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一種由污染引起的葡萄葉斑病的調(diào)查

摘要：對山東省濟寧市農(nóng)業(yè)科學研究院寄來的一份葡萄異常葉片樣品進行了癥狀描述、保濕鏡檢、病原菌分離鑒定及回接，結(jié)果表明：該葡萄異常葉片并非由病原菌侵染引起。于是對該葡萄園的地理周邊環(huán)境進行了調(diào)查，發(fā)現(xiàn)位于該園上風口有一家磚廠，明確該現(xiàn)象是由磚廠生產(chǎn)過程中所產(chǎn)生的污染引起。

關(guān)鍵詞：葡萄；葉斑??；調(diào)查

葡萄是我國果業(yè)生產(chǎn)的重要品種。農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計資料顯示，截至2010年底，我國葡萄栽培總面積達55.2萬hm2，居世界第4位[1]，病害嚴重影響葡萄的產(chǎn)量與品質(zhì)。本研究室在收到病樣后，通過癥狀描述、病原菌分離鑒定及果園地理位置調(diào)查，以期準確對病樣進行診斷，從而為葡萄生產(chǎn)提供科學指導。

1　材料與方法

1.1材料。2015年8月21日，本研究室收到山東省濟寧市農(nóng)業(yè)科學研究院寄來的一份葡萄病葉樣品。

1.2方法

1.2.1癥狀描述及保濕鏡檢。該樣品葉片褪綠、葉脈明顯，上有褐色枯斑，病斑不規(guī)則、較小，嚴重時連片、出現(xiàn)穿孔。病斑上無明顯侵染點，無霉層。病斑上滴無菌水保濕12 h后鏡檢。

1.2.2病原菌分離及鑒定。將病葉病斑交界處剪成2 mm見方的小塊，用75%酒精消毒30 s，0.1%升汞消毒30 s，無菌水漂洗3遍后置于PDA培養(yǎng)基上，26℃、黑暗條件培養(yǎng)3 d，挑取菌落邊緣新鮮菌絲，轉(zhuǎn)入PDA平板上繼續(xù)培養(yǎng)，純化后保存?zhèn)溆肹2]。刮取純化菌株的菌絲用液氮研成粉末，用艾德萊真菌基因組提取試劑盒提取基因組DNA，用真菌通用引物ITS1&ITS4進行PCR擴增后，交由北京諾賽基因組研究中心測序，測序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站上進行BLAST比對。

1.2.3病原菌回接。將已知鑒定結(jié)果的菌株在PDA培養(yǎng)基上26℃黑暗培養(yǎng)5 d后，制成孢子懸浮液，噴到葡萄葉片上，隔3 d再噴1遍，第2次接種后7 d觀察發(fā)病情況，噴清水作為對照。

1.2.4果園地理位置調(diào)查。對寄樣人進行電話詢問果園的地理位置及周圍種植作物。

2　結(jié)果與分析

2.1鏡檢結(jié)果與分離鑒定結(jié)果。保濕12 h進行鏡檢未見到病原孢子；分離得到的真菌有2種，一種是棘孢曲霉，另一種是互隔交鐮孢霉。

2.2回接結(jié)果。所有處理的回接葉片上均未發(fā)現(xiàn)生長異常現(xiàn)象，透光看葉片上也無褪綠小點。

2.3果園地理位置。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)位于該葡萄園上風口處有一家磚廠，磚廠工作正常運行。

3　結(jié)論與討論

通過本研究回接結(jié)果的分析及文獻查證，結(jié)果表明：孢曲霉是葡萄生產(chǎn)上的生防菌[3]，未見互隔交鐮孢霉能引起葡萄病害的相關(guān)證據(jù)，綜合癥狀描述與保濕鏡檢，我團隊認為該現(xiàn)象并非由真菌侵染引起。

由于該園上風口處有一家磚廠，在磚廠生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生粉塵及二氧化硫、氮氧化物、煙塵等空氣污染，在有風天氣，污染物會飄到該園葡萄葉片上，其對葡萄產(chǎn)生的危害主要有：阻塞植物氣孔，降低蒸騰作用；遮蔽光照，降低光合作用；對植物葉片上的蠟質(zhì)層產(chǎn)生磨損，抑制植物的生理代謝；粉塵中的可溶性鹽與水作用，由氣孔侵入到葉片內(nèi)部，使植物葉片形成壞死斑點[4]。因此，我們認為此次葡萄葉斑病是由周圍環(huán)境污染造成的。環(huán)境污染，尤其是空氣污染，不僅危害人類的身體健康，對多種作物的正常生長也會產(chǎn)生巨大威脅，就此我們對該果園及受到相似環(huán)境污染為害的作物提出幾點指導意見：①加強肥水管理，增強作物長勢；②在大風天氣葉片噴水，沖淋污染物；③噴施葉片保護劑，注意防病防蟲；④在今后果園或其他作物種植過程中盡量避免選擇有污染源的地域。

參考文獻

[1]王海波，王孝娣，郝志強，等.我國葡萄栽培科研進展[J] .中國果樹，2013 (1)：62～64.

[2]方中達.植病研究法(第三版) [M] .北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998.

[3]張稼涵.西北地區(qū)葡萄園溶磷真菌的篩選、鑒定和促生效應(yīng)研究[D] .楊凌：西北農(nóng)林科技大學，2010.

[4]歐金玉，田燕.治理磚廠污染為何這么難[N] .湖南日報，2014 - 7 - 9.

071000河北省農(nóng)林科學院植物保護研究所張海劍

050061河北省農(nóng)林科學院石家莊果樹研究所索相敏