王寧
(遼寧省大連市旅順口區(qū)龍頭動物衛(wèi)生監(jiān)督所,遼寧大連116051)
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豬瘟與仔豬白痢混感的診治
王寧
(遼寧省大連市旅順口區(qū)龍頭動物衛(wèi)生監(jiān)督所,遼寧大連116051)
豬瘟曾經(jīng)被認為是豬霍亂,是一種世界性的高度接觸性傳染病,被世界衛(wèi)生組織列入OIE疾病名錄,我國也把其列入一類傳染病。多急性發(fā)生、死亡率高,經(jīng)常伴發(fā)其他病毒、細菌及寄生蟲病的合并感染,死亡率高,給養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴重的危害。2015年4月,筆者通過實驗室確診了一例仔豬白痢與豬瘟混感病例,現(xiàn)報告如下。
大連市旅順口地區(qū)某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)母豬55頭,有4窩46頭2~3周齡的仔豬相繼出現(xiàn)腹瀉、體溫升高,曾采用抗生素類藥物治療,收效甚微,3~5d后出現(xiàn)死亡,累計發(fā)病22頭,死亡8頭,整個病程發(fā)病率為47.83%,病死率為36.36%。
2周齡左右的仔豬突然相繼出現(xiàn)體溫升高,精神沉郁,嗜睡,泌乳減少,腹瀉,排白色糊狀的稀便,有的排灰白色油膏狀有形的糞便,后軀污穢不潔。眼睛有膿性眼眵,仔豬脫水,皮膚蒼白,有的皮膚上有細小的出血點。發(fā)病后期,脫水死亡。
剖檢4頭仔豬,可見脾臟不腫大,在其邊緣有不同數(shù)量的黑紫色的出血性梗死丘;腎臟貧血蒼白,表面有細小的出血點;肝臟有少量小米粒大小的灰白色壞死灶;肺臟有粟粒大小的出血斑點;全身淋巴結(jié)腫大,周邊有紫色的出血,中間貧血,呈現(xiàn)典型的“大理石樣變”,膀胱、膽囊黏膜及會厭軟骨均有大小不一、數(shù)量不等的出血點。個別仔豬出現(xiàn)扁桃體壞死。胃內(nèi)有乳白色的凝乳塊,整個腸道充滿和腹瀉便相類似灰白色水樣或黏稠的內(nèi)容物。小腸黏膜呈現(xiàn)卡他性炎癥。
4.1綜合診斷根據(jù)發(fā)病年齡、臨床癥狀和病理變化,可初步診斷為仔豬白痢和豬瘟的混合感染。
4.2實驗室診斷
4.2.1細菌的涂片鏡檢取小腸內(nèi)容物或黏膜刮取物以及相應(yīng)腸段的腸系膜淋巴結(jié),也可取新鮮糞便,制成涂片或觸片,干燥,固定,革蘭氏染色后鏡檢,可見到革蘭氏陰性,鈍圓、單在的小桿菌。
4.2.2細菌的分離培養(yǎng)將病料接種于伊紅美蘭培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上,置于37℃培養(yǎng)箱中18~24h。在伊紅美蘭培養(yǎng)基上形成圓形、隆起、光滑、濕潤、具有金屬光澤的黑紫色菌落;在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上形成粉紅色的菌落。
4.2.3生化試驗將分離的菌純培養(yǎng)后接種生化鑒定管,培養(yǎng)18~24h,結(jié)果發(fā)現(xiàn)糖發(fā)酵試驗(葡萄糖、麥芽糖、甘露醇)、吲哚試驗、甲基紅試驗均為陽性,而VP試驗、枸櫞酸鹽利用試驗、硫化氫試驗、尿素分解試驗為陰性。
4.2.4豬瘟RT-PCR的檢測參照文獻報道(吳鑫,2008),由寶生物工程(大連)有限公司合成引物。上游引物P1:5’-CAGGTATGCGATCTCGTCAACCA-3’;下游引物P2:5’-GGGCACAGCCCAAATCCGAAGT-3’,目的條帶為267bp。RNA提取(美國promega公司)方法進行。反應(yīng)體系(25μL):5×reactionbuffer5μL,2.5mMdNTPs3μL,25mMMn (OAc)22.5μL,上下游引物P1、P2各1μL,10U/μLRNaseInhibitor1μL,2.5U/μLrTthDNA Polymerase1μL,RNA1μL,無酶水9.5μL。反應(yīng)條件:60℃反轉(zhuǎn)錄30min;94℃預(yù)變性2min;94℃變性30s;55℃退火30s,72℃延伸1min,30個循環(huán));72℃溫育5min。取RT-PCR產(chǎn)物5μL,于1.2%瓊脂糖凝膠中電泳,紫外線下觀察結(jié)果(圖1),并拍照記錄。
圖1 PCR臨床樣品檢測結(jié)果
根據(jù)臨床診斷、細菌的分離培養(yǎng)及豬瘟PCR檢測確診為豬瘟和仔豬白痢的混合感染。
5.1分別肌肉注射干擾素0.5mL/頭,排疫肽0.5mL/頭,頭孢菌素3mg/kg·bw,連用3d。
5.2采用拜凈按1:1200帶豬進行環(huán)境消毒,同時1:2500飲水消毒。
6.1本次感染是由于懷孕母豬妊娠前未接種豬瘟疫苗,導(dǎo)致仔豬母源抗體水平低導(dǎo)致感染發(fā)病。因此,哺乳仔豬20日齡免疫豬瘟的同時應(yīng)對母豬進行免疫,使下一窩仔豬獲得良好的免疫。
6.2仔豬白痢發(fā)病的原因主要與母豬的飼養(yǎng)管理、環(huán)境衛(wèi)生條件等因素有關(guān),母豬的過肥、過瘦,環(huán)境衛(wèi)生條件差均可誘導(dǎo)本病的發(fā)生。常發(fā)豬場可應(yīng)用K88、K99大腸桿菌疫苗進行免疫預(yù)防或應(yīng)用抗菌素進行藥物預(yù)防。
6.3制定合理的免疫、驅(qū)蟲和消毒程序,搞好環(huán)境衛(wèi)生,消除應(yīng)激因素。
DOI:10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.02.060