張 平 張俊波 賀志昊

（1.畢節(jié)市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州畢節(jié) 551700；2.銅仁學(xué)院，貴州銅仁 554300）

常用抗菌藥物對綿羊肺炎支原體分離株的抗菌活性分析

張 平1張俊波2賀志昊1

（1.畢節(jié)市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州畢節(jié) 551700；2.銅仁學(xué)院，貴州銅仁 554300）

目的：分析常用抗菌藥物對綿羊肺炎支原體分離株的抗菌活性。方法：選取2015年某羊場發(fā)生綿羊支原體性肺炎中死亡的17只病羊肺臟為研究對象，從研究對象中提取分離綿羊肺炎支原體病原菌進(jìn)行抗菌活性試驗。結(jié)果：17株病原菌對喹諾酮類藥物敏感性最強(qiáng)（均達(dá)到100%），對氨基糖苷類及磺胺類的敏感性最差（分別鏈霉菌29.41%，慶大霉素17.65%，磺胺二甲嘧啶5.88%）；喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類藥物的敏感性顯著優(yōu)于氨基糖苷類及磺胺類藥物，比較差異值P＜0.05，有差異統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：通過進(jìn)行病原菌抗菌活性分析，可以尋找到敏感性較高的抗菌藥物，對畜牧動物尤其是綿羊、山羊的感染性疾病治療有極為重要的用藥指導(dǎo)意義。

常用抗菌藥物；綿羊肺炎；支原體分離株；抗菌活性

綿羊肺炎（羊傳染性胸膜肺炎）主要是由支原體引起的高度接觸性傳染病，又稱為綿羊支原體性肺炎，主要是綿羊在感染絲狀支原體山羊亞種后引發(fā)，根據(jù)其感染情況可分為慢性及急性，主要癥狀慢性表現(xiàn)為咳嗽和腹瀉、鼻涕時有時無、身體衰弱，急性表現(xiàn)為體溫升高、短濕咳嗽、伴有漿性鼻漏、鼻液呈鐵銹色、食欲銳減、呼吸困難等，具有極強(qiáng)的傳染性和死亡率。目前對該疾病的主要采用抗菌類藥物進(jìn)行治療如喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、氨基糖苷類及磺胺類等，由于抗菌藥物的濫用已有報道表明綿羊肺炎支原體對部分抗菌藥物產(chǎn)生一定的耐藥性而嚴(yán)重影響該病癥的治療，對畜牧業(yè)產(chǎn)生一定影響，為此我們進(jìn)行常用抗菌藥物對綿羊肺炎支原體分離株的抗菌活性分析研究，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 研究對象：選取2015年某羊場發(fā)生綿羊支原體性肺炎中死亡的17只病羊肺臟為研究對象，17只病死羊的羊齡在3個月～3歲之間，公羊8只，母羊9只；其中6只自發(fā)病到死亡時間為4～5d，其余11只自發(fā)病到死亡時間為15～36d之間。所有死羊發(fā)病后均使用抗菌藥物進(jìn)行治療。

1.1.2 研究材料：綿羊肺炎支原體參考株Y-98以及絲狀支原體山羊亞種參考株P(guān)G3購自國家獸醫(yī)微生物菌種保藏管理中心。

1.2 方法

1.2.1 取樣：從病死羊肺臟中提取組織進(jìn)行病原菌株培養(yǎng)，提取后進(jìn)行感凍處理。

1.2.2 病原株培養(yǎng)：參照絲狀支原體山羊亞種檢測方法（NY/T 1468-2007）配制羊支原體液體培養(yǎng)基。取凍干保存的綿羊肺炎支原體分離株、絲狀支原體分離株及參考株Y-98和PG3，使用1ml支原體培養(yǎng)基均勻搖晃并呈懸浮狀態(tài)后再分別接種到5ml培養(yǎng)基內(nèi)，并進(jìn)行密封處理。置于二氧化碳（5%～10%含量）恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3 ～5d（溫度控制在37℃），當(dāng)觀察到培養(yǎng)液呈橙黃色時按1∶5（菌液與液：培養(yǎng)基）的比例進(jìn)行傳代接種。將傳代成功的藥菌進(jìn)行純化處理，并調(diào)整濃度置于冰箱保存。

1.2.3 藥敏試驗：采用半自動細(xì)菌鑒定藥敏分析儀（SCAN4）以及對應(yīng)藥敏紙片將病原株進(jìn)行常用抗菌藥物的抗菌活性試驗。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用 WHONET5.4 軟件以及SPSS19.0軟件統(tǒng)計分析，藥敏結(jié)果（耐藥率）比較采用x2檢驗，當(dāng)P＜0.05 為有差異統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

（1）17只研究對象肺臟均檢出絲狀支原體山羊亞種。

（2）對檢出的17株絲狀支原體山羊亞種進(jìn)行常用抗菌藥物的藥敏試驗結(jié)果見表1，可以看該病原菌對到喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類藥物的敏感性較高，顯著優(yōu)于氨基糖苷類及磺胺類藥物，比較差異值P＜0.05，有差異統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 17株絲狀支原體山羊亞種常用抗菌藥物藥敏試驗統(tǒng)計表（株數(shù)n，敏感率%）

3 討論

綿羊肺炎具有流行性、接觸傳染性強(qiáng)等特特點，主要通過空氣以及飛沫經(jīng)呼吸道傳染，在冬季由于羊群缺乏足夠營養(yǎng)加上天氣寒冷等因素極易發(fā)生，加上冬季尤其是牧場羊群密集集中，更增加該疾病的傳染和進(jìn)展。通常及早發(fā)現(xiàn)并采用抗菌藥物進(jìn)行治療一般可獲得較好的效果，但由于抗菌藥物的長期過量使用使綿羊肺炎支原體出現(xiàn)一定的耐藥性，從而增加治療難度，為此我們進(jìn)行本文內(nèi)容的研究。

通過研究我們看到，在常用的抗菌藥物中已經(jīng)出現(xiàn)耐藥性較高的主要藥物為氨基糖苷類及磺胺類藥物，而對病原菌極為敏感的主要藥物為莫西沙星、克林沙星、乙酰螺旋霉素，其它藥物如麥迪霉素、克拉霉素、螺旋霉素、羅紅霉素等也有不俗的表現(xiàn)，表明喹諾酮類、大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物對治療綿羊肺炎可獲得較好的滅菌效果，在以前作為主要抗菌藥物的四環(huán)素類藥物已經(jīng)開始出現(xiàn)較高的耐藥性，表明該類抗菌藥物在臨床應(yīng)用中應(yīng)該引起重視，盡量避免使用以降低治療效果。

綜上所述，隨著抗菌藥物在畜牧業(yè)的廣泛使用在取得一定效果的同時也提高病原菌的耐藥性，表明在治療由支原體引起的綿羊肺炎時應(yīng)盡量選擇敏感性高的抗菌藥物并且合理用量，以提高治療效果并降低病原菌的耐藥性。

[1] 程光勝，王豪舉.山羊傳染性胸膜肺炎病原的分離鑒定與藥敏試驗[J].中國畜牧獸醫(yī)，2015，33（9）：68-70．

[2] 杜永風(fēng)，文心田，曹三杰，等.山羊傳染性胸膜肺炎病原分離與鑒定[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2014，28（6）：618-621．

貴州省教育廳自然科學(xué)研究重點項目（黔教合KY字（2015）411號）