●盧欣 王金霞 尚峨 王迎

梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測研究進(jìn)展

●盧欣 王金霞 尚峨 王迎

目前梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)主要分為病原體檢測、血清學(xué)檢測、分子生物學(xué)檢測三類，各有其優(yōu)缺點(diǎn)，本文就梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)做一綜述。

梅毒；檢測；進(jìn)展；病原體；血清學(xué)；分子生物學(xué)

梅毒（Syphilis）是由梅毒螺旋體（Treponema pallidum，TP）引起的一種慢性、接觸性人類性傳播疾病，與結(jié)核、麻風(fēng)并稱世界三大慢性傳染病。梅毒的防治主要在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療。目前臨床上主要依據(jù)患者的流行病學(xué)史、臨床癥狀和體征、實(shí)驗(yàn)室檢測等三方面的綜合信息給出梅毒的診斷，而梅毒導(dǎo)致的皮膚損害等臨床癥狀不典型，極易與其他疾病混淆，其實(shí)驗(yàn)室檢測便顯得尤為重要。

1 梅毒病原體檢測

梅毒病原體檢測是早期梅毒診斷的主要方法。特別是在一期和二期梅毒早期患者體內(nèi)梅毒螺旋體抗體尚未產(chǎn)生或數(shù)量較少時(shí)，病灶處梅毒螺旋體的檢測便顯得尤為重要。檢測包括暗視野顯微鏡檢查，活體組織檢查和多功能顯微診斷儀檢查等方法。

（1）暗視野顯微鏡（Dark field microscope，DFM）法 用500×暗視野顯微鏡觀察，在暗背景下梅毒螺旋體呈白色，運(yùn)動(dòng)快速或緩慢圍繞長軸旋轉(zhuǎn)，此法要求所用物鏡的數(shù)值孔徑須在1.00-1.25之間，且鏡頭、載玻片、蓋玻片必須清潔無塵。

（2）免疫熒光染色法 根據(jù)抗原抗體特異性反應(yīng)，將梅毒螺旋體用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的抗梅毒螺旋體抗血清或單克隆抗體染色后，在熒光顯微鏡下可觀察到黃綠色熒光。

2 梅毒血清學(xué)試驗(yàn)

梅毒血清學(xué)試驗(yàn)是梅毒診斷的最主要的實(shí)驗(yàn)室檢查方法，根據(jù)所用抗原不同可分為兩類。

（1）梅毒螺旋體非特異性抗體試驗(yàn)用心磷脂作抗原，測定血清中抗心磷脂抗體，即反應(yīng)素。包括康、瓦氏試驗(yàn)，性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)( VDRL) ，快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)( RPR) ，不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR) ，甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)

其中最常用TRUST。由于反應(yīng)素并非只存在于梅毒患者體內(nèi)，在很多疾病過程中機(jī)體也會(huì)產(chǎn)生類似抗原抗體，也可造成假陽性的結(jié)果，如瘧疾、結(jié)核和麻風(fēng)等; 此外，懷孕、老年人、結(jié)締組織疾病、腫瘤和吸毒等都可能造成非螺旋體檢查的假陽性。目前多數(shù)醫(yī)院列作梅毒的常規(guī)篩查試驗(yàn)。由于患者經(jīng)治療后反應(yīng)素消失或陰轉(zhuǎn)，因此這類試驗(yàn)可觀察療效，復(fù)發(fā)及再感染，但其敏感性高而特異性較低。此類試驗(yàn)適于二期梅毒，而不適于診斷一、三期梅毒，包括潛伏梅毒、神經(jīng)梅毒。

（2）梅毒螺旋體特異性抗體試驗(yàn)用活的或死的梅毒螺旋體或它的某些特異肽段來作抗原測定抗螺旋體抗體。傳統(tǒng)方法包括熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTAABS)，梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA) ，梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)，梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA) ，這類試驗(yàn)敏感性和特異性均高，一般用作確認(rèn)試驗(yàn)。檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG 或IgM 抗體。該抗體即使患者經(jīng)過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應(yīng)持續(xù)存在陽性，因此，不能用于觀察療效。

3 分子生物學(xué)檢測

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測梅毒螺旋體DNA已在臨床上逐步得到應(yīng)用。PCR 診斷一期梅毒的靈敏度最高。是目前診斷梅毒螺旋體的先進(jìn)方法。此法主要是針對編碼梅毒螺旋體特異性抗原的DNA開放編碼區(qū)而建立的體外DNA 擴(kuò)增試驗(yàn)，檢測標(biāo)本為血（血清、全血）、羊水、腦脊液、尿、皮損材料（分泌物、組織）等。PCR技術(shù)是梅毒血清學(xué)檢測的有益補(bǔ)充。但當(dāng)前的PCR技術(shù)仍存在引物的非特異性、對部分標(biāo)本敏感度低、實(shí)驗(yàn)室及操作人員要求較高等缺點(diǎn)，使應(yīng)用受到了一定限制。由于梅毒基因有多個(gè)分型，即使采用常規(guī)的PCR 方法檢測也可能出現(xiàn)假陰性。

4 小結(jié)及展望

梅毒的實(shí)驗(yàn)室檢測方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)，但目前還沒有任何一種方法能完全滿足臨床要求，但我們相信隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，必將出現(xiàn)一種簡便、快速、準(zhǔn)確、低成本的新型診斷方法，使梅毒患者得以早診斷、早治療，最終全面控制梅毒流行。

（作者單位：北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院）

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