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        宮頸癌中EGFR和FSCN1的表達及其相關(guān)性

        2016-04-06 02:11:55黃必飛王超群趙永明孫鑫鑫王倩曾悅邵俊康王艷
        關(guān)鍵詞:組織化學(xué)生長因子宮頸癌

        黃必飛,王超群,趙永明,孫鑫鑫,王倩,曾悅,邵俊康,王艷

        (東陽市人民醫(yī)院,浙江 金華 322100,1.病理科;2.腫瘤外科;3.腫瘤內(nèi)科)

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        宮頸癌中EGFR和FSCN1的表達及其相關(guān)性

        黃必飛1,王超群1,趙永明2,孫鑫鑫1,王倩1,曾悅1,邵俊康1,王艷3

        (東陽市人民醫(yī)院,浙江 金華 322100,1.病理科;2.腫瘤外科;3.腫瘤內(nèi)科)

        [摘 要]目的:探討宮頸癌中表皮生長因子受體1(EGFR)及Fascin-1(FSCN1)蛋白的表達及其相關(guān)性。方法:采用免疫組織化學(xué)EnVision法檢測120例宮頸癌組織中EGFR及FSCN1蛋白的表達。結(jié)果:宮頸癌組織中EGFR蛋白陽性率為89.2%(107/120),F(xiàn)SCN1蛋白陽性率為99.2%(119/120),其中強陽性率為88.3%(106/120)。EGFR陽性表達與FSCN1強陽性表達呈顯著正相關(guān)(P<0.01)。結(jié)論:宮頸癌中EGFR可能參與正性調(diào)控FSCN1表達。

        [關(guān)鍵詞]表皮生長因子受體1;Fascin-1;宮頸腫瘤;免疫組織化學(xué)

        宮頸癌是全球女性最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病人數(shù)和死亡人數(shù)均位于女性惡性腫瘤前列[1]。近年來,雖然宮頸癌的綜合治療有了新的進展,但其仍然是導(dǎo)致中老年女性死亡的重要原因之一,且發(fā)病年齡有年輕化趨勢[2]。因此,尋找宮頸癌發(fā)生發(fā)展的分子機制,并對其進行干預(yù),對提高患者生存質(zhì)量和生存率有著重要意義。表皮生長因子受體1(EGFR)是促腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要因子,其在宮頸癌侵襲轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮了重要作用[3-4]。Fascin-1(FSCN1)是一種相對分子質(zhì)量為5.5×104的細胞骨架蛋白,其高表達與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[5-10]。有研究表明,激活食管癌中EGFR信號通路可上調(diào)FSCN1表達[11]。然而,關(guān)于宮頸癌中EGFR和FSCN1之間的關(guān)系尚鮮見相關(guān)報道。本研究采用免疫組織化學(xué)EnVision法檢測宮頸癌組織中EGFR和FSCN1蛋白的表達并分析其相關(guān)性,以進一步探索影響宮頸癌發(fā)生發(fā)展的分子機制。

        1 資料和方法

        1.1一般資料 收集2007年1月到2012年12月東陽市人民醫(yī)院病理科宮頸鱗狀細胞癌石蠟標(biāo)本120例,患者年齡34~77歲,中位年齡55歲。按WHO標(biāo)準(zhǔn)(2003年)對各病例進行分級和分期。組織學(xué)分化:高分化21例,中分化84例,低分化15例;TNM分期:I期81例,II/III期39例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移94例;浸潤深度:>1/2 者75例,<1/2者45例。所有病例術(shù)前均未行放療、化療等抗腫瘤治療。

        1.2免疫組織化學(xué)染色 所有組織均以10%中性甲醛溶液固定,石蠟包埋,4 μm連續(xù)切片,用于HE及免疫組織化學(xué)染色。免疫組織化學(xué)染色采用EnVision二步法:枸櫞酸鹽緩沖液高壓熱修復(fù),0.3% H2O2室溫孵育10~15 min,鼠抗人FSCN1單克隆抗體(克隆號:55K-2,Santa Cruz公司)及兔抗人EGFR多克隆抗體(克隆號:1005,Santa Cruz公司)均以1:100稀釋比例滴加,室溫孵育1 h,之后用Dako公司EnVision二步法試劑盒室溫孵育30 min,最后用DAB顯色劑顯色5~8 min,蘇木素復(fù)染、脫水、封蠟。1.3 免疫組織化學(xué)評分 ①FSCN1染色主要定位于細胞漿,其結(jié)果判定采用以下標(biāo)準(zhǔn):染色強度計分:0(無染色),1(淡黃色),2(棕黃色),3(棕褐色);染色范圍計分:0(無陽性細胞),1(1%~25%),2 (26%~50%),3(51%~75%),4(76%~100%);兩者相加得分0~7分。以得分≥3分且切片中≥5%細胞染色視為陽性,其中得分為6~7分者視為強陽性,其余為弱陽性。②EGFR染色主要定位于細胞膜和細胞漿,本研究中以≥10%癌細胞可見弱或強的胞膜著色視為陽性。

        1.4統(tǒng)計學(xué)處理方法 數(shù)據(jù)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件。樣本率比較應(yīng)用x2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1EGFR和FSCN1蛋白在宮頸癌中的表達及分布

        EGFR蛋白主要定位于癌細胞胞膜和胞漿;FSCN1蛋白主要定位于癌細胞胞質(zhì)中,血管內(nèi)皮細胞均陽性表達(見圖1)。宮頸癌組織中EGFR蛋白陽性率為89.2%(107/120)。120例宮頸癌中,119例(占99.2%)FSCN1蛋白表達為陽性,其中包含106例(占88.3%)強陽性病例。

        A:EGFR陽性表達(×200);B:FSCN1強陽性表達(×100)圖1 宮頸鱗狀細胞癌免疫組織化學(xué)染色(EnVision二步法)

        2.2宮頸癌中EGFR和FSCN1的相關(guān)性 表1顯示,EGFR陽性組中FSCN1強陽性率為91.6%,而在EGFR陰性組中FSCN1強陽性率為61.5%,宮頸癌中EGFR陽性表達與FSCN1強陽性表達呈顯著正相關(guān)(P<0.01)。

        表1 宮頸癌中EGFR和FSCN1的相關(guān)性 [n(%)]

        3 討論

        EGFR是表皮生長因子受體家族(HER/erbB家族)的重要成員,其廣泛分布于人體各組織中,是一種具有酪氨酸激酶活性的I型跨膜糖蛋白受體,它由胞外N末端配基結(jié)合區(qū)、跨膜親脂片段和胞內(nèi)C末端酪氨酸激酶區(qū)三部分組成。當(dāng)配體(如EGF)結(jié)合于胞外區(qū)后,EGFR形成二聚體,引起胞內(nèi)區(qū)自身磷酸化并激活酪氨酸激酶,啟動一系列下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)節(jié)細胞各方面功能,包括細胞增殖、凋亡和分化[12]。研究表明,在多種腫瘤細胞中存在EGFR的高表達或異?;罨渫ㄟ^激活下游PI3K-AKT和MEK-ERK1/2兩條主要的信號通路,在腫瘤細胞增殖、分化以及侵襲轉(zhuǎn)移過程中起了重要作用[13]。國內(nèi)外已有大量研究[3-4]證實,宮頸癌中EGFR高表達與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、局部浸潤等預(yù)后不良因素相關(guān)。

        FSCN1是一種相對分子質(zhì)量為55 000的細胞骨架蛋白,它與細胞膜絲狀偽足、片狀偽足、微棘的形成密切相關(guān),從而促進細胞運動、遷移及腫瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移[14]。研究[5-10]表明,F(xiàn)SCN1在胃癌、乳腺癌、非小細胞肺癌、結(jié)直腸癌等多種腫瘤中表達增強,且能顯著增強胃癌及非小細胞肺癌細胞的侵襲能力。因此,F(xiàn)SCN1在腫瘤發(fā)生及進展過程中發(fā)揮了重要作用。目前,國內(nèi)外僅有少數(shù)文獻報道了宮頸癌中FSCN1的表達[15-17],這些研究顯示宮頸癌中FSCN1陽性率在67.0%到90.9%之間。而本研究中FSCN1陽性率為99.2%,其中強陽性率為88.3%,與先前的研究比較陽性率偏高,我們分析可能是由于這些研究間采用了互不相同的FSCN1評分標(biāo)準(zhǔn),或者是因為選取了不同地區(qū)的宮頸癌患者。

        有研究[11]顯示食管癌中激活EGFR信號通路可上調(diào)FSCN1表達。本研究通過免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測了120例宮頸癌組織中EGFR和FSCN1的表達,顯示EGFR與FSCN1強陽性表達呈正相關(guān)。但本研究中因FSCN1僅1例陰性,故分層分析不能顯示EGFR與FSCN1陽性(包含全部陽性病例)之間的關(guān)系。以上結(jié)果初步顯示宮頸癌中EGFR可能參與正性調(diào)控FSCN1表達,有待進一步大樣本進行驗證。

        參考文獻:

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        (本文編輯:丁敏嬌)

        ·臨 床 經(jīng) 驗·

        Expression and correlation of EGFR and FSCN1 in cervical cancer

        HUANG Bifei1,WANG Chaoqun1,ZHAO Yongming2,SUN Xinxin1,WANG Qian1,ZENG Yue1,SHAO Junkang1,WANG Yan3.1.Department of Pathology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100; 2.Department of Surgical Oncology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100; 3.Department of Medical Oncology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100

        Abstract:Objective:To explore the expression of EGFR and FSCN1 protein in cervical cancer and its correlation.Methods:The expression of EGFR and FSCN1 in 120 cases of cervical cancer was evaluated with immunohistochemical technique,EnVision method.Results:EGFR protein expression rates in cervical cancer was 89.2% (107/120).FSCN1 protein positive rate in cervical cancer was 99.2% (119/120),in which strong positive rate was 88.3% (106/120).EGFR positive expression was signifi cantly positive correlation with FSCN1 strong positive expression (P<0.01).Conclusion:EGFR may participate in positive regulation FSCN1 expression in cervical cancer.

        Key words:EGFR; FSCN1; cervical neoplasms; immunohistochemistry

        作者簡介:黃必飛(1971-),男,浙江東陽人,副主任醫(yī)師。

        基金項目:金華市科技計劃重點項目(2012-3-021);浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計劃項目(2012KYB230);金華市科技計劃項目(2013-3-097)。

        收稿日期:2015-02-06

        [中圖分類號]R651.65

        [文獻標(biāo)志碼]B

        DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.01.017

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