楊一平 陳偉國 錢秋杰 戴建忠

(海寧市蠶桑技術(shù)服務站，浙江嘉興 314400)

甲氧蟲酰肼和阿維菌素及其混合制劑對家蠶的安全性評價

楊一平 陳偉國 錢秋杰 戴建忠

(海寧市蠶桑技術(shù)服務站，浙江嘉興 314400)

為了研究類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑甲氧蟲酰肼對家蠶的毒性，測定了甲氧蟲酰肼和阿維菌素及其混合制劑對家蠶的急性經(jīng)口食下毒性、熏蒸毒性、在桑樹上的內(nèi)吸傳導毒性和殘毒期。試驗結(jié)果表明，3種農(nóng)藥對3齡起蠶的致死中濃度(LC50)分別為24%甲氧蟲酰肼懸浮劑(SC)0.060 9 mg/L、1.8%阿維菌素水乳劑(EW)0.001 3 mg/L、10%阿維·甲氧蟲酰肼懸浮劑(SC)0.007 8 mg/L(根據(jù)有效含量計算為阿維菌素0.001 6 mg/L·甲氧蟲酰肼0.006 2 mg/L)，3種藥劑對家蠶的毒性等級均為劇毒級;10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液(100 mg/L)、24%甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液(240 mg/L)、1.8%阿維菌素EW 1 000倍液(18 mg/L)對家蠶均無熏蒸毒性;24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液(80 mg/L)、1.8%阿維菌素EW 1 500倍液(12 mg/L)和10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液(100 mg/L)在桑樹上的殘毒期均＞50 d;24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液(80 mg/L)、10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液(100 mg/L)均可通過內(nèi)吸作用并傳導到未噴藥的桑葉上。建議桑園附近及養(yǎng)蠶區(qū)域避免使用此類農(nóng)藥。

甲氧蟲酰肼;阿維菌素;家蠶;毒性;內(nèi)吸傳導;致死中濃度;安全性

甲氧蟲酰肼［N－叔丁基－N'－(3－甲氧基－2－甲基苯甲?；?－3，5－二甲基苯甲酰肼，methoxyfenozide］［1］屬二芳酰肼類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，對鱗翅目害蟲具有高度選擇殺蟲活性，以觸殺作用為主，兼有一定的內(nèi)吸傳導殺蟲作用。該藥屬仿生型蛻皮激素類殺蟲劑，其作用機理獨特，藥劑進入昆蟲體內(nèi)后與蛻皮激素受體結(jié)合，誘導昆蟲提早成熟進入蛻皮過程，但又不能形成健康的新表皮，由于不能完全蛻皮，從而導致害蟲脫水、饑餓，最終死亡，其藥效經(jīng)過較長［1－3］。甲氧蟲酰肼主要用于蔬菜、果樹、棉花和水稻等作物防治鱗翅目害蟲［4－7］。240 g/L甲氧蟲酰肼懸浮劑已列入2015年浙江省農(nóng)業(yè)廳推薦的主要農(nóng)作物(水稻)病蟲害防治藥劑品種，用于防治二化螟、三化螟及蔬菜鱗翅目害蟲，2016年浙江省農(nóng)業(yè)廳又將10%阿維·甲氧蟲酰肼懸浮劑列入二化螟防治藥劑［8］。相關(guān)文獻報道了甲氧蟲酰肼對家蠶的急性經(jīng)口毒性為高毒至劇毒［9－11］，為進一步明確其對養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性，我們于2016年春、夏季系統(tǒng)測定了10%阿維·甲氧蟲酰肼、甲氧蟲酰肼等對家蠶的毒性，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試農(nóng)藥 10%阿維·甲氧蟲酰肼(有效成份含2%阿維菌素和8%甲氧蟲酰肼)懸浮劑(SC)，浙江省上虞市銀邦化工有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號LS20140205;24%甲氧蟲酰肼懸浮劑(SC)，浙江省上虞市銀邦化工有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20121858;1.8%阿維菌素水乳劑(EW)，浙江錢江生物化學股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD20110261;77.5%敵敵畏乳油(EC)，南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號PD85105－2。

1.1.2 供試家蠶品種 白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 供試桑園及桑樹品種 海寧市蠶桑技術(shù)服務站試驗桑園。強桑1號，4年生，中干樹型養(yǎng)成，每667 m2桑園栽植600株。

1.2 試驗方法

1.2.1 3種農(nóng)藥對3齡家蠶的急性經(jīng)口毒性測定將3種殺蟲劑按質(zhì)量濃度稀釋成5～7個濃度梯度，10%阿維·甲氧蟲酰肼SC為0.013 9、0.011 6、0.009 6、0.008 0、0.006 7、0.005 6 mg/L;24%甲氧蟲酰肼SC為0.200 0、0.142 9、0.102 0、0.072 9、0.052 1、0.037 2、0.026 6 mg/L;1.8%阿維菌素EW為 0.001 8、0.001 4、0.001 2、0.000 9、0.000 7、0.000 6 mg/L。取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，剪成4 cm×4 cm左右的方形葉片置于保鮮盒內(nèi)備用。每處理區(qū)數(shù)3齡起蠶20頭供試，每處理區(qū)給予浸漬后的方形帶毒桑葉片1片，在溫度(26.5±1.0)℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)，24 h后改用新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡第1天，每天調(diào)查幼蟲中毒死亡率，以清水處理為空白對照，每個處理重復3次。采用DPS (15.10版)統(tǒng)計軟件對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進行線性回歸分析［12］，求出致死中濃度(LC50)和95%置信限。

1.2.2 3種農(nóng)藥對2齡家蠶的熏蒸毒性測定 配制10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液(阿維菌素20 mg/L·甲氧蟲酰肼80 mg/L)、24%甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液(甲氧蟲酰肼240 mg/L)、1.8%阿維菌素EW 1 000倍液(阿維菌素18 mg/L)稀釋液供試，分別取配制好的各種農(nóng)藥稀釋液1 mL均勻涂于直徑10 cm的培養(yǎng)皿內(nèi)，把涂有農(nóng)藥稀釋液的直徑10 cm的培養(yǎng)皿放入容積為60 L(高60 cm、直徑36 cm)的聚乙烯塑料桶底部，在距桶底40 cm高處放入裝有30頭2齡起蠶直徑10 cm的培養(yǎng)皿(不加蓋)進行熏蒸毒性試驗，然后以無毒桑葉飼喂家蠶;以77.5%敵敵畏EC 10 000倍液(77.5 mg/L)為農(nóng)藥對照，以清水為空白對照，每個處理重復3次，塑料桶用雙層蓋密封后放置于(30.0±1.0)℃的恒溫室內(nèi)，熏蒸24 h后取出，然后飼喂新鮮無毒桑葉，每24 h調(diào)查中毒死亡蠶頭數(shù)并計算中毒死亡率，飼養(yǎng)至3齡第1天結(jié)束。

1.2.3 3種農(nóng)藥在桑樹上的內(nèi)吸傳導毒性和殘毒期測定 (1)3種農(nóng)藥不同濃度的準備。配制10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液、24%甲氧蟲酰肼SC 2 000倍液和3 000倍液、1.8%阿維菌素EW 900倍液和1 500倍液、24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液+ 1.8%阿維菌素EW 900倍液。(2)桑葉噴藥處理。將上述6種藥液分別均勻噴灑于5株供試桑樹的桑葉葉面，枝條頂端最大葉位以上做好標記，防止采摘未噴到藥液的新生桑葉，不同處理間隔2行桑樹作保護行。其中從10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液、24%甲氧蟲酰肼SC 2 000倍液和3 000倍液3個處理的供試桑樹中各選取4株，在桑樹枝條上半部分用透明塑料袋隔離，只給桑樹枝條下半部分桑葉噴藥，待藥液略干后撕開套在桑樹上的塑料袋頂部并做好固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染，5 d后采取上部未噴藥的桑葉測定不同農(nóng)藥在桑樹的內(nèi)吸傳導毒性。(3)3種農(nóng)藥殘毒期測定試驗。噴藥后20 d起每5 d采摘不同農(nóng)藥不同濃度噴灑的桑葉養(yǎng)蠶，每次分別采摘3個未直接噴藥處理區(qū)的桑葉、6個直接噴藥處理區(qū)的桑葉，以新鮮無毒桑葉為對照，共10個處理區(qū)，每個處理區(qū)30頭3齡起蠶，重復3次，共計30個處理區(qū)，飼養(yǎng)至4齡第1天結(jié)束，逐日調(diào)查記載各處理區(qū)中毒死亡蠶頭數(shù)，計算中毒死亡率。

1.2.4 3種農(nóng)藥家蠶中毒癥狀的觀察 在10%阿維·甲氧蟲酰肼SC和24%甲氧蟲酰肼SC急性毒性和殘毒期測定過程中，觀察記錄供試家蠶的中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種農(nóng)藥對3齡家蠶的急性經(jīng)口毒性

采用浸葉法測定10%阿維·甲氧蟲酰肼SC、24%甲氧蟲酰肼SC、1.8%阿維菌素EW對3齡起蠶的急性經(jīng)口毒性，由表1可以看出，3種供試農(nóng)藥對家蠶的毒性大小依次為1.8%阿維菌素EW(LC50值為0.001 3 mg/L)＞10%阿維·甲氧蟲酰肼SC［LC50值為0.007 8 mg/L(根據(jù)有效含量計算為阿維菌素0.001 6 mg/L·甲氧蟲酰肼0.006 2 mg/L)］＞24%甲氧蟲酰肼SC(LC50值為0.060 9 mg/L)。參照2005年制定的《化學農(nóng)藥環(huán)境評價試驗準則》草案的農(nóng)藥毒性等級劃分新標準［13］，3種供試農(nóng)藥對家蠶的毒性等級均為劇毒級(LC50≤0.5 mg/L)。但24%甲氧蟲酰肼SC的LC50值為1.8%阿維菌素EW的46.85倍，10%阿維·甲氧蟲酰肼 SC的 LC50值為1.8%阿維菌素EW的6.00倍，表明10%阿維·甲氧蟲酰肼SC對家蠶的急性經(jīng)口毒性主要來自于阿維菌素成份。

表1 3種農(nóng)藥對3齡起蠶的急性經(jīng)口毒性測定結(jié)果

2.2 3種農(nóng)藥對2齡家蠶的熏蒸毒性

10%阿維·甲氧蟲酰肼SC、24%甲氧蟲酰肼SC、1.8%阿維菌素EW 3種供試農(nóng)藥1 000倍稀釋液熏蒸處理2齡起蠶24 h后，繼續(xù)飼養(yǎng)至3齡第1天均無中毒癥狀和死亡蠶，發(fā)育進度與清水對照處理無差異;對照農(nóng)藥77.5%敵敵畏EC 10 000倍稀釋液熏蒸處理2齡起蠶，24 h內(nèi)家蠶全部中毒死亡，表明3種供試農(nóng)藥在試驗濃度下對家蠶無熏蒸毒性。

2.3 甲氧蟲酰肼在桑樹上的內(nèi)吸傳導毒性

由表2可知，24%甲氧蟲酰肼SC 2 000倍液、24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液、10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液噴于桑樹枝條下部桑葉，噴藥后5 d采摘桑樹上部未噴藥處理的桑葉飼喂3齡起蠶，死亡率均為100%，表明甲氧蟲酰肼可通過內(nèi)吸作用并向上傳導;噴藥后10 d開始，3種農(nóng)藥處理桑樹的上部桑葉飼喂3齡起蠶的死亡率逐漸下降，24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液于噴藥后25 d時上部桑葉對家蠶無急性中毒反應，10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液于噴藥后30 d時上部桑葉對家蠶無急性中毒反應，24%甲氧蟲酰肼SC 2 000倍液于噴藥后30 d時上部桑葉對家蠶的中毒死亡率仍達22.22% (表2)。

表2 甲氧蟲酰肼在桑樹上的內(nèi)吸毒性測定結(jié)果

2.4 3種農(nóng)藥對3齡家蠶的殘毒期

3種供試農(nóng)藥稀釋液噴于桑樹后間隔不同時間采葉飼喂3齡起蠶，統(tǒng)計中毒死亡率。由表3可知，噴藥后25 d內(nèi)6個農(nóng)藥處理區(qū)的家蠶死亡率均為100%。因桑葉葉齡及養(yǎng)蠶季節(jié)所限，試驗在噴藥后50 d時結(jié)束，24%甲氧蟲酰肼SC 2 000倍液、24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液+1.8%阿維菌素EW 900倍液、10%阿維·甲氧蟲酰肼SC 1 000倍液對3齡起蠶的中毒死亡率仍然達到100%;24%甲氧蟲酰肼SC 3 000倍液對家蠶的中毒死亡率則略有下降，但仍高達97.78%;1.8%阿維菌素EW 900倍液和1 500倍液噴藥后30～50 d對家蠶的中毒死亡率逐漸下降，表明甲氧蟲酰肼在桑葉上的殘毒期明顯長于阿維菌素。

表3 3種供試農(nóng)藥對3齡起蠶的殘毒期測定結(jié)果

由表2、表3還可以看出，相同藥液處理及相同間隔時間，桑樹上部未噴藥處理的桑葉對家蠶的死亡率明顯低于桑樹下部直接噴藥處理的桑葉，表明甲氧蟲酰肼雖有內(nèi)吸傳導作用，但受藥液濃度及生物稀釋作用的影響，內(nèi)吸傳導毒性低于直接噴藥毒性。

2.5 3齡家蠶的中毒癥狀

24%甲氧蟲酰肼SC藥液處理的桑葉飼喂3齡起蠶后的中毒癥狀主要表現(xiàn):食桑少，提早出現(xiàn)眠蠶特征，食下帶毒桑葉2～3 d后，眠蠶蛻皮困難，蠶體變成黑褐色，胸部膨大，頭尾部向腹部彎曲，或扭曲翻滾，至死亡過程較長。1.8%阿維菌素EW的中毒癥狀表現(xiàn):拒食，靜伏，少量吐液，側(cè)倒，體色清白。因阿維菌素對家蠶的毒性明顯高于甲氧蟲酰肼，所以，10%阿維·甲氧蟲酰肼SC的中毒癥狀與阿維菌素一致。

3 小結(jié)與討論

24%甲氧蟲酰肼SC對3齡起蠶的經(jīng)口急性毒性(LC50)為0.060 9 mg/L，1.8%阿維菌素EW的LC50值為0.001 3 mg/L，10%阿維·甲氧蟲酰肼SC的LC50值為0.007 8 mg/L介于24%甲氧蟲酰肼SC和1.8%阿維菌素EW之間。甲氧蟲酰肼和阿維菌素對家蠶均無熏蒸毒性。甲氧蟲酰肼在桑樹上有一定的內(nèi)吸作用。24%甲氧蟲酰肼SC和10%阿維·甲氧蟲酰肼SC在桑葉上的殘毒期明顯長于1.8%阿維菌素EW，表明甲氧蟲酰肼在桑樹上的降解很慢。參照農(nóng)藥對家蠶的毒性與風險性等級劃分標準［13］，田間施藥濃度除以LC50的值大于10為極高風險性。按10%阿維·甲氧蟲酰肼SC、24%甲氧蟲酰肼SC、1.8%阿維菌素EW 3種藥劑的推薦使用濃度與LC50的比值，分別為 10%阿維·甲氧蟲酰肼 SC 11 396～21 368、24%甲氧蟲酰肼SC 1 752～3 678、1.8%阿維菌素EW 6 154～18 462，因此判斷這3種農(nóng)藥對家蠶均具有極高風險性。

甲氧蟲酰肼是蟲酰肼的衍生物，仿昆蟲天然蛻皮激素開發(fā)而成，會使昆蟲蛻皮過程無法完全進行，家蠶攝入此類物質(zhì)后會導致新表皮的結(jié)構(gòu)不完整，使蛻皮半途而廢［14］。呋喃蟲酰肼與甲氧蟲酰肼同為蛻皮激素類殺蟲劑，李云芝等［15］測定的呋喃蟲酰肼對家蠶毒性結(jié)果與本試驗結(jié)果相似。阿維菌素在水稻、蔬菜等作物上的應用極為廣泛，而且與甲氧蟲酰肼的殺蟲機理完全不同，孫淑君等［16］研究表明甲氧蟲酰肼與阿維菌素混配對防治稻縱卷葉螟具有明顯的增效作用。本試驗結(jié)果中10%阿維·甲氧蟲酰肼SC對家蠶的急性經(jīng)口毒性主要來自于阿維菌素成份，10%阿維·甲氧蟲酰肼SC中含2%阿維菌素，但對家蠶的LC5010%阿維·甲氧蟲酰肼SC反而大于1.8%的阿維菌素EW;分析原因，10%阿維·甲氧蟲酰肼SC、24%甲氧蟲酰肼SC均由浙江省上虞市銀邦化工有限公司生產(chǎn)，而1.8%阿維菌素EW由浙江錢江生物化學股份有限公司生產(chǎn)，可能由于阿維菌素生產(chǎn)企業(yè)不同和制劑類型不同導致其毒力出現(xiàn)差異。本試驗結(jié)果表明:甲氧蟲酰肼與阿維菌素混配后，對家蠶的急性經(jīng)口毒性提高到甲氧蟲酰肼的6倍，在微劑量下也容易導致家蠶中毒;而在桑葉上的殘毒期又比阿維菌素明顯延長。因此，這2種藥劑混配進一步加大了對家蠶農(nóng)藥中毒的風險性，建議桑園附近及養(yǎng)蠶區(qū)域避免使用此類農(nóng)藥，以免因家蠶中毒死亡而造成經(jīng)濟損失。

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S884.9

B

1007－0982(2016)04－0036－05

10.16839/j.cnki.zgcy.2016.04.009

2016－07－24;接受日期:2016－09－30

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(編號CARS－22)。

第1作者信息:楊一平(1979—)，女，浙江海寧，本科，農(nóng)藝師。Tel:0573－87635765，E-mail:173067929@qq.com