時　靜，劉海玉，白　鴿，姜　勝，賈　爍，付禮勝，劉思浩，范宏剛（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江哈爾濱150030）

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DMO用于大鼠麻醉效果的觀察

時靜，劉海玉，白鴿，姜勝，賈爍，付禮勝，劉思浩，范宏剛
（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江哈爾濱150030）

摘要：針對國內(nèi)外沒有大鼠專用的復(fù)合麻醉劑，本研究將右旋美托咪啶、咪達(dá)唑侖、強(qiáng)痛定和阿托品配成復(fù)合制劑（DMO）經(jīng)腹腔給藥麻醉大鼠，觀察其對大鼠的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、肌松等效果及對主要生理機(jī)能的影響。結(jié)果顯示，注射DMO后，心率呈先降低后上升的趨勢，與0 min相比變化范圍在11.11%～16.67%；平均動脈壓呈先升高后降低的趨勢，20～30 min維持高血壓狀態(tài)，在其生理耐受范圍內(nèi)。DMO誘導(dǎo)迅速，維持時間適宜，蘇醒后可迅速恢復(fù)；鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、肌松效果良好。

關(guān)鍵詞：DMO；大鼠；麻醉；效果觀察

大鼠常被用于藥物營養(yǎng)代謝、內(nèi)分泌、行為學(xué)、老年病學(xué)、腫瘤、感染性疾病、心血管疾病、心理學(xué)等科研過程中。而在研究中為實驗動物選擇適宜、安全、有效的麻醉方法是保證實驗安全性及數(shù)據(jù)可靠性的重要基礎(chǔ)[1]?，F(xiàn)有大鼠麻醉和保定仍然停留在上述單一藥物的使用、劑量的探討及幾種藥物的相互比較階段，亟需一種新的復(fù)方麻醉制劑解決現(xiàn)有的大鼠麻醉劑在鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、誘導(dǎo)時間、麻醉維持時間等方面存在的不足，以及大鼠應(yīng)激性過大引起的心率過快、血壓過高等突出問題[2]。右旋美托咪啶作為良好的麻醉輔助藥物用于犬、貓等動物麻醉中，目前未見該藥及其復(fù)合其他藥物用于大鼠的臨床麻醉中。本研究將右旋美托咪啶、咪達(dá)唑侖、強(qiáng)痛定和阿托品按照（3∶27∶1∶3，按照藥物同一濃度的體積比）配成復(fù)合制劑（DMO）經(jīng)腹腔給藥麻醉大鼠，觀察其對大鼠的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、肌松等效果及對主要生理機(jī)能的影響。

1　材料與方法

1.1實驗動物SD大鼠15只，2～2.5月齡，雌雄不限，體重258±23 g，黑龍江省中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

1.2主要藥物右旋美托咪啶（輝瑞制藥公司，批號20130211）；咪達(dá)唑侖原粉（購自國內(nèi)某醫(yī)藥公司，純度99.8%）；強(qiáng)痛定（購自國內(nèi)某研究所）；阿托品（山西晉新雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號20130901）；DMO合劑（由右旋美托咪啶、咪達(dá)唑侖、強(qiáng)痛定和阿托品等復(fù)合制成）。

1.3儀器設(shè)備PowerLab信號采集分析系統(tǒng)（澳大利亞ADInstruments公司）。大鼠尾動脈無創(chuàng)血壓測量儀（美國Kent Scientific Corporation），配置適合大鼠的大鼠尾套和脈搏傳感器，聽診器，常規(guī)手術(shù)器械等。

1.4方法取大鼠，稱量體重，待其適應(yīng)試驗場地安靜后，測取其基礎(chǔ)生理指標(biāo)，如心率（HR）、平均動脈壓（MBP）、呼吸頻率（RR）等。將預(yù)先配制好的復(fù)合制劑（DMO）按1 mL/kg體重劑量進(jìn)行腹腔注射。（1）麻醉時期的監(jiān)測：從復(fù)合制劑注入大鼠腹腔至動物翻正反射消失的時間計為麻醉誘導(dǎo)時間；從翻正反射消失到其恢復(fù)之前的時間計為麻醉時間；從翻正反射出現(xiàn)至其恢復(fù)正常行動的時間為蘇醒時間；（2）生理指標(biāo)的監(jiān)測：待大鼠進(jìn)入麻醉狀態(tài)后，將其仰臥固定，連接多導(dǎo)生理監(jiān)測儀并打開電腦LabChart軟件，將PowerLab信號采集分析系統(tǒng)的3個電極NEG、Earth、POS分別刺入右前肢和左、右后肢近胸腹部皮下，盡可能保證電極與皮膚垂直，進(jìn)行心率、心電波形監(jiān)測；同時監(jiān)測血氧飽和度、體溫等指標(biāo)，并記錄呼吸頻率；測量血壓時，將大鼠置于固定器內(nèi)，使用加熱套加熱，待尾動脈擴(kuò)張后，連接尾動脈測量系統(tǒng)，監(jiān)測血壓；（3）鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和肌松效果觀察，分別觀察用藥后5、10、20、30、40、50、60、70、80 min和90 min各時間點大鼠的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和肌松效果。

鎮(zhèn)靜：觀察眨眼、耳動、軀體動、頭頸動、尾動。對聲音刺激反應(yīng)明顯，如給藥前，記“＋”；對聲音刺激反應(yīng)遲鈍，記“±”；對聲音刺激無反應(yīng)，記“－”。

鎮(zhèn)痛：主要通過鉗夾軀干、四肢上部、爪部、尾部進(jìn)行評價。各部疼痛反應(yīng)明顯，記“＋”；疼痛反應(yīng)遲鈍，記“±”；疼痛反應(yīng)消失，記“－”。

肌松：觀察頭頸部、尾、四肢、咬肌和腹壁肌肉松弛程度。（1）用鑷子夾尾提起時如出現(xiàn)回頭和轉(zhuǎn)身反應(yīng)、四肢出現(xiàn)明顯滑動，刺激四肢尚能爬行，記“＋”；夾尾提起時出現(xiàn)轉(zhuǎn)頭、同時四肢輕度滑動，記“±”；無回頭和轉(zhuǎn)身反應(yīng)，記“－”；（2）夾耳提起時如尾可彎曲至水平位置或上翹時，記“＋”；如尾出現(xiàn)彎曲反應(yīng)，記“±”；尾自然下垂，記“－”；（3）用鑷子夾住耳朵提起，如四肢出現(xiàn)掙扎，記“＋”；四肢輕度滑動，記“±”；四肢自然下垂，記“－”；（4）夾耳提起時如后腹部無明顯變化，記“＋”；后腹部略有膨大松弛，記“±”；后腹部明顯膨大松弛，記“－”；（5）咬肌松弛輕拉上、下頜，口腔可順利打開，記“＋”；口腔可打開，但很快可恢復(fù)者，記“±”；不能夠打開或打開后立即恢復(fù)者，記“－”。

1.5統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±S）表示。P＜0.05為統(tǒng)計學(xué)有顯著差異。

2　結(jié)果與分析

2.1復(fù)合制劑麻醉時期的監(jiān)測麻醉誘導(dǎo)期6.60 min±1.35 min，麻醉維持時間131.70 min± 20.40 min，蘇醒時間為3.88 min±1.20 min，蘇醒平穩(wěn)，無異常表現(xiàn)（興奮、復(fù)睡）等。

2.2復(fù)合制劑對大鼠生理指標(biāo)的影響該復(fù)合制劑在麻醉過程中血氧飽和度在92%以上，麻醉10 min后一直保持95%以上；注射后大鼠體溫短暫下降之后平穩(wěn)升高，上升最高近1.0℃；心率呈現(xiàn)先降低后上升的趨勢，與0 min相比變化范圍在11.11%～16.67%。呼吸頻率注藥后呈緩慢下降趨勢，在注藥后40 min降至最低，之后逐漸恢復(fù)，80 min恢復(fù)至正常水平。平均動脈壓在注藥后開始升高，到20 min～30 min維持高血壓狀態(tài)，40 min后呈降低趨勢，到監(jiān)測結(jié)束恢復(fù)至正常水平。

2.3復(fù)合麻醉制劑鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、肌松效果

2.3.1鎮(zhèn)靜效果監(jiān)測結(jié)果從表1可以看出，注藥后部分大鼠從5 min開始變得安靜，對聲音反應(yīng)不敏感。注藥5 min～20 min，大部分大鼠對外界聲音的刺激表現(xiàn)遲鈍，在30 min大鼠基本對外界聲音刺激完全消失，此時進(jìn)入良好的鎮(zhèn)靜狀態(tài)，這種較佳鎮(zhèn)靜效果維持時間約為50 min。

表1　DMO對大鼠的鎮(zhèn)靜效果?。╪＝15）

2.3.2鎮(zhèn)痛效果監(jiān)測結(jié)果注藥后5 min，針刺和鉗夾軀干、四肢上部和尾部時，部分大鼠表現(xiàn)出疼痛反應(yīng)；10 min以后大部分大鼠上述部位的疼痛反應(yīng)完全消失；20 min以后所有大鼠在上述部位的疼痛反應(yīng)完全消失，并且可以維持70 min。夾指趾間時，大鼠在整個實驗過程中均表現(xiàn)出一定程度的疼痛反應(yīng)，在注藥后30 min內(nèi)，表現(xiàn)得十分敏感，但在30 min～60 min內(nèi)，疼痛反應(yīng)有所減少，70 min后逐漸恢復(fù)疼痛敏感狀態(tài)。具體結(jié)果見表2。

表2　DMO對大鼠的鎮(zhèn)痛效果　（n＝15）

2.3.3肌松效果監(jiān)測結(jié)果注射DMO復(fù)合制劑后，前5 min內(nèi)，用鑷子夾尾提起時大鼠出現(xiàn)回頭和轉(zhuǎn)身反應(yīng)、四肢出現(xiàn)明顯滑動，刺激四肢尚能爬行，20 min后上述反應(yīng)基本消失。30 min時，所有大鼠腹部柔軟，觸摸無抵抗；四肢肌肉松弛，牽拉及屈曲無阻力；尾部自然下垂，表明大鼠完全進(jìn)入理想的肌松效果狀態(tài)，該狀態(tài)可以持續(xù)到90 min。見表3。

表3　DMO對大鼠的肌松效果　（n＝15）

3　討論

3.1復(fù)合制劑的一般監(jiān)測循環(huán)、呼吸系統(tǒng)是受麻醉藥物影響較為明顯的兩個系統(tǒng)，該系統(tǒng)的相關(guān)指標(biāo)可以客觀、科學(xué)地評價麻醉方法的安全性及麻醉藥物對機(jī)體生理功能的干擾程度[3]。在對呼吸系統(tǒng)的影響上，在40 min～50 min RR明顯降低，結(jié)合同時間點SPO2的監(jiān)測結(jié)果，表明在此時間段受試動物呼吸受到較為明顯的抑制，在其他時間內(nèi)RR降低不明顯。在對循環(huán)系統(tǒng)的影響上，整個麻醉過程中，大鼠心率顯著降低，且基本維持穩(wěn)定狀態(tài)，這一結(jié)果符合研究表明的右美托咪啶不能刺激外周α2受體明顯引起心率的下降[4]，阿托品抑制迷走神經(jīng)，提高心率[5]，二者相互作用，最后可維持心率穩(wěn)定狀態(tài)；研究表明，右旋美托咪啶可以引起短暫性的血壓升高，試驗結(jié)果中20 min～30 min同樣出現(xiàn)了高壓狀態(tài)。整個實驗過程中大鼠體溫變化不明顯，維持穩(wěn)定狀態(tài)，該復(fù)合制劑并未引起非常嚴(yán)重的并發(fā)癥。

3.2復(fù)合麻醉制劑鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、肌松效果該復(fù)合制劑在10min以后大鼠對聲音刺激反應(yīng)基本消失，說明DMO具有良好的鎮(zhèn)靜效果，可能由于右旋美托咪啶激活負(fù)責(zé)調(diào)解覺醒與睡眠的藍(lán)斑核α2受體，因而產(chǎn)生自然非動眼睡眠（NREM）[6]，發(fā)揮抗交感和鎮(zhèn)靜的作用[7]；DMO在軀干、四肢上部和尾部鎮(zhèn)痛效果確實，雖然右美托咪啶通過激動突觸前膜受體進(jìn)而抑制去甲腎上腺素的釋放或結(jié)合脊髓內(nèi)α2受體發(fā)揮良好鎮(zhèn)痛作用[8-9]，但在試驗中發(fā)現(xiàn)鉗夾指間還有一定疼痛反應(yīng)，分析這與此處神經(jīng)末梢極為豐富和藥物分布濃度低有關(guān)。目前課題組已將該制劑用于大鼠子宮卵巢摘除術(shù)中，鎮(zhèn)痛效果確實持久，可順利完成相關(guān)的手術(shù)操作；在肌松效果上，30 min以后所有大鼠完全進(jìn)入理想的肌松效果狀態(tài)，該狀態(tài)可以持續(xù)到90 min。

4　結(jié)論

DMO對大鼠呼吸、循環(huán)系統(tǒng)的影響較為輕微，均在大鼠生理耐受范圍之內(nèi)；誘導(dǎo)迅速，維持時間適宜，蘇醒后可迅速恢復(fù)；鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、肌松效果良好。

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Theeffect of DMO for anesthesia observed in rats

SHI Jing，LIU Hai-yu，BAI Ge，JIANG Sheng，JIA Shuo，F(xiàn)U Li-sheng，LIU Si-hao，F(xiàn)AN Hong-gang
（College of Veterinary Medicine，Northeast Agricultural University，Harbin 150030，China）

Abstract：Since there is no specific composite anesthetic for rats in the world, this study will investigate the effects of DMO including dexmedetomidine，midazolam，bucinnazine and atropine by intraperitoneal administration on the sedation，analgesia，muscle relaxants and the impacts on major physiological functions for anesthetized rats . The results showed that：after injection with DMO，heart rate exhibited an upward trend after the decline compared with that at 0 min，and varied from 11.11%～16.67%；mean arterial pressure increased first and then decreased，maintaining blood pressure state at 20～30 min，which is within their physiological tolerance.DMO induced rapid，appropriate duration，and the rats can be quickly restored after awakening.Also，analgesic，sedative，and muscle relaxant effect is good.

Key words：DMO；rat；anesthesia；observation

Corresponding author：FAN Hong-gang

通訊作者：范宏剛，E-mail：fanhonggang2002@163.com

作者簡介：時靜（1991-），女，碩士生，從事動物麻醉與鎮(zhèn)痛工作，E-mail：shijingsl2011@163.com

基金項目：國家自然科學(xué)基金項目（31001092）；黑龍江省普通高等學(xué)校重點實驗室開放課題資助項目（yy-2012-11，mz-2012-10）；東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目（2013026）

收稿日期：2014-04-09

中圖分類號：R - 332

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：0529- 6005（2016）01- 0113- 03