蔣令修　　梁　宇　　陳文武　　王金蘭　　李　香　　孫永梅　　薛孟周▲.河南大學第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南開封　475000；2.河南大學第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南開封　475000；.鄭州大學第二附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南鄭州　450000

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急性腦出血患者血清一氧化氮、胰島素樣生長因子、巨噬細胞移動抑制因子水平及臨床意義

蔣令修1梁宇2▲陳文武1王金蘭3李香1孫永梅1薛孟周1▲
1.河南大學第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南開封475000；2.河南大學第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南開封475000；3.鄭州大學第二附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南鄭州450000

[摘要]目的探討急性腦出血患者血清一氧化氮（NO）、胰島素樣生長因子1（IGF-1）、巨噬細胞移動抑制因子（MIF）表達水平以及臨床意義。方法選擇2014年8月～2015年4月河南大學第一附屬醫(yī)院腦出血患者50例為研究組，另選擇健康志愿者50例為對照組。檢測兩組研究對象血清中NO、IGF-1、MIF的表達水平，并分析其統(tǒng)計學差異。結(jié)果研究組患者血清NO、IGF-1水平顯著低于對照組，差異均有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；MIF水平顯著高于對照組，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。腦出血患者不同病情程度血清NO、IGF-1、MIF比較，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。腦出血存活患者NO水平顯著高于死亡者，IGF-1水平顯著高于死亡者，MIF水平顯著低于死亡者，差異均有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。相關性分析結(jié)果顯示，患者血清IGF-1的表達與MIF的表達呈顯著負相關（r=-0.879，P＜0.01）。結(jié)論腦出血患者血清NO、IGF-1水平顯著下降，MIF水平顯著上升，并且與患者的病情以及預后相關。

[關鍵詞]急性腦出血曰一氧化氮曰胰島素樣生長因子曰巨噬細胞移動抑制因子

腦出血后的應激反應可導致內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變，腦出血后還會影響下丘腦的功能，從而使兒茶酚胺合成增加，肝細胞、心肌細胞等均會導致局灶性改變，影響機體微環(huán)境[1]。一氧化氮（nitric oxide，NO）主要是發(fā)揮舒張血管的作用，腦出血后多種原因會導致NO水平下降[2]。胰島素樣生長因子1（insulin growth factor-1，IGF-1）參與神經(jīng)細胞生長發(fā)育，能夠促進神經(jīng)細胞的增殖[3]。巨噬細胞移動抑制因子（macrophagemigration inhibition factor，MIF）具有加速動脈粥樣硬化及血管硬化作用[4]。本研究選擇50例腦出血患者為研究對象，分析腦出血患者血清NO、IGF-1、MIF水平，并分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料

選擇2014年8月～2015年4月在河南大學第一附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）治療的腦出血患者50例為研究對象（研究組）。納入標準：腦出血診斷明確。排除標準：有其他系統(tǒng)嚴重疾病者，既往有腦出血、腦卒中病史，有精神病或者神經(jīng)病者，有頭顱手術病史者。50例患者中男27例，女23例，年齡51～83歲，平均（70.4±12.8）歲。另選我院健康體檢的志愿者50例為對照組，其中男24例，女26例，年齡49～75歲，平均（67.9±11.5）歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2檢測方法

抽取晨起空腹靜脈血10mL，采用硝酸還原酶方法檢測NO水平；采用放射免疫分析法檢測IGF-1水平；采用酶聯(lián)免疫吸附方法檢測MIF水平。所有操作均嚴格按照說明書進行。

1.3觀察指標

比較兩組血清NO、IGF-1、MIF水平，評價其在腦出血患者血清中的表達。根據(jù)腦出血患者入院時輕中度分為輕度、中度、重度亞組，比較不同病情程度亞組患者血清NO、IGF-1、MIF水平，評價其與腦出血患者病情程度的關系。根據(jù)腦出血患者出院時預后將其分為存活亞組和死亡亞組，比較兩組血清NO、IGF-1、MIF水平，評價其與患者預后的關系。分析腦出血患者血清中NO、IGF-1及MIF表達的相關性。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 12.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差（x依s）表示，兩組間比較采用t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用X2檢驗；相關性分析采用Pearson相關系數(shù)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1研究組和對照組血清NO堯IGF-1堯M IF水平比較

研究組患者血清NO、IGF-1水平顯著低于對照組，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；MIF水平顯著高于對照組，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表1。

表1　研究組和對照組血清NO、IGF-1、MI F水平比較（x依s）

2.2不同病情程度腦出血患者血清NO堯IGF-1堯M IF水平比較

不同病情程度腦出血患者血清NO、IGF-1、MIF水平比較，差異均有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。輕度組NO、IGF-1水平最高，其次為中度亞組，重度亞組最低；輕度亞組MIF水平最低，其次為中度亞組，重度亞組最高，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表2。

表2　不同病情程度腦出血患者血清NO、IGF-1、MI F水平比較（x依s）

2.3不同預后情況腦出血患者血清NO堯IGF-1堯M IF水平比較

腦出血患者死亡患者9例，存活患者41例，存活亞組NO水平顯著高于死亡亞組，IGF-1水平顯著高于死亡亞組，MIF水平顯著低于死亡亞組，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表3。

表3　不同預后情況腦出血患者血清NO、IGF-1、MI F水平比較（x依s）

2.4腦出血患者血清NO堯IGF-1堯M IF水平的相關性

Pearson相關性分析結(jié)果顯示，患者血清IGF-1的表達與MIF的表達呈顯著負相關（r=-0.879，P＜0.01）。見圖1。

3　討論

NO在神經(jīng)元系統(tǒng)中發(fā)揮雙重的作用：一方面其經(jīng)過信息傳遞，發(fā)揮舒張血管的作用，一方面對中樞具有介導興奮毒作用[5-6]。目前對腦出血患者血漿中NO水平的研究結(jié)果存在分歧。有學者的動物試驗結(jié)果顯示，腦出血后3 d，大鼠血漿中的NO水平較正常水平低，并且NOS活性低于假手術組。腦出血后血腫周圍腦組織水腫，腦組織缺氧，內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞受損嚴重，NO合成能力顯著下降，血管痙攣，加重顱內(nèi)壓；另外，出血后，大量的紅細胞發(fā)生崩解，血紅蛋白大量釋放，與NO結(jié)合，阻止其舒張血管平滑肌的作用，降低血管壁NO水平，干擾環(huán)磷酸核苷的生成，抑制血管舒張；腦血管痙攣、供血不足，導致L-精氨酸缺乏，NOS活性下降，NO合成不足，并且在這個過程中，產(chǎn)生大量的自由基，NO與超氧離子結(jié)合，生成過氧硝酸陰離子，縮短NO半衰期，促進NO分解，加重血管痙攣[7-8]。本次研究的結(jié)果也顯示，腦出血患者血清NO水平顯著低于對照組，并且隨著患者病情加重，NO水平持續(xù)下降，與患者預后也具有一定的關系，NO水平越高的患者，預后較好[9]。NO對腦出血后腦損傷具有保護作用?；颊卟∏樵街?，NO水平越低，并且NO越低的患者，預后越差。

圖1　腦出血患者血清胰島素樣生長因子1與巨噬細胞移動抑制因子水平相關性分析

IGF-1是一種單鏈多肽，主要由人肝細胞合成及分泌，調(diào)節(jié)機體的生長發(fā)育[10]。人體內(nèi)的多個臟器、組織均可表達IGF-1基因，局部組織具有分泌IGF-1的作用，其生物活性受到TGF-R、胰島素樣生長因子1結(jié)合蛋白（IGFBP）調(diào)節(jié)。而IGFBPs是直接的調(diào)節(jié)因素。IGFBPs對IGF-1的調(diào)節(jié)作用通過轉(zhuǎn)運作用、儲存作用等發(fā)揮[11]。IGF-1具有促進細胞分化，刺激細胞增殖，刺激細胞RNA、DNA合成等作用，還能刺激骨組織、其他骨髓外組織細胞有絲分裂，刺激組織細胞分化后的功能表達，抑制肝糖釋放，抑制脂肪分解，促進葡萄糖攝取及轉(zhuǎn)化，降低血液氨基酸、游離脂肪酸濃度，促進蛋白質(zhì)、糖原、脂質(zhì)合成的作用[12-13]。正常情況下，在腦組織中IGF-1呈低表達，腦卒中中，IGF-1在垂體中的水平最高，其次是腦干。IGF-1在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有促進膠質(zhì)細胞分化和有絲分裂，促進形成軸突髓鞘，維持神經(jīng)細胞的營養(yǎng)，從而發(fā)揮保護神經(jīng)的作用。IGF-1缺乏可導致與神經(jīng)變性相關的疾病，例如共濟失調(diào)、帕金森綜合征等。

腦出血后，發(fā)生腦細胞死亡，血腫周圍腦組織出現(xiàn)腦水腫，血腦屏障遭到破壞，血腫周圍腦細胞凋亡。腦出血后，出現(xiàn)興奮性中毒、蛋白水解酶高表達、炎性反應、血腫釋放產(chǎn)物具有毒性作用等。細胞凋亡參與了出血后的繼發(fā)性腦損傷?；颊吣X出血后細胞的凋亡程度、出血量、NIHSS評分間具有顯著正相關關系[13]，而IGF-1能夠抑制細胞的凋亡。腦損傷后，IGF-1激活，外周血中的IGF-1經(jīng)過血腦屏障，進入腦組織內(nèi)，發(fā)揮保護神經(jīng)細胞的功能[14]。IGF-1能夠抑制谷氨酸分泌，抑制細胞凋亡，減輕興奮性毒性，減輕腦組織的繼發(fā)性損傷，促進組織修復[15]。IGF-1還能夠阻止細胞遲發(fā)型死亡，誘導膠質(zhì)細胞的增殖，進而發(fā)揮支持、保護作用，并表達IGF-1，形成良性循環(huán)。有研究顯示，急性腦出血后，IGF-1在腦組織中的表達有所增加，但是增加的程度遠遠不足以改善患者的神經(jīng)損傷情況，但是患者谷氨酸下降，細胞凋亡減少。然而，有研究顯示，急性腦出血患者，腦組織中的IGF-1水平增加，且血漿中IGF-1水平下降[14]，這與本研究結(jié)果一致。在本次研究中腦出血患者血清IGF-1水平較對照組顯著下降，并且隨著病情的加重，下降越明顯，而其與患者的預后也具有一定的相關性，其水平越低的患者，預后越差。腦出血的患者機體處于應激狀態(tài)，血漿內(nèi)的IGF-1向腦組織轉(zhuǎn)移，在出血初期，丘腦垂體功能紊亂，分泌生長激素下降，血清中IGF-1水平下降。腦出血后，生長因子的需求量增加、分布改變、代謝清除加速等均導致IGF-1生成和分泌不足，血清中IGF-1水平下降。

MIF是一種分子量為12.5 kD的蛋白質(zhì)，含115個氨基酸殘基，其參與了炎性反應、免疫反應、細胞生長、血管生成[16]。其與多種疾病有關，包括動脈粥樣硬化、克羅恩病、腎小球腎炎、類風濕性關節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、遲發(fā)型超敏反應、腫瘤、創(chuàng)傷愈合、移植物的排斥反應等[17]。MIF能抑制巨噬細胞從T細胞激活區(qū)向外移動，同時激活附近的巨噬細胞使吞噬作用增強[18]。MIF在炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起著不容忽視的作用。與其他促炎細胞因子不同的是，MIF以前體形式儲存于包括垂體前葉細胞在內(nèi)的多種細胞胞漿內(nèi)，當受到應激刺激時迅速分泌出胞[19-20]。循環(huán)MIF量增加，通過激活和促進TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IFN-γ等炎癥細胞因子表達，NO的釋放，環(huán)氧合酶-2的誘導而直接促使炎癥的發(fā)生和擴大。同時MIF抑制和反向調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素對免疫和炎癥細胞活性的抑制及對炎癥細胞因子釋放的抑制來達到促炎的目的。敗血癥休克時炎癥細胞胞漿內(nèi)的MIF合成加強和聚集增加，與炎癥部位炎癥細胞的聚集呈現(xiàn)平行相關關系。在急性呼吸窘迫綜合征患者中，MIF可能是通過中性細胞趨化性巨噬細胞炎性-2因子的上調(diào)而發(fā)揮作用。人血管內(nèi)皮細胞在脂多糖刺激后產(chǎn)生干細胞因子（SCF），由于SCF與MIF之間可能潛在著相互作用而激活和募集巨噬細胞，因此在炎癥局部高水平MIF協(xié)同升高的SCF共同加強炎性反應。噬酸性粒細胞是MIF的重要來源之一，在過敏性炎性疾病的發(fā)病過程中噬酸性粒細胞是重要的參與者。在過敏性炎癥部位MIF蛋白的表達增加與噬酸性粒細胞的聚集密切相關。慢性炎性疾病如風濕性關節(jié)炎和腎小球腎炎等，其中MIF基因啟動子的多態(tài)性與病情嚴重程度相關，因此MIF的促炎功能直接影響炎性疾病的預后。腦出血后，血腫周圍腦組織受壓、缺血缺氧，收到損傷，大量炎癥細胞釋放，加上急性腦出血后，患者機體處于應激反應，導致MIF在循環(huán)中水平顯著上升。在本次研究中，腦出血患者MIF水平顯著高于健康對照組，進一步分析，腦出血患者隨著病情的加重，MIF水平持續(xù)上升，并且MIF越高的患者預后較差。這提示，MIF參與了急性腦出血患者病情發(fā)生發(fā)展過程，并且與患者病情及預后相關。

本研究對NO、IGF-1、MIF三者之間的關系進行了分析，結(jié)果顯示，IGF-1與MIF呈顯著負相關，IGF-1表達下降，對MIF的抑制作用也下降，導致后者級聯(lián)反應增加，炎性反應程度及病情均加重。IGF-1與MIF之間存在顯著的負相關的關系，具體機制還期望在今后的研究中進一步明確。

綜上所述，腦出血患者血清NO、IGF-1表達下降，而MIF表達上升，并且與患者的病情及預后具有相關性。因此，臨床上，檢測患者血清NO、IGF-1、MIF表達水平對評價患者病情、預測預后等均具有一定的臨床意義。

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Expression and significance of serum NO,IGF-1,M IF levels in acute in鄄tracerebral hemorrhage

JIANG Lingxiu1LINAG Yu2▲CHENWenwu1WANG Jinlan3LIXiang1SUN Yongmei1XUEMengzhou1▲
1.Departmentof Neurology,the First Affiliated Hospital of He'nan University,He'nan Province,Kaifeng 475000,China; 2.Department of Respiratory,the First Affiliated Hospital of He'nan University,He'nan Province,Kaifeng 475000, China;3.Department of Neurology,the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University,He'nan Province,Zhengzhou 450000,China

[Abstract]Objective To explore the expression levels and significance of serum NO,IGF-1,MIF in patients with acute cerebral hemorrhage.M ethods Fifty patients from August 2014 to April 2015 with acute intracerebral hemorrhage treated in the First Affiliated Hospital of He'nan University were selected as study group,and 50 healthy volunteers were selected as control group.Expression of serum NO,IGF-1,MIF levels of two groups were examined.Statistical differences analysis was operated.Results Levels of serum NO,IGF-1 in study group were lower than the control group,the differenceswere statistically significant(P＜0.01);MIF level of study group was higher than control group, the difference was statistically significant(P＜0.01);levels of serum NO,IGF-1 and MIF in patients with different severity showed statistically significant differences(P＜0.01).NO and IGF-1 levels of survival patients were higher than dead patients,and MIF levelwas lower than dead patients,the differenceswere statistically significant(P＜0.01). Correlation analysis showed that,the levels of serum IGF-1 was significantly negative correlated with MIF(r=-0.879,P＜0.01).Conclusion The levels of serum NO,IGF-1 are significantly reduced in patients with acute intracerebral hemorrhage,and MIF increased apparently,which are related with the patients'condition and prognosis.

[Key words]Acute intracerebral hemorrhage;NO;IGF-1;MIF

收稿日期：（2015-10-06本文編輯：任念）

[基金項目]國家自然科學基金面上項目（81471174）?！餐ㄓ嵶髡?/p>

[中圖分類號]R743

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-7210（2016）01（a）-0058-04