancer tissues(cervical cancer group),60 cases of adjacent tissue samples (adjacent group) and 60 cases of normal tissue samples (normal group) were collected by surgery.The expression of HMGB1and PCNA among three groups were detected by immunohistochemistry,and the relationship between the two indexes and clinical pathological features were analyzed. Results The positive expression rates of HMGB1 in cervical cancer group,adjacent group and normal group was respectively 96.7%,23.3% and 6.7%,the difference was statistically significant(P<0.05).The positive expression rates of PCNA in cervical cancer group,adjacent group and normal group was respectively 91.7%, 66.7% and 43.3%,the difference was statistically significant(P<0.05). The expression of HMGB1 was related to TNM stage,lymph node metastasis and degree of tumor differentiation.The expression of PCNA was related to TNM stage,lymph node metastasis,invasion depth and degree of tumor differentiation.The differences were significant(P<0.05). Conclusion The expression level of HMGB1 and PCNA are significantly increased in cervical cancer tissues of patients with cervical cancer,and the two index have important significance to the prognosis of cervical cancer.

        [Key words] Cervical cancer;High mobility group protein B1;Proliferating cell nuclear antigen

        宮頸癌是一種女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤,占女性惡性腫瘤的第二位[1],全球每年約有28萬死亡病例產(chǎn)生[2],是女性常見的死因之一。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是一種低分子非組蛋白,其基因具有參與神經(jīng)生長、細(xì)胞增殖、遷移、分化、炎癥反應(yīng)等功能。在多種惡性腫瘤中,均存在HMGB1的過表達(dá)現(xiàn)象,影響腫瘤的惡性程度及預(yù)后[3]。增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)是一種細(xì)胞核蛋白,在一定程度上可判斷細(xì)胞增殖活性,反映細(xì)胞的增殖狀態(tài)[4]。本研究探討HMGB1及PCNA在宮頸癌患者宮頸癌組織中的表達(dá)水平變化,并對其臨床意義進(jìn)行研究,旨在為宮頸癌的治療及預(yù)后提供幫助。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取2008年9月~2014年10月我院收治的60例宮頸癌患者作為研究對象,手術(shù)留取宮頸癌組織標(biāo)本60份(宮頸癌組)及癌旁組織標(biāo)本60份(癌旁組),另取正常宮頸組織標(biāo)本60份作為正常組?;颊吣挲g21~75歲,平均(43.2±12.7)歲,術(shù)前均未接受放療、化療等針對腫瘤的治療;TNM分期Ⅰ期11例,Ⅱ期12例,Ⅲ期20例,Ⅳ期17例;浸潤型31例,局限型29例;浸潤深度T1 4例,T2 6例,T3 35例,T4 15例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移21例;中高分化28例,低分化32例。

        1.2 方法

        采用免疫組化SP法對HMGB1和PCNA的表達(dá)進(jìn)行檢測。試劑:鼠抗人HMGB1單克隆抗體,鼠抗人PCNA單克隆抗體,EnVision免疫組化二步法試劑盒及DAB顯色劑。所有試劑均購自北京中杉橋生物公司。方法:將選取的石蠟標(biāo)本切成厚4 μm的連續(xù)切片,常規(guī)脫蠟、水化后采用高壓熱修復(fù)法修復(fù)抗原,滴加經(jīng)1∶20濃度稀釋的一抗鼠抗人HMGB1單克隆抗體和鼠抗人PCNA單克隆抗體,4℃孵育過夜,滴加EnVision二抗反應(yīng),DAB控制顯色。沖洗、蘇木精復(fù)染、脫水、封片。陽性對照采用已知的陽性片,陰性對照采用磷酸鹽緩沖液代替一抗。

        1.3 觀察指標(biāo)

        讀片方法采用雙盲法,HMGB1和PCNA蛋白陽性表達(dá)分別位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,HMGB1染色成棕色細(xì)小顆粒,PCNA呈棕褐色或棕黃色顆粒。每個(gè)切片選10個(gè)400倍視野,統(tǒng)計(jì)陽性細(xì)胞數(shù),陽性細(xì)胞數(shù)<10%為陰性標(biāo)本,≥10%為陽性標(biāo)本,并根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)百分比進(jìn)行分級。-:無陽性細(xì)胞;±:陽性細(xì)胞數(shù)<10%;+:陽性細(xì)胞數(shù)為10%~30%;++:陽性細(xì)胞數(shù)30%~60%;+++:陽性細(xì)胞數(shù)>60%。陽性表達(dá)率(%)=陽性標(biāo)本數(shù)/總數(shù)×100%。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 三組HMGB1和PCNA陽性表達(dá)率的比較

        宮頸癌組的HMGB1陽性表達(dá)率為96.7%,癌旁組為23.3%,正常組為6.7%,三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。宮頸癌組的PCNA陽性表達(dá)率為91.7%,癌旁組為66.7%,正常組為43.3%,三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

        表1 三組HMGB1和PCNA陽性表達(dá)率的比較[n(%)]

        與癌旁組和正常組比較,*P<0.05

        2.2 HMGB1和PCNA陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系

        HMGB1的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度相關(guān),PCNA的表達(dá)與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度及腫瘤分化程度相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表2)。

        表2 HMGB1和PCNA陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系[n(%)]

        3 討論

        宮頸癌在女性癌癥中僅次于乳腺癌,具有易復(fù)發(fā)、惡性程度高、預(yù)后不良及病死率高的特點(diǎn),嚴(yán)重危害女性健康。宮頸癌原位癌高發(fā)年齡為30~35歲,浸潤癌為45~55歲,近年來宮頸癌的發(fā)病人群呈明顯年輕化趨勢[5],<35歲的女性患病比例顯著上升,因此對宮頸癌患者的早期診斷及治療顯得尤為重要[6]。

        HMGB1在各種細(xì)胞中廣泛存在,是一種高度保守的單鏈多肽核蛋白,含215個(gè)氨基酸殘基,能夠與DNA結(jié)合[7]。HMGB1在細(xì)胞內(nèi)外具有不同的功能,在細(xì)胞內(nèi)能夠與染色體結(jié)合,參與調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄及DNA的復(fù)制、重組、修復(fù)[8];在細(xì)胞外具有組織修復(fù)、免疫防御以及促炎癥作用[9]。研究發(fā)現(xiàn),前列腺癌、直腸癌、乳腺癌、胃腸間質(zhì)癌等多種惡性腫瘤中都存在HMGB1的過表達(dá)現(xiàn)象,HMGB1的過表達(dá)使轉(zhuǎn)移調(diào)控基因上調(diào),從而參與多種癌癥的生長、轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散[10-11],HMGB1的主要機(jī)制可能是通過抑制某種抑癌因子表達(dá),使細(xì)胞對DNA的修復(fù)能力減弱甚至喪失,導(dǎo)致Ras/ERIC信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化過度,促進(jìn)腫瘤血管的生成及惡性腫瘤的生長轉(zhuǎn)移浸潤[12]。研究表明,HMGB1可通過C-IAP2的表達(dá)及抑制Caspase-3、Caspase-9的活性,從而抑制癌細(xì)胞凋亡的發(fā)生,使腫瘤得以發(fā)生、發(fā)展[13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),宮頸癌組的HMGB1陽性表達(dá)率高于癌旁組和正常組(P<0.05),并與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度相關(guān),這與既往研究結(jié)果一致,說明通過研究HMGB1的表達(dá)將有助于宮頸癌的早期檢測與治療。

        PCNA是一種核內(nèi)酸性蛋白質(zhì),含261個(gè)氨基酸,分子量為35 kD左右[14]。研究指出,PCNA與腫瘤的臨床分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)[15-17]。PCNA存在于增殖細(xì)胞中,大量表達(dá)于S期細(xì)胞核內(nèi),在DNA的合成調(diào)控中發(fā)揮著重要作用[18]。在整個(gè)細(xì)胞增殖過程中,PCNA的表達(dá)先上升后下降,G1后期開始增加,S期達(dá)到高峰,然后從G2到M期呈下降趨勢,其變化水平與細(xì)胞增殖及DNA合成過程一致[19],可作為評估腫瘤細(xì)胞增殖能力及惡性程度的有效指標(biāo)[20]。本研究中,宮頸癌組的PCNA陽性表達(dá)率高于癌旁組和正常組(P<0.05),并與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度及腫瘤分化程度相關(guān),說明PCNA的表達(dá)率隨腫瘤臨床分期和病理分級的增高而上升,因此檢測宮頸癌組織中的PCNA變化水平有利于癌癥的預(yù)后評估。

        綜上所述,在宮頸癌患者宮頸癌組織中,HMGB1及PCNA的陽性表達(dá)均明顯升高,兩指標(biāo)對宮頸癌的早期檢測及預(yù)后判斷具有重要意義,值得臨床推廣。

        [參考文獻(xiàn)]

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        (收稿日期:2015-10-13 本文編輯:李秋愿)

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